癌变·畸变·突变

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TGF-β及EGF信号对溶血磷脂酸诱导口腔鳞癌细胞增殖的影响

周小琼1,邓小玲2,*,傅玉才1,许铭炎3,*   

  1. ( 1. 汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东    汕头    515041;2. 厦门大学医学院基础医学部,福建    厦门    361102;3. 厦门市口腔医院,福建    厦门    361000 )
  • 收稿日期:2013-08-26 修回日期:2013-11-08 出版日期:2014-01-30 发布日期:2014-01-30
  • 通讯作者: 邓小玲,E-mail:xiaolingdeng@xmu.edu.cn;许铭炎,E-mail: myxu1972@yahoo.com
  • 作者简介: 周小琼 (1986- ),女,湖南省人,硕士研究生,研究方向:表观遗传及信号通路研究。E-mail:anding115078@163.com
  • 基金资助:

    国家自然科学基金 (81370160,30900661,81072208),教育部留学回国人员科研启动基金,汕头大学医学院基础与临床科研基金

The effects of TGF-β and EGF signal on lysophosphatidic acid-induced human oral squamous cell carcinoma cell proliferation

ZHOU Xiao-qiong1,DENG Xiao-ling2,*,FU Yu-cai1,XU Ming-yan3,*   

  1. (1. Laboratory of Cellular Senescence, Shantou University Medical College, Shantou 515041, Guangdong; 2. Department of Basic Medical Science, Xiamen University Medical College, Xiamen 361102, Fujian; 3. Xiamen Stomatology Hospital, Xiamen 361000, Fujian, China)
  • Received:2013-08-26 Revised:2013-11-08 Online:2014-01-30 Published:2014-01-30
  • Contact: DENG Xiao-ling,E-mail:xiaolingdeng@xmu.edu.cn;XU Ming-yan,E-mail: myxu1972@yahoo.com

摘要:

 目的 探讨转化生长因子 (TGF)及表皮生长因子 (EGF)信号对溶血磷脂酸 (LPA)诱导口腔鳞癌细胞增殖的影响。方法:口腔鳞癌SAS细胞接种于96孔板中,以含不同浓度 (0、1、5和10 μmol/L)LPA的无血清DMEM分别处理细胞24和48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖;免疫印迹检测10 μmol/L LPA分别处理细胞0、0.5、2和4 h后对TGF-β下游信号分子Smad2的影响;应用不同浓度 (10、20和50 μg/mL)的TGF-β阻断抗体1D11和100 nmol/L EGFR 阻断剂AG1478分别预孵育细胞2和4 h后,再加入LPA诱导,检测SAS细胞增殖情况。结果:LPA呈剂量效应和时间效应诱导SAS细胞增殖,LPA浓度增加到10 μmol/L时SAS细胞数是对照组的近1.7倍 (P<0.01),细胞在LPA处理24 h后增殖速率较对照组增加22% (P<0.05)。LPA可活化TGF-β,但TGF-β阻断抗体1D11并不能阻断LPA诱导的SAS增殖;相反,EGFR阻断剂AG1478能够抑制LPA诱导的SAS增殖,抑制率达到近77%。结论:LPA诱导的口腔鳞癌SAS细胞的增殖与EGFR活化信号有关,而与LPA诱导的TGF-β活化无关。

关键词: 口腔鳞癌, 增殖, 溶血磷脂酸, 转化生长因子, 表皮生长因子受体

Abstract:

OBJECTIVE: To investigate the effects of transforming growth factor-β (TGF-β) activation and epidermal growth factor receptor (EGFR) transactivation on lysophosphatidic acid (LPA)-induced human oral squamous cell carcinoma (OSCC) SAS cell proliferation. METHODS:SAS cells were seeded in 96-well plates and treated with LPA (0,1,5 and 10 μmol/L) for 24 h and 48 h,and CCK-8 method was used to detect cell proliferation; Western blotting was used to detect the effect of LPA(10 μmol/L) on TGF-β activation by examining the expression of p-Smad2. Pre-incubation of SAS cells with TGF-β blocking antibody 1D11 (10,20 and 50 μg/mL) and EGFR inhibitor AG1478 (100 μmol/L) for 2 and 4 h were used to measure the effects of TGF-β activation and EGFR transactivation on LPA-induced SAS proliferation. RESULTS:LPA stimulated SAS cell proliferation in dose- and time-dependent manners. The cell number in LPA(10 μmol/L) treated group was 1.7 times higher than the number in untreated group (P<0.01). After 24 h incubation,the proliferation rate of LPA (10 μmol/L)treated group increased by 22% compared with the control group (P<0.05). LPA activated TGF-β. However,TGF-β blocking antibody 1D11 could not block LPA-induced SAS cell proliferation. In contrast,EGFR inhibitor AG1478 blocked LPA-induced SAS cell proliferation by 77%.   CONCLUSION: LPA-induced SAS cell proliferation was dependent on EGFR transactivation and independent of TGF-β activation.

Key words: oral squamous cell carcinoma, proliferation, lysophosphatidic acid, transforming growth factor-β, epidermal growth factor receptor