癌变·畸变·突变 ›› 2001, Vol. 13 ›› Issue (2): 92-095.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2001.02.008
杨连君, 王文亮
YANG Lian-jun, WANG Wen-liang
摘要: 目的与方法:为了建立稳定表达bcl-2 蛋白的肝细胞癌(简称肝癌) 细胞株,用脂质体介导的基因转染法将含有人bcl-2 cDNA 的逆转录病毒表达载体pDOR-SB 质粒导入bcl-2 蛋白阴性的肝癌细胞系HCC-9 204 细胞中。经G-418 筛选后获得转入bcl-2 基因的细胞克隆。细胞扩大培养后用免疫细胞化学法检测bcl-2 表达情况。有限稀释法连续克隆化直至获得100 %稳定表达bcl-2 蛋白的单克隆细胞株,并进行流式细胞仪检测。结果:转染了pDOR-SB 的HCC-9 204 细胞大部分为bcl-2 蛋白表达阳性,而转染了pDOR 空载体或未转染的HCC-9 204 细胞均为bcl-2 蛋白阴性。经过连续3 次克隆化后,流式细胞仪检测表明所获得的单克隆细胞株100 %表达bcl-2 蛋白。结论:用基因转染法成功地建立了稳定表达bcl-2 蛋白的肝癌细胞株。
中图分类号: