OBJECTIVE: To investigate the role for α4 in cell transformation induced by chemical carcinogens. METHODS：Immunoblotting was performed to examine the expression of α4 in chemical-transformed cells and tumor cell lines. Stable cell lines L02R-α4 and L02R-SHα4 were generated by infecting L02R cells with retroviral vectors encoding α4 or lentiviral α4 shRNA，respectively. Cell proliferation and anchorage-independent cell growth were examined in these cells. Immunoblotting analysis was applied to measure the phosphorylation status of    p70S6K1 and 4E-BP1，which were the key members of mTOR pathway in established cells and transformed cell models L02RT-AFB1，HepG2，and SMMC with or without rapamycin treatment. RESULTS：The protein expression of α4 in chemical-transformed cells and tumor cell lines increased by 1.9-5.9 fold compared with non-transformed cells. Immunoblotting results verified that L02R-α4 and L02R SHα4 cells were successfully established. Ectopic expression of α4 promoted cell growth and led to cell transformation. Notable increased phosphorylation levels of S6K1 (Thr389) and 4E-BP1 (Thr37/46) were observed in transformed cells where α4 was overexpressed. Upon rapamycin treatment， phosphorylation of p70S6K1 and 4E-BP1 declined significantly in all cells. Particularly，the effects were more profound in L02R-SHα4 cells. CONCLUSION：Overexpression of α4 promoted cell  proliferation and induced cell transformation via activation of mTOR signaling pathway.

OBJECTIVE: To investigate the effects of transforming growth factor-β (TGF-β) activation and epidermal growth factor receptor (EGFR) transactivation on lysophosphatidic acid (LPA)-induced human oral squamous cell carcinoma (OSCC) SAS cell proliferation. METHODS：SAS cells were seeded in 96-well plates and treated with LPA (0，1，5 and 10 μmol/L) for 24 h and 48 h，and CCK-8 method was used to detect cell proliferation； Western blotting was used to detect the effect of LPA(10 μmol/L) on TGF-β activation by examining the expression of p-Smad2. Pre-incubation of SAS cells with TGF-β blocking antibody 1D11 (10，20 and 50 μg/mL) and EGFR inhibitor AG1478 (100 μmol/L) for 2 and 4 h were used to measure the effects of TGF-β activation and EGFR transactivation on LPA-induced SAS proliferation. RESULTS：LPA stimulated SAS cell proliferation in dose- and time-dependent manners. The cell number in LPA(10 μmol/L) treated group was 1.7 times higher than the number in untreated group (P<0.01). After 24 h incubation，the proliferation rate of LPA (10 μmol/L)treated group increased by 22% compared with the control group (P<0.05). LPA activated TGF-β. However，TGF-β blocking antibody 1D11 could not block LPA-induced SAS cell proliferation. In contrast，EGFR inhibitor AG1478 blocked LPA-induced SAS cell proliferation by 77%.   CONCLUSION： LPA-induced SAS cell proliferation was dependent on EGFR transactivation and independent of TGF-β activation.

 OBJECTIVE: To study the effects and mechanism of microcystin LR(MC-LR)on oxidative damage and apoptosis in rat ovarian granulosa cells.  METHODS：After 48  h exposure to MC-LR at 0，10，20 and 30 μg/mL，the level of   intracelluar reactive oxygen species，superoxide dismutase (T-SOD) activity and MDA in culture medium，apoptosis and the mRNA changes of Bax and Bcl-2 expressions were evaluated. RESULTS：After MC-LR exposure at the dosage of 10，20 and 30 μg/mL for 48 h，the T-SOD activity was significantly suppressed (P<0.05). The concentrations of ROS and MDA in the 20 μg/mL and 30μg/ml groups were significantly reduced (P<0.05) when compared with control group. The correlation coefficient between dosage of MC-LR and ROS was 0.925(P<0.01)，between dosage of MC-LR and MDA was 0.811(P<0.01)，between dosage of MC-LR and T-SOD was -0.865(P<0.05).   Cell assay indicated that the expression of Bax was up-regulated(P<0.05) and Bcl-2 down- regulated (P<0.05). The correlation coefficient between dosage of MC-LR and Bax was 0.972(P<0.01)，between dosage of MC-LR and Bcl-2 was -0.972 (P<0.01).  CONCLUSION：MC-LR was capable of inducing oxidative damage of rat granulosa cells in vitro. MC-LR could cause apoptosis and changes in   the expresons of Bax and Bcl-2 .

 OBJECTIVE: To investigate the alteration of cortactin (CTTN) expression in colorectal cancer (CRC) and its correlation with clinico-pathological characteristics and prognosis. METHODS：Immunohistochemistry method was used to detect the expression of CTTN in 100 cases of CRC and adjacent normal tissues. The relationship between CTTN expression and clinico-pathological features and prognosis of the patients was evaluated.  RESULTS： Positive rate of CTTN expression in colorectal cancer tissues was significantly higher than that in adjacent normal tissues (P＜0.01). Expression of CTTN was correlated with depth of tumor invasion (P＝0.037). A Kaplan-Meier survival analysis revealed that the patients with CTTN expression had a shorter overall survival (OS) than those with negative CTTN (P = 0.014). CONCLUSION：CTTN overexpression was a common event，and seemed to be a poor prognostic  factor for colorectal cancer.

OBJECTIVE: To explore the potential association of formaldehyde (FA) -induced cellular DNA oxidation and DNA methylation. 8-oxo-7，8-dihydroguanine (8-oxo-dG) levels and DNA 5-mC content were analyzed after FA exposure in human alveolar type Ⅱ epithelial (A549) cells in vitro，and their time-dose-effect were also analyzed. METHODS：A549 cells were exposed to 5-20 μmol/L FA.   8-oxo-dG levels of cellular DNA were measured by high pressure liquid chromatography with electrochemical detection，alterations of genomic DNA methylation levels were investigated by immunofluorescence and high performance capillary electrophoresis. RESULTS：The levels of 8-oxo-dG in A549 cells were increased after FA exposure，but cellular DNA 5-mC content is reduced. There were different characteristics in FA -induced cellular DNA oxidation and DNA methylation. After exposure to 20 μmol/L FA，DNA oxidation levels of A549 cells had increased significantly in 1 week and even earlier. However，it took at least 6 weeks for significant changes in the level of DNA methylation under the same conditions.   After exposed to 5-20 μmol/L FA for 8 weeks，a positive correlation was found between the dose of FA and DNA oxidation levels in A549 cells，but the DNA methylation levels were negatively correlated with the dose of FA under the same conditions.  CONCLUSION：After FA exposure，oxidative DNA damage in A549 cells was increased but DNA methylation decreased. In the cytotoxicity effect of FA，oxidative DNA damage might be an earlier important molecular event than DNA methylation.

OBJECTIVE: To understand the effects of vitronectin (VTN) on cell proliferation and migration in the hepatocellular carcinoma cell line SMMC 7721. METHODS：SMMC 7721 cells were cultured in VTN-coating Petri dishes. The morphology of the cells and the morphology of β-tubulin were studied with confocal microscope. WST-1 was used to assess the effect of VTN on cell proliferation rate and the protective effects from the stimuli of apoptosis-inducer. The effect on migration was evaluated with transwell chamber.  RESULTS：VTN helped cells adhere to the Petri dishes as well as sustaining the morphology of β-tubulin. VTN could enhance the proliferation rate of SMMC 7721 in a dose-effect mode. VTN could protect the cells from the stimuli of apoptosis-inducer. VTN could also help   cell migration across the membrane of transwell chamber. CONCLUSION：VTN might play important roles in the following biological effects，such as sustaining the morphology of the cytoskeleton，promoting adherence of tumor cells，enhancing proliferation，protecting cells from the stimuli of apoptosis-inducer as well as enhancing their migration.

 OBJECTIVE:  To explore the relationship between  the hypermethylation status of   ALDH1L1 gene and the occurrence and prognosis of esophageal carcinoma( EC) in Kazakh ethnic groups in Xinjiang．METHODS：The hypermethylation of   ALDH1L1 promoter region was evaluated by using combined bisulfite restriction analysis (COBRA) in 28 cases of esophageal cancer tissues from Kazakh patients．Cox model was established to analyze the possible factors influencing the prognosis of EC，including clinicopathological parameters and hypermethylation levels of   ALDH1L1 promoter region． RESULTS： The methylation rates of ALDH1L1 promoter region in esophageal cancer tissues and adjacent tissues were 71.43% and 39.28%，respectively. Significant difference were found in the methylation rates of   ALDH1L1 promoter region in esophageal cancer and adjacent tissues (P<0.05). Multivariate prognostic analysis showed that the infiltration，TNM stage，lymph node metastasis and hypermethylation levels of   ALDH1L1 were independent risk factors. The postoperative survival time of EC patients in Kazakh ethnic with ALDH1L1 gene unmethylation in cancer was significantly longer than those with ALDH1L1 gene methylation (P<0.05).  CONCLUSION：Aberrant methylation of ALDH1L1 promoter region may play an important role in the pathogenesis and prognosis of EC in Kazakh ethnic groups．

OBJECTIVE: This study aimed to evaluate the expression and prognostic significance of AHNAK2 protein in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).  METHODS：The alteration and clinical relevance of AHNAK2 protein levels were investigated in 129 ESCC cases by immunohistochemistry.  RESULTS：The expression of AHNAK2 protein was up-regulated in some of ESCC tissues. Negative，weak，moderate and  high expression of AHNAK2 were observed in 24.8% (32/129)，28.7% (37/129)，17.0% (22/129)，and 29.5% (38/129) of tumors，respectively. Positive expression of AHNAK2 was significantly correlated with tumor differentiation (P= 0.004). Kaplan-Meier survival curves showed that ESCC patients with negative expression of AHNAK2 had shorter overall survival time (P= 0.027). Cox regression analysis indicated that AHNAK2 protein expression was an independent prognostic factor (P= 0.018，HR = 0.461，95% CI：0.243-0.877). CONCLUSION：AHNAK2 was overexpressed in ESCC tissues and correlated with tumor differentiation. AHNAK2 expression might contribute to the prognostic evaluation of patients with this disease.

 OBJECTIVE:  To investigate the expression of Pim-3 in pancreatic carcinoma and its correlation with cell proliferation. METHODS：The streptavidin-peroxidase complex technique was used to examine the expression of Pim-3 and PCNA proteins in 15 normal pancreatic tissue and 49 pancreatic carcinoma and the proliferative index (PI) was calculated. RESULTS：In normal pancreatic tissue Pim-3 was not detected，whereas in pancreatic carcinoma the positive expression ratio of Pim-3 was 73.47% (36/49)．The positive rate of Pim-3 in pancreatic carcinoma was significantly higher than that in normal pancreatic tissue (P<0.01)．The PI in normal pancreatic tissue and pancreatic duct adenocarcinoma was 6.25%±2.59% and 32.54%±14.69%，respectively，also with a significant difference (P< 0.01)．With the increase in the expression of Pim-3 protein，the cell proliferating activity increased in the tumor cells. The Pim-3 expression level was positively correlated with PI (r=0.726，P<0.01). CONCLUSION：Pim-3 was overexpresed in human  pancreatic carcinoma，and it may play important roles in the carcinogenesis and progression of pancreatic carcinoma.

OBJECTIVE:  To observe the inhibitory effects of paclitaxel liposomes(PL) on tumor growth in nude mice carrying lung cancer H460 cell line.  METHODS：35 BALB/c-nu mice were transplanted with H460 cells，to establish tumor-bearing nude mice model. The mice were then divided into PL 6.0，3.0 and 1.5 mg/kg    groups，positive control group (paclitaxel，3.0 mg/kg) and negative control group (blank lipid injection).   Drugs were given by tail vein injection，2 times each week for 3 weeks. Tumor growth was  followed tumor volume(VT)，relative tumor volume (VRT)，relative proliferation rate of tumor(T/C)，tumor weight and tumor inhibition rate were calculated. RESULTS： Compared with control group，each PL group inhibited tumor growth in mice carrying H460 cells. The effects of PL 6.0 mg/kg group were higher than positive control (P<0.05)，and PL 3.0 mg/kg group showed no significant difference with positive control(P>0.05).  CONCLUSION：PL exerted an inhibitory effect on tumor growth in nude mice carrying human lung cancer H460 cell lines.

OBJECTIVE:  To investigate the expression and significance of nuclear factor-κappa B in alcohol-induced acute hepatocyte injury. METHODS：Forty mice were randomly divided into a control group and three alcohol treated groups (250，500，1 000 mmol/kg). Each group included ten mice. 16 h after gavage，serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels were measured. After 24 h，the liver was examined by HE staining and oil Red O staining. The expression of NF-κB protein in hepatocytes was assessed by immunohistochemistry.  RESULTS：Serum AST and ALT levels in three alcohol-treated groups were significantly increased compared with that in the control group (P<0.05). There was vacuolar degeneration in hepatocytes by HE staining. There were large amounts of Oil Red O staining droplets in the hepatocytes. In alcohol-treated groups (500，        1 000 mmol/kg)，the integrated optical density expression of NF-κB protein in hepatocytes cytoplasm and nucleus were significantly higher (P<0.05).  CONCLUSION： This study successfully set up an alcohol-induced acute hepatocyte injury mouse model，and illustrated the role of NF-κB in the   development and progression of acute alcoholic-induced hepatocyte injury.

 OBJECTIVE: In order to understand genetic effect from environment factors and to assess correctly the health effect of low dose radiation on occupational personnel.  METHODS：The investigated objects came from 87 healthy adults who took routine physical examination and living in Beijing city. 2 mL peripheral venous blood from each person was drawn into heparinized tubes. Conventional chromosome culture with adding colchicines at the beginning and Cyt-B micronuclei (MN) methods were applied. Chromosomal aberrations (CA) and binucleated lymphocyte MN were analyzed using Metafer scanning system combined with manual work. Comparisons according to different age groups and both genders were carried out.  RESULTS：The average spontaneous frequencies of chromatid-type and chromosomal-type aberrations in 87 tested persons were 0.70% and 0.20%，respectively. In chromosomal-type aberrations， the dicentrics plus rings (dic+r) were 0.13%，acentrics alone were 0.06%. Spontaneous MN and MNC frequencies were 23.43‰ and 20.47‰，respectively. Except chromatid-type aberration，spontaneous frequencies of CA and MN increased with age (P<0.05) and there were no distinct differences between genders (P>0.05). CONCLUSION： The spontaneous frequencies of chromosomal aberration (dic+r) and micronucleus did not exceed international background range，but showed a rising trend when compared with former reports in China.

OBJECTIVE:  To investigate the protective effects of Guanxin II Hao in myocardial ischemia- reperfusion injury.  METHODS：Myocardial cells were cultured in vitro in a hypoxia/reoxygenation model，simulating myocardial ischemia reperfusion injury.   The  experiment was divided into 10% blank serum control group，10% Guanxin II Hao serum experimental group and 10% gathers the heart crisp serum the masculine control group. Myocardial cells with lactic acid dehydrogenase (LDH)，creatine kinase (CK) release and malondialdehyde (MDA) content and superoxide dismutase (SOD) activity was evaluated.  RESULTS：Guanxin II Hao group compared with the blank serum group， supernatant of cultured LDH release was significantly reduced(P<0.05)； the amount of released CK was also decreased significantly(P<0.01). MDA content decreased significantly(P<0.05)； whilst SOD activity was significantly enhanced (P<0.01).  CONCLUSION：This Chinese medicine compound used for treating coronary heart disease showed protective effects on myocardial hypoxia / reoxygenation injury in vitro.

 OBJECTIVE:  To investigate laboratory parameters and neonatal conditions of rescued ICSI.  METHODS：Laboratory tests，obstetric manifestations and neonatal outcomes of 203 couples receiving conventional ICSI (control group) were compared to those of 117 couples receiving rescued ICSI (test group) by using retrospective study at Chengdu Jinjiang Hospital for Maternal and Child Health Care from January to December 2011.  RESULTS： Incidence of multiple pronucleates in test group (3.00%) was significantly higher than that in control (1.39%). A patient had induced abortion and a premature baby died on the 10th day after birth in control group. There were no differences in rates of fertilization，cleavage，D3 top quality embryo，blastocyst formation，cryopreservation，embryo transfer， implan-tation， pregnancy，multiple-gestation pregnancy，ectopic pregnancy，early abortion，late abortion， live-born and fetal malformation between test and control groups. Neonatal outcome measures also showed no statistical difference in sex ratio，newborn's length and weight at birth and Apgar score between groups. For singleton pregnancies，preterm birth rate (8.33%) in control group was lower than that in test group (20.51%)，and for twin pregnancies，preterm birth rate (63.64%) in control group was higher than that in test group (25.00%)，but no significant difference for either singleton or for twin pregnancies between groups was observed. CONCLUSION：ICSI after a previous failed fertilization of conventional IVF may significantly improve the fertilization rate ，high-quality embryo and clinical outcomes of a second IVF-ET cycle．

OBJECTIVE:  To  explore  the  potential  mutagenicity  of  2，4-dichlorophenoxyacetic  acid.  METHODS：Ames  test，mouse  bone  marrow  micronucleus  test  and  mouse  primary  spermatocyte  chromosome  aberration  test  were  conducted.  RESULTS：Ames  test  showed  no  two- fold  increase  in  the  spontaneous  reversion  colonies  compared  with  the  negative  control  group  (P>0.05).  No  significant  difference  was  found  in  chromosome  aberration  and  micronucleus  rate  between  control  and  experimental  groups  (P>0.05). CONCLUSION：2，4-dichlorophenoxyacetic  acid  showed  no  mutagenicity  under  these  test  conditions.