癌变·畸变·突变 ›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (2): 111-114.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2008.02.009
张 岭1,侯绍英1,吴 坤1,,夏 蕾2
ZHANG Ling1, HOU Shao-ying1, WU Kun1,, XIA Lei2,
摘要: 背景与目的: 探讨巯基乙酸(TGA)对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPF)蛋白激酶活性的影响。 材料与方法: 用0、5、25和125 μg/ml 浓度的TGA分别处理经孕酮诱导的体外培养爪蟾卵母细胞,另设不含孕酮的阴性对照组,于处理4 h和8 h收集卵母细胞进行Western Blotting检测,观察p-Erk1/Erk1蛋白、p-RSK蛋白、Cdc2、p-Cdc2和Cyclin B1蛋白的表达情况。 结果: TGA处理爪蟾卵母细胞4 h后,Erk1蛋白的磷酸化水平(即MAPK的活性水平),较对照组明显增加(P<0.05);MAPK的活性底物p-RSK蛋白的表达也增加(P<0.05);同时伴随着p-Cdc2表达水平的下降和Cyclin B1蛋白表达的增强(P<0.05)。TGA处理8 h后Erk1蛋白磷酸化水平和p-RSK蛋白含量与对照组相比无明显差异(P>0.05),但此时TGA组p-Cdc2水平明显增加(P<0.05),Cyclin B1蛋白的表达降低(P<0.05)。 结论: 在孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟早期,TGA可促进MPF和MAPK蛋白激酶及其底物p-RSK的活化;在成熟的晚期,TGA对MAPK活性无明显影响,但明显抑制MPF活性。TGA影响MPF活性的可能机制是降低Cyclin B1蛋白水平。