癌变·畸变·突变 ›› 2007, Vol. 19 ›› Issue (2): 106-109.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2007.02.007
熊术道 李景荣 温博贵 李冠武 李 璟
XIONG Shu-dao1, LI Jing-rong2, WEN Bo-gui3,LI Guan-wu3, LI Jing3
摘要: 背景与目的: 研究人膀胱移行细胞癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因片断与核基质蛋白(nuclear matrix proteins, NMPs)的相关性。 材料与方法: 分别提取培养细胞和膀胱癌组织标本的核基质蛋白及其全细胞蛋白,同时抽提组织标本的基因组DNA和核基质DNA,根据EGFR cDNA序列合成两对PCR引物,分别以基因组DNA和各核基质DNA为模板,PCR扩增其结合片断;并对引物Ⅰ产物进行序列测定;以引物Ⅱ的产物制备探针,southwestern 杂交进一步检测EGFR基因片断与核基质蛋白结合情况。 结果: 110 bp PCR(引物Ⅱ)产物见于基因组DNA和各核基质DNA (NM DNA 0 , NM DNA 25 , NM DNA 50 , NM DNA 100);940 bp PCR(引物Ⅰ)产物出现在基因组DNA和除NM DNA100外其他核基质DNA中。940 bp序列与EGFR基因DNA序列完全一致。 Southwestern blot检测结果表明,全细胞蛋白及核基质蛋白中出现特异的分子量约为60 kD的DNA-蛋白阳性杂交条带。 结论: 人膀胱移行细胞癌中,EGFR活性转录基因片段与核基质及核基质蛋白结合,NMPs可能和EGFR基因转录或转录后翻译等基因调控事件相关,核基质对EGFR在膀胱癌中高表达可能具有重要的调控作用。
中图分类号: