癌变·畸变·突变 ›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (5): 337-341.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2008.05.001
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朱启星1,2/ 叶良平1/ 马 泰1/ 沈 彤2
ZHU Qi_xing1,2 ,YE Liang_ping1,MA Tai1,SHEN Tong2
摘要: 背景与目的: 研究三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)对人角质形成细胞(keratinocytes,KC)线粒体的损伤以及银杏叶提取物(ginkgo biloba extract ,EGb)对其损伤的保护作用,为防治三氯乙烯药疹样皮炎提供基础资料和理论依据。 材料与方法: 分离制备体外培养KC,接种于培养板/皿中,分成TCE染毒组、EGb保护组,溶剂对照组和空白对照组,TCE染毒组以不同浓度TCE(0、0.125、0.5和2.0 mmoL/L)及不同时间(0、4、8、12和24 h)处理体外培养的KC,EGb保护组则以不同浓度EGb(0、10、50、100和150 mg/L)预处理 2 h后再用2.0 mmoL/L TCE进行染毒, 溶剂对照组和空白对照不加入TCE和EGb,以使用含1%丙酮(体积分数)的培养基为溶剂对照组,以新鲜培养基作为空白对照组。采用MTT法观察细胞活力和线粒体酶抑制率变化,检测ATP酶活力,间接反映线粒体能量变化情况,通过流式细胞术结合罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)双染法检测线粒体膜电位的改变情况。 结果: 随着TCE浓度的升高和作用时间的延长,细胞活力、ATP酶活性和线粒体膜电位下降,线粒体酶抑制率升高,当TCE浓度超过0.5 mmol/L,作用时间大于8 h时,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05); EGb保护组在EGb浓度为10 mg/L时即可起到保护作用(与2.0 mmol/L TCE染毒组比较,P<0.01),当EGb浓度增加到150 mg/L时线粒体功能状态接近正常对照组水平(与溶剂对照组比较,P>0.05)。 结论: TCE可引起人KC线粒体损伤,EGb对这种损害具有保护作用。