Axin通过激活p53的表达抑制结肠癌细胞的生长

doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2014.05.002

癌变·畸变·突变

Axin通过激活p53的表达抑制结肠癌细胞的生长

陆建荣，丁彩霞，袁勇，张娟，蔡琳

陕西省肿瘤医院病理科，陕西西安 710061

收稿日期:2014-03-06 修回日期:2014-06-05 出版日期:2014-09-30 发布日期:2014-09-30
作者简介:陆建荣(1973- )，男，甘肃省张掖市人，博士，副主任医师，研究方向：肿瘤病理学。Tel： 13032960959；E-mail：lujr535 @126.com
基金资助:
陕西省自然科学基金项目(2011JM4005)

Axin inhibited the growth of colon cancer cells by activating p53

LU Jian-rong，DING Cai-xia，YUAN Yong，ZHANG Juan，CAI Lin

Department of Pathology, Shaanxi Cancer Hospital, Xi’an 710061, Shaanxi, China

Received:2014-03-06 Revised:2014-06-05 Online:2014-09-30 Published:2014-09-30

摘要/Abstract

摘要：

目的：观察过表达Axin对结肠癌SW480细胞生长的影响，并探讨其作用机制。方法：将pCMV5-HA-Axin质粒瞬时转染至结肠癌SW480细胞中，并设置转染空载体pCMV5-HA及未转染空白对照组，采用噻唑蓝(MTT)比色法及克隆形成实验检测细胞增殖状态的变化，流式细胞仪检测细胞周期变化；RT-PCR检测Axin及p53 mRNA的表达；Western blot检测Axin及P53蛋白的表达。结果：与转染空载体及空白对照组比较，过表达Axin显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖。MTT实验显示转染Axin后细胞生长明显受到抑制，存活的瘤细胞明显减少(P<0.05)；克隆形成实验结果显示瞬时转染Axin质粒组细胞集落形成能力明显下降(P<0.05)；流式细胞仪分析检测结果显示转染Axin质粒后结肠癌SW480细胞周期G1前期比例升高，G1期明显被阻滞，S期比例下降(P均<0.05)。RT-PCR结果显示转染Axin的SW480细胞中p53 mRNA的表达较转染空载体组升高约1倍(P＜0.05)；同时，Western blot结果显示转染质粒Axin后结肠癌SW480细胞中P53的蛋白表达量明显增加，较转染空载体组几近升高1倍(P＜0.05)。结论：过表达Axin抑制结肠癌SW480细胞增殖，其作用机制是通过激活癌基因p53的表达而发挥效应的。

关键词: 结肠癌, Axin, p53, 细胞增殖, 细胞周期

Abstract:

OBJECTIVE: To investigate the effect of Axin on the biological behavior of SW480 colon cancer cells and to elucidate its molecular mechanism. METHODS：SW480 colon cancer cells were transfered with pCMV5-HA-Axin and pCMV5-HA and blank control group was desigined. Cell proliferation was detected by MTT assay and colony formation assay，and the cell cycle was analyzed by flow-cytometry. At the same time，Real-time PCR and Western blot were used to assess the expressions of Axin and p53 oncogene in SW480 cells. RESULTS：Over-expression of Axin significantly inhibited the growth of SW480 colon cancer cells. MTT assay revealed over-expression of Axin inhibited the proliferation of SW480 cells(P<0.05). Transfection of Axin increased colon cancer SW480 cell cycle pre G1 ratio，inhibited G1 phase and decreased S ratio(P<0.05). p53 mRNA doubled in SW480 cells with transfered pCMV5-HA-Axin(P<0.05). P53 protein was also doubled in SW480 cells with transfered pCMV5-HA-Axin compared with empty vector groups(P<0.05). CONCLUSION：Over-expression of Axin could significantly inhibit the growth of colon cancer cells，and its mechanism might be related to the activation of the p53 oncogene.

Key words: colon cancer, Axin, p53, proliferation, cell cycle

陆建荣，丁彩霞，袁勇，张娟，蔡琳. Axin通过激活p53的表达抑制结肠癌细胞的生长[J]. 癌变·畸变·突变, doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2014.05.002.

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