癌变·畸变·突变

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LncRNA-UCA1与淮安食管癌发病风险的初步研究

李夏君1,杨  淼1,董自成2,刘  冉1,尹立红1,*,浦跃朴1   

  1. 东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏  南京  210009
  • 收稿日期:2014-06-09 修回日期:2014-10-13 出版日期:2014-11-30 发布日期:2014-11-30
  • 通讯作者: 尹立红,E-mail:lhyin@seu.edu.cn
  • 作者简介:李夏君(1988- ),男,硕士研究生,研究方向:肿瘤环境基因组学。
  • 基金资助:

    国家自然科学基金(81172747,81072259)

Association  between  LncRNA-UCA1  expression  and  the  risk  for  esophageal  carcinoma  in  Huaian

LI  Xia-jun1,YANG  Miao1,DONG  Zi-cheng2,LIU  Ran1,YIN  Li-hong1,*,PU  Yue-pu1   

  1. Key  Laboratory  of  Environmental  Medicine  Engineering,  Ministry  of  Education,  School  of  Public  Health,  Southeast  University,  Nanjing  210009,  Jiangsu
  • Received:2014-06-09 Revised:2014-10-13 Online:2014-11-30 Published:2014-11-30

摘要:

目的:  初步筛选淮安食管鳞癌与癌旁组织中差异表达的LncRNAs,为进一步研究lncRNAs在食管鳞癌发病机制中的作用奠定基础。方法:分别提取3例患者食管癌组织及配对癌旁组织的总RNA,体外逆转录制备并标记为双链cDNA(ds-cDNA),与人类LncRNA表达谱芯片进行杂交,经扫描后,用Agilent  GeneSpring  GX  v11.5.1软件进行分析运算,筛选出差异表达的LncRNAs。qRT-PCR分析LncRNA在食管癌细胞及组织中的表达情况。结果:按照倍数≥2.0、P≤0.05的标准,筛选出表达差异有统计学意义的LncRNAs共1  019个,其中399个上调,620个下调。GO分析和通路分析结果显示这些LncRNAs调控的差异表达的mRNAs主要与细胞周期、细胞分化、蛋白酶的活动等有关。结合Gibb食管癌相关的LncRNA差异表达谱分析发现lncRNA-UCA1可能参与食管癌发生发展。qRT-PCR结果显示,与永生化食管上皮细胞及癌旁组织相比,食管癌细胞及食管癌组织中lncRNA-UCA1均表达下调。结论:共筛选出淮安食管鳞癌与癌旁组织中1  019个差异表达LncRNAs,其中LncRNAs-UCA1可能成为食管癌早期发现和诊断的生物标志物。

关键词: 食管癌, LncRNA-UCA1, 实时荧光定量PCR, 肿瘤分子标志物

Abstract:

OBJECTIVE:  To  analyze  LncRNA  differential  expression  in  tumoral  and  normal-paired  tissues  of  esophageal  squamous  cell  carcinoma  in  Huaian  and  to  explore  the  role  of  tumor-associated  LncRNAs  in  the  pathogenesis  of  esophageal  squamous  cell  carcinoma.  METHODS:Total  RNA  was  extracted  from  3  patients'  esophageal  cancer  tissues  and  corresponding  adjacent  normal  tissues.  Then,each  sample  was  amplified  and  transcribed  into  fluorescent  cRNA  with  a  random  priming  method.  The  labeled  cDNAs  were  hybridized  onto  the  Human  LncRNA  Array  v2.0  (8×60K,Arraystar).  After  being  scanned,Agilent  GeneSpring  GX  v11.5.1  was  used  to  screen  the  differentially  expressed  LncRNAs.  qRT-PCR  was  used  to  analyze  LncRNA  expression  in  cells  and  tissues  of  esophageal  cancer.  RESULTS:Among  the  1  019  significantly  differentially  expressed  LncRNAs  (Fold  Change≥2.0,P≤0.05),there  were  399  LncRNAs  overexpressed  and  620  under- expressed.  GO  analysis  and  Pathway  analysis  showed  that  the  differentially  expressed  mRNAs,regulated  by  LncRNAs,were  mainly  associated  with  the  cell  cycle,cell  differentiation, protease  activities  etc.  Compared  to  LncRNA  differences  related  to  the  Gibb's  esophageal  expression  profile  analysis,LncRNA-UCA1  might  participate  in  esophageal  cancer  development.  qRT-PCR  results  showed  that  LncRNA-UCA1  was  significantly  under-expressed  in  esophageal  cancer  cells  and  esophageal  cancer  tissues  when  compared  with  immortalized  esophageal  epithelial  cell  and  adjacent  normal  tissues.  CONCLUSION:A  total  of  1  019  significantly  differentially  expressed  LncRNAs  were  identified,and  LncRNA-UCA1  may  be  a  potential  biomarker  in  the  early  detection  and  diagnosis  of  esophageal  cancer.

Key words: esophageal , carcinoma, LncRNA-UCA1, qRT-PCR, tumor , molecular , markers