癌变·畸变·突变 ›› 2009, Vol. 21 ›› Issue (5): 367-371.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2009.05.009
柯跃斌;袁建辉;陈 震;张锦周;何 彩;盛子敬
KE Yue-bin;YUAN Jian-hui; CHEN Zhen; ZHANG Jin-zhou;HE Cai;SHENG Zi-jing
摘要: 背景与目的:利用H2O2作用于Ⅱ型人肺泡上皮细胞A549,分析8-羟基脱氧鸟苷(8-oxo-dG)的形成,探讨修复基因hMTH1与hOGG1在DNA氧化性损伤中的作用。 材料与方法: 在A549细胞培养液中分别加入终浓度为0、50、100、200和300 μmol/L的H2O2孵育不同时间(0、6、12、18和24 h)后,利用高压液相色谱串联电化学检测技术、核酸内切酶切割法及RT-PCR技术分析细胞8-oxo-dG水平、8-oxo-dG修复酶活性及hOGG1和hMTH1基因表达水平。 结果:与对照组比较,100、200、300 μmol/L H2O2浓度时均能使A549细胞DNA的8-oxo-dG水平增高(P<0.05或P<0.01)。200 μmol/L H2O2作用12 h后8-oxo-dG水平上升到峰值并在24 h降至基线水平,8-oxo-dG 水平在6~18 h处理组显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。而8-oxo-dG修复酶活性在200 μmol/L H2O2暴露后12~24 h均高于对照组(P<0.05或P<0.01),在18 h达到峰值。hOGG1及hMTH1 mRNA的表达水平也因H2O2暴露而升高(P<0.05或P<0.01),但峰值在时间上交替出现。 结论: H2O2能诱导8-oxo-dG修复酶活性增高,hOGG1及hMTH1在DNA氧化损伤的修复活动中呈现时间上的交替关系。
中图分类号: