癌变·畸变·突变 ›› 2010, Vol. 22 ›› Issue (1): 39-0042.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2010.01.010
高郁森1;谢庆东2
GAO Yu-sen1; XIE Qing-dong2
摘要: 目的: 建立HIV-1 gag基因经卵母细胞垂直传递的模型,为HIV通过雌性生殖细胞垂直传递的研究奠定实验基础。 方法: 将含有HIV-1 gag基因的重组质粒pIRES2-EGFP-gag注射到小鼠双侧卵巢,转染生殖细胞。应用超排获得实验用卵母细胞,收集显示绿色荧光的卵母细胞,将一部分呈现绿色荧光的卵母细胞裂解,提取基因组DNA,采用PCR检测gag DNA是否存在卵母细胞中;再将另一部分带有绿色荧光的卵母细胞常规制备中期染色体片,用荧光原位杂交(FISH)技术检测HIV-1 gag基因在成熟卵母细胞染色体上的整合。 结果: 转染pIRES2-EGFP-gag后,在荧光显微镜下能够很清楚地看到带有绿色荧光的卵母细胞;PCR结果显示在带有绿色荧光的卵母细胞中可检测到HIV-1 gag 基因特异的阳性条带;FISH检测结果显示在卵母细胞的中期染色体上检测到HIV-1 gag DNA的阳性信号。 结论: HIV-1 gag基因能够通过卵透明带和细胞膜并整合到卵母细胞基因组内,本研究为HIV-1 gag基因可经过雌性生殖细胞垂直传递给子代奠定了实验基础。
中图分类号: