袁惟芯1,江燕萍2,谢春姣1,秦 飞1,陈韵聪1,魏 青1,曾晓雯1,沙 焱3,肖勇梅1,*
YUAN Wei-xin1,JIANG Yan-ping2,XIE Chun-jiao1,QIN Fei1,CHEN Yun-cong1,WEI Qing1,ZENG Xiao-wen1,SHA Yan3,XIAO Yong-mei1,*
摘要:
目的: 观察氢醌对HL-60细胞向单核细胞分化的影响,并初步探讨miR-146a的调控作用。方法:设miR-146a-5p 抑制剂和阴性对照处理的HL-60细胞,分别以不同浓度(0、0.5、1.0、2.5和5.0 μmol/L)的氢醌处理3 h后,接种于含豆蔻酰佛波醇(PMA)的培养基中,培养72 h诱导其分化。采用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-146a及其靶基因TRAF6的表达量,流式细胞术检测CD11b和CD14的表达,Western blot检测TRAF6蛋白及其下游调控因子IκBα蛋白的表达水平。结果:与对照组相比(0 μmol/L), 氢醌可抑制PMA诱导的HL-60细胞CD11b和CD14的表达,5.0 μmol/L的氢醌使其表达量分别减少44%和38% (P均<0.01);同时miR-146a的表达比对照组升高近2倍(P<0.01);TRAF6 mRNA的表达下降约40%,其蛋白表达下降74%(P均<0.01);磷酸化IκBα蛋白的表达减少约45%,IκBα总蛋白表达升高约73%(P均<0.01)。当抑制miR-146a的表达后,氢醌对TRAF6、IκBα和磷酸化IκBα蛋白表达的影响不明显。结论:miRNA-146a是氢醌影响HL-60细胞分化的调控因子之一。