陈小璇,代剑平*,万倩英,朱丹霞,王革非,李康生
CHEN Xiao-xuan,DAI Jian-ping*,WAN Qian-ying,ZHU Dan-xia,WANG Ge-fei,LI Kang-sheng
摘要:
目的: 研究氧化苦参碱的抗流感病毒活性及其潜在机制。方法:培养MDCK和A549细胞,并设空白对照组(DMSO, 0.5%)、病毒处理组、阳性对照组(利巴韦林,200 μmol/L)和氧化苦参碱处理组(12.5、25、50、100 μmol/L),每组重复6孔。空斑抑制法测定氧化苦参碱抗病毒药效;构建荧光素酶报告质粒,并用Western blot和ELISA检测氧化苦参碱对流感病毒诱导的细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)启动子转录、TLR4-Myd88-TRAF6-NF-κB信号通路活化及炎性因子释放的影响。结果:空斑抑制实验显示氧化苦参碱在12.5~100 μmol/L范围内可显著降低流感病毒复制,其半数有效浓度(EC50)为19.95 μmol/L。与病毒处理组比较,启动子荧光素酶报告质粒检测显示12.5 μmol/L氧化苦参碱可显著降低流感病毒诱导的TLR4、MyD88和TRAF6转录(P<0.05);Western blot检测显示12.5 μmol/L氧化苦参碱可显著降低流感病毒诱导的TLR4-Myd88-TRAF6-NF-κB通路的活化(P<0.05);ELISA检测显示12.5 μmol/L氧化苦参碱可显著降低流感病毒诱导的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8、IFN-β和IFN-γ释放(P<0.05)。结论:氧化苦参碱具抗流感病毒活性,其潜在机制可能与其抑制流感病毒诱导的TLR4-Myd88-TRAF6-NF-κB信号通路活化有关。