癌变·畸变·突变 ›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (5): 371-375.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2008.05.009
章 尧/ 高绪锋/ 陈昌杰/ 杨清玲
ZHANG Yao,GAO Xu_feng, CHEN Chang_jie,YANG Qing_ling
摘要: 背景与目的: 探讨As2O3(arsenic trioxide,ATO)对HL_60细胞凋亡过程中细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、NF_κB(nuclear factor kappa B),及C_IAP2(cellular inhibitor of apoptosis proteins 2)的影响。 材料与方法: 以7.5 μmol/L As2O3单独应用及与500 μmol/L N_乙酰半胱氨酸 (N_acetyl_L_cysteine,NAC) 联合作用于HL_60细胞12、24 h后,流式细胞术检测HL_60细胞ROS的产生量;Western blot法检测NF_κB P65核蛋白的变化情况;半定量RT_PCR法检测C_IAP2的相对表达量。 结果: 7.5 μmol/L的 As2O3作用HL_60细胞12、24 h后细胞内ROS的生成增加,与阴性对照比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。NF_κB P65核蛋白的相对含量分别为49.3%±4.4%和23.1%±2.1%,C_IAP2的相对表达分别为72.9%±5.8% 和59.3%±4.4%,较对照组均明显降低 (P<0.05)。500 μmol/L NAC和7.5 μmol/L As2O3共同作用HL_60细胞12、24 h后细胞ROS生成量相对减少,与AS2O3 单独作用组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);NF_κB P65核蛋白的相对含量分别为65.4%±4.9%和37.1%±3.4%,C_IAP2的相对表达量分别为81.1%±5.8%和73.7%±4.9%。较AS2O3单独作用组均明显增加(P<0.05)。 结论: As2O3诱导HL_60细胞凋亡过程中,细胞内ROS生成增加,抑制NF_κB活性,同时下调其靶基因C_IAP2等的表达;NAC能阻断 As2O3诱导HL_60细胞凋亡过程中ROS的生成,部分阻断了NF_κB活性的抑制。