甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16 和 FHIT 基因甲基化及其表达的影响

doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2014.05.007

癌变·畸变·突变

甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16 和 FHIT 基因甲基化及其表达的影响

尹东¹，黄思语²，陈艳^2，3，*

新疆医科大学附属肿瘤医院胃肠外科，新疆乌鲁木齐 830011

收稿日期:2014-05-05 修回日期:2014-06-11 出版日期:2014-09-30 发布日期:2014-09-30
通讯作者: 陈艳，Tel：0991-4365875，E-mail：ychen88@sina.com
作者简介:尹东(1970- )，男，汉族，博士，副教授，主任医师，研究方向：胸腹部恶性肿瘤的基础与临床研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81060240)

Effects of MNNG on methylation and expression of p16 and FHIT genes in normal esophageal epithelial cells in Kazakhs

YIN Dong¹，HUANG Si-yu²，CHEN Yan^2，3，*

Tumor Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011

Received:2014-05-05 Revised:2014-06-11 Online:2014-09-30 Published:2014-09-30

摘要/Abstract

摘要：

目的：探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16和脆性组氨酸三联体(FHIT)基因甲基化状态及其表达的影响。方法：体外培养哈萨克族人群正常食管上皮细胞，用含MNNG浓度分别为0.75、1.50和3.00 μg/mL的培养基培养24 h，同时设立空白对照组。采用甲基化特异性聚合酶链(MSP)法检测p16和FHIT基因甲基化状态，实时荧光定量PCR(real time PCR)、Western blot法分别检测p16和FHIT mRNA及蛋白表达水平。结果：与对照组比较，各浓度MNNG处理组细胞p16和FHIT基因甲基化状态均保持未甲基化状态不变。各组细胞p16 mRNA和蛋白表达水平与对照组比较均升高，差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；0.75 μg/mL MNNG处理组细胞FHIT mRNA表达水平低于对照组(P<0.01)，而3.00 μg/mL MNNG处理组细胞FHIT mRNA表达水平高于对照组(P<0.05)，且3.00 μg/mL MNNG处理组FHIT蛋白表达水平较对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：MNNG可促进哈族人群正常食管上皮细胞p16、FHIT mRNA和蛋白的表达。

关键词: 哈萨克族, 食管上皮细胞, p16, FHIT

Abstract:

OBJECTIVE: To investigate the effects of MNNG on methylation and expressions of p16 and FHIT genes in normal esophageal epithelial cells in Kazakhs. METHODS：Kazakh people’s normal esophageal epithelial cells were culture in vitro in medium containing MNNG concentrations of 0.00，0.75，1.50，and 3.00 mg/mL for 24 h. Methylation of p16 and FHIT were analyzed by methylmion specific PCR(MSP)，the mRNA and protein level of p16 and FHIT were measured by real time PCR (RT-PCR) and Western blot. RESULTS：Compared with the control group， p16 and FHIT gene methylation status did not change in treated groups，but the expressions of p16 mRNA and protein level in treated groups were significantly higher than the control group(P<0.05 or P<0.01). The expressions of FHIT mRNA level in 0.75 μg/mL group was significantly decreased compared with the control group(P<0.01)，but in 3.00 μg/mL group FHIT mRNA and protein levels were significantly increased(P<0.05). CONCLUSION：At certain concentration， MNNG could increase the expressions of p16 and FHIT in normal esophageal epithelial cells in Kazakhs.

Key words: Kazakhs, esophageal epithelial cells, p16, FHIT

尹东，黄思语，陈艳. 甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16 和 FHIT 基因甲基化及其表达的影响[J]. 癌变·畸变·突变, doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2014.05.007.

YIN Dong，HUANG Si-yu，CHEN Yan. Effects of MNNG on methylation and expression of p16 and FHIT genes in normal esophageal epithelial cells in Kazakhs[J]. Carcinogenesis, Teratogenesis & Mutagenesis, doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2014.05.007.

参考文献

[1] 马俪珍，张健斌，孟培培. 食品中亚硝胺类化合物的危害及控制研究进展[J]. 食品与保鲜，2012，10(2)：1-4.

[2] Domenico P，Calogero S，Claudio C，et al. O6-alkylguanines， dietary N-nitroso compounds，and their precursors in gastric cancer[J]. Nutr Cancer，2001，39(1)：42-49.

[3] Blasiak J，Trzeciak A，Gasiorowska A，et al. Vitamin C and quercetin modulate DNA damaging effect of N-methyl-n'-nitro-n-nitrosoguanidine (MNNG)[J]. Plant Food Hum Nutr，2002， 57(1)：53-61.

[4] Yamashita S，Wakazono K，Sugimura T，et al. Profiling and selection of genes differentially expressed in the pylorus of rat strains with different proliferative responses and stomach cancer susceptibility[J]. Carcinogenesis，2002，23(6)：923-928.

[5] Takahashi H，Shikata N，Tsubura A. Immunohistochemical reaction patterns of keratins in MNNG induced shrew oesophageal carcinomas[J]. Virchows Archiv，1994，424(3)： 267-271.

[6] 赵燕，陈艳. 哈萨克、汉族食管癌p16基因甲基化及其表达的研究[J]. 新疆医科大学学报，2011，34(7)：29-32.

[7] 李磊，邓彦超，赵燕，等. 新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化及其与预后的关系[J]. 癌变·畸变·突变，2012，24(2)：54-57.

[8] 黄思语，阿尔孜古丽·吐尔逊，邓彦超，等. 哈萨克族食管正常上皮细胞的原代培养方法[J]. 新疆医科大学学报，2014，37(3)：277-279.

[9] Wang LD，Zhou Q，Yang CS. Esophageal and gastric cardia epithelial cell proliferation in northern Chinese subjects living in a high incidence area[J]. J Cell Biochem，1997，28(29)：159-165．

[10] 赵凤娟，云妙英，张严，等. 新疆哈萨克族食管癌研究进展[J]. 中央民族大学学报：自然科学版，2009，18(3)： 85-89.

[11] David B，Silvestre V，Mario FF. Molecular analysis of a multistep lung cancer model induced by chronic inflammation reveals epigenetic regulation of p16 and activation of the DNA damage response pathway[J]. Neoplasia，2007，9(10)：840-845.

[12] 张喆，郑荣生. 乳腺癌患者血清中p16基因甲基化状态的研究[J]. 临床肿瘤学杂志，2010，15(5)：21-24.

[13] 王凡，谢新纪，朴颖实，等. 食管鳞癌和反流性食管炎中p16和hMLH1基因甲基化的探讨[J]. 中华病理学杂志，2011，40(4)：537-539.

[14] Kyung KD，Seon KL，Yun ST，et al. Role of 5'-CpG island hypermethylation of the FHIT gene in cervical carcinoma[J]. J Gynecol Oncol，2009，19(2)：117-122.

[15] 方健，高燕宁. FHIT基因研究进展[J]. 中华病理学杂志，2003，26(4)：76-78.

[16] Mohammad R，Dhillon SV，Ahmad A，et al. Promoter hypermethylation in tumor suppressing genes p16 and FHIT and their relationship with estrogen receptor and progesterone receptor status in breast cancer patients from Northern India[J]. Translat Oncol，2009，2(4)：264-70.

[17] 郭晓青，刘艳凤，郭瑞霞，等. 食管癌变过程中p16和FHIT 甲基化与蛋白缺失表达关系的研究[J]. 现代预防医学，2008，13(14)：149-151，153.

[18] Mathew R，Arora S，Khanna R，et al. Alterations in Cyclin D1 expression in esophageal squamous cell carcinoma in the Indian population[J]. J Cancer Res Clin Oncol，2001，127(4)： 251-257.

[19] 谷化平，黄勇，尚培中. 细胞周期素D1和p16蛋白表达与胆管癌转移和预后的关系[J]. 肝胆胰外科杂志，2013， 26(3)：47-49，59.

[20] Hiroyuki M，Naoshi F，Nobuho T，et al. Aberrant P16(ink4a) methylation is a frequent event in colorectal cancers： prognostic value and relation to mRNA expression and immunoreactivity[J]. J Cancer Res Clin Oncol，2010，136(2)：323-331.

[21] 张德庆，陈东育，宋兆峰. FHIT蛋白及mRNA在食管癌组织中的表达及意义[J]. 中国实验诊断学，2011，18(1)：87-89.

[22] Yin DT，Wang L，Sun J，et al. Association of the promoter methylation and protein expression of fragile histidine triad (FHIT) gene with the progression of differentiated thyroid carcinoma[J]. Internat J Clin Experiment Pathol，2010，3(5)： 482-491.

甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16 和 FHIT 基因甲基化及其表达的影响

Effects of MNNG on methylation and expression of p16 and FHIT genes in normal esophageal epithelial cells in Kazakhs

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[1]	尹璐, 马成斌, 刘平, 张祎, 赵学军. P16/Ki-67双染联合DNA倍体分析在ASCUS分流诊断中的应用价值[J]. 癌变·畸变·突变, 2020, 32(4): 264-268.
[2]	古丽扎热叶·艾库拉, 谭遥, 帕力达·阿皮孜阿吉. 新疆哈萨克族食管鳞癌与长链非编码RNA表达的关系[J]. 癌变·畸变·突变, 2020, 32(3): 194-197,202.
[3]	封敏, 艾比拜·莫合塔尔, 石静怡, 祖可来·艾力江, 李永祥, 闫长顺, 李秀梅. 哈萨克族食管癌组织中miR-143、miR-145和Survivin mRNA的表达及其临床病理意义[J]. 癌变·畸变·突变, 2020, 32(1): 29-32.
[4]	肖红梅, 吴逸, 张婷, 王少康, 孙桂菊. 微囊藻毒素-LR对人正常食管上皮细胞凋亡及对Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响[J]. 癌变·畸变·突变, 2017, 29(6): 418-421,426.
[5]	徐漪, 李旭峰, 张慧霞, 陈艳. DNMT1高表达在MNNG诱导哈萨克族食管上皮细胞恶性转化中的作用[J]. 癌变·畸变·突变, 2017, 29(6): 460-466.
[6]	陈艳, 张慧霞. 基于TALE技术的哈萨克族食管上皮DNA甲基转移酶1高表达细胞株模型的构建[J]. 癌变·畸变·突变, 2016, 28(6): 428-431,437.
[7]	李旭峰, 张慧霞, 凯德丽艳·阿布都外力, 陈艳. 叶酸在MNNG影响哈萨克族食管上皮细胞DNMT1酶活性及表达中的作用[J]. 癌变·畸变·突变, 2016, 28(6): 458-463.
[8]	陈艳，邓彦超，李磊. 利用甲基化芯片及转录组测序方法筛选哈萨克族食管癌DNA异常甲基化谱[J]. 癌变·畸变·突变, 2014, 26(2): 94-99.
[9]	黄思语，尹东，邓彦超，陈艳. 新疆哈萨克族食管癌患者ALDH1L1基因甲基化及其与预后的关系[J]. 癌变·畸变·突变, 2014, 26(1): 35-39.
[10]	田薇,张慧霞,陈艳. 新疆哈萨克族和汉族食管癌患者金属硫蛋白-3 CpG岛甲基化的研究[J]. 癌变·畸变·突变, 2013, 25(5): 357-359.
[11]	刘玲,李卉,王洪江,庞作良,张荣秀,李惠武. 新疆哈萨克族食管癌survivin启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义[J]. 癌变·畸变·突变, 2013, 25(1): 39-43.
[12]	古丽努尔·木哈依，李卉，李秀梅，陈艳，姜孝芳，马丽丽，李惠武，谌宏鸣. IQGAP1在哈萨克族食管癌组织中的表达及意义[J]. , 2012, 24(2): 129-131.
[13]	李磊，邓彦超，赵燕，陈艳. 新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化及其与预后的关系[J]. , 2012, 24(2): 132-135.
[14]	郭文佳, 张丽萍, 王洪江, 李卉, 庞作良, 李惠武2，*. Survivin调控相关基因在新疆哈萨克族食管癌中的表达[J]. , 2011, 23(4): 279-283.
[15]	尹东1;陈艳2;6;张慧霞2;王洪疆1;阿合力1;邓彦超3;6;马彦清4;居来提5. hCHK2基因tagSNPs位点及单体型与新疆哈、汉族食管癌关系的研究[J]. , 2010, 22(4): 287-291.