癌变·畸变·突变 ›› 2004, Vol. 16 ›› Issue (4): 196-198.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2004.04.002
孙 唏,李 芳,陈启政,孙 纳,王小利,严 红,徐顺清
SUN Xi,LI Fang,CHEN Qi-zhen,et al
摘要: 背景与目的:建立一种灵敏、快速、无放射性污染的生物方法来检测环境样本中的二恶英类化合物。材料与方法:二恶英类化合物可以活化胞浆内芳香烃受体(AhR)使之与一段包含特定序列的双链DNA结合,结合的DNA 因受蛋白质保护可抵抗核酸外切酶消化而保留下来,痕量的保留DNA通过PCR检测出来。根据此原理本研究将TCDD溶液加入到含AhR及相关蛋白的细胞溶质中,在体外与含二恶英反应元件的DNA作用形成二恶英-AhR-DNA复合物,用核酸外切酶ExoⅢ 和S1核酸酶进行消化后作PCR,通过琼脂糖电泳可以检测目的DNA是否存在;同时以有机溶剂DMSO设为对照。结果:在实验组用琼脂糖电泳可以检测到期望大小片段的DNA, 而对照组为阴性。结论:该方法可作为环境样本中二恶英污染的生物检测手段,具有灵敏、经济和快速的优点。