癌变·畸变·突变 ›› 2019, Vol. 31 ›› Issue (4): 323-326.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2019.04.011
于志强, 孙运, 陈小青, 刘汉伟, 马中春
YU Zhiqiang, SUN Yun, CHEN Xiaoqing, LIU Hanwei, MA Zhongchun
摘要： 目的：建立麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法。方法：小鼠神经干细胞（NSC）培养于96孔培养板中，至对数生长期，每孔加入170 μL培养液和10 μL石房蛤毒素（STX）标准品（分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 ng），再加入10 mmol/L的乌本苷10 μL及1 mmol/L的藜芦碱10 μL。同时设置乌本苷及藜芦碱对照孔，以及空白对照孔。CCK-8溶液孵育后用酶标仪测定各孔D（450）值，根据石房蛤毒素标准液含量与D（450）值之间的剂量反应关系，建立标准曲线。结果：培养的正常NSC第1天为单细胞悬液，第2~3天聚集成为小神经球，第4天为大神经球；加入乌本苷及藜芦碱后较多细胞出现肿胀破裂，加入STX后可见肿胀或破裂死亡的细胞，但细胞形态多为正常。并于0.2~1.0 ng范围内建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法并建立了标准曲线，其回归方程为y=1.252+0.495x（r=0.998 0，P < 0.01）。结论：成功建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法，该研究为神经性贝类毒素的体外检测相关研究奠定了基础。
中图分类号:
