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当期目录

2013年 第25卷 第2期 刊出日期:2013-03-30
论著
过表达miR-200家族对α粒子诱发恶性转化人支气管上皮细胞迁移能力的影响
高 刚,杨英杰,刘建香,田 梅,苏 旭
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  83-86.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.001
摘要 ( 2411 )   PDF (885KB) ( 1138 )  
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目的:探讨过表达miR-200家族对α粒子诱发恶性转化人支气管上皮细胞 (RHT35细胞)迁移能力的影响。方法:用SiPORT转染试剂转染100 nmol/L miR-200b mimic和miR-141 mimic或阴性对照 (mimic control)于RHT35细胞中72 h后, 分别采用免疫印迹、实时荧光定量PCR技术检测过表达miR-200b和miR-141对 RHT35细胞ZEB家族 (ZEB1和ZEB2)及上皮间质转变相关标志分子表达的影响;并用伤口愈合实验研究过表达miR-200b和miR-141对RHT35细胞迁移能力的影响。结果:ZEB1和ZEB2蛋白在RHT35细胞中高表达。与阴性对照转染组相比,miR-200b mimic和miR-141 mimic转染组中miR-200靶基因ZEB家族表达显著下调 (P<0.01);而上皮间质转变相关标志分子E-cad mRNA表达显著上调 (P<0.05或P<0.01),N-cad表达显著下调 (P<0.01)。与阴性对照转染组相比,miR-200b mimic和miR-141 mimic转染组能显著抑制RHT35细胞的迁移能力。结论:过表达miR-200b和miR-141对 RHT35细胞的迁移能力有显著抑制作用。

DENND2D通过调控PARP1对非小细胞肺癌细胞系H1299中顺铂细胞毒性的影响
凌 兵,冯 林,程书钧
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  87-90.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.002
摘要 ( 3228 )   PDF (905KB) ( 922 )  
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目的: 检测肺癌细胞系H1299细胞中DENN/MADD domain containing 2D (DENND2D)基因过表达对顺铂细胞毒性的影响,并初步探讨其机制。方法:应用瞬时和稳定转染两种方法使H1299细胞外源过表达DENND2D基因,以空载体组作为对照组,应用CCK-8比色法检测不同浓度顺铂作用下H1299细胞的存活情况,据此计算出IC50值。利用Western blot方法检测外源过表达DENND2D的H1299细胞多聚ADP核糖聚合酶 [poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP1]的表达情况。利用顺铂处理外源过表达DENND2D的H1299细胞,并检测不同处理时间点 (0、1、2、4和8 h)H1299细胞多聚ADP核糖[poly (ADP-ribose),PAR]的表达情况。结果:顺铂对外源过表达DENND2D基因的H1299细胞毒性明显高于空载体组 (IC50值降低,P<0.05)。外源过表达DENND2D的H1299细胞PARP1蛋白和PAR蛋白的表达均比空载体对照组低,且空载体对照组PAR的表达随时间推移呈上升趋势,而外源过表达DENND2D组则呈下降趋势。结论:DENND2D可能通过对PARP1的调控增强了顺铂对肺癌细胞系H1299的细胞毒性。

早熟凝集染色体环法在山西太原事故受照射者生物剂量估算中的应用
姚 波,李玉芳,白 娟,周振山,王军良,满秋红,邱丽娟,刘广贤,郭 梅,艾辉胜
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  91-95.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.003
摘要 ( 4798 )   PDF (922KB) ( 720 )  
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目的: 探讨药物诱导的早熟凝集染色体环 (prematurely condensed chromosomes ring,PCC-R)分析方法在辐射事故受照射者生物剂量估算中的应用。方法:山西太原辐射事故发生后16 h收集5名受照射者 (1、2、3、4和5号)的外周血,及1号受照者照射后23 h的骨髓细胞和24 h的外周血,采用冈田酸 (Okadaic acid,OA)诱导的PCC方法计数PCC细胞中的PCC-R,以新建立的PCC-R剂量-效应曲线 (1~20 Gy)估算生物剂量。照射后31 d对4名受照射者 (2~5号)的PCC-R频率进行了分析。并采用常规染色体双加环 (dic+r)、胞质分裂阻滞微核 (cytokinesis-block micronuclei,aCBMN)分析及物理方法对PCC-R法的结果进行验证。结果:最严重受照射者1号的外周血培养仅获得极少量的PCC细胞,而骨髓培养获得了一定数量的PCC细胞。以骨髓细胞PCC-R频率对1号及以外周血PCC-R频率对2~5号进行剂量估算的结果分别为12.4、3.6、3.2、1.7和1.5 Gy。2~5号受照者照后31 d PCC-R频率与照后16 h相比下降幅度分别为51%、69%、69%及44%。结果与用dic+r、CBMN分析及物理方法估算的剂量接近,与临床表现基本相符。结论:经实际应用证明,药物诱导的PCC-R法简便、快速,新建立的PCC-R剂量-效应曲线准确、可靠。该法更适用于较高剂量照射的生物剂量估算,且应在照后尽早取血,最好在1个月之内。

大豆黄素对有机氯类农药诱导乳腺癌细胞增殖效应的抑制作用
张 明,那晓琳,杨 洋,易 成
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  96-99.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.004
摘要 ( 3946 )   PDF (1464KB) ( 794 )  
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目的: 探讨大豆黄素对有机氯农药诱导乳腺癌 MCF-7细胞增殖效应的抑制作用。方法:取对数生长期的MCF-7细胞,分别设含不同浓度的大豆黄素、氯丹、β-六六六 (β-HCH)、邻,对’ -滴滴涕 (o,p'-DDT)单独染毒组以及100 μmol/L大豆黄素与上述各农药联合作用组,并设溶剂对照 (0.1% 二甲基亚砜)组。培养48 h后,采用噻唑蓝 (MTT)实验检测MCF-7细胞的增殖情况。结果:与溶剂对照组相比,100 μmol/L的大豆黄素单独染毒组使MCF-7细胞的增殖率下降,不同浓度的有机氯农药单独染毒使MCF-7细胞的增殖率升高,差异均有统计学意义 (P<0.05)。与相应不同浓度的有机氯农药单独组相比,联合染毒组MCF-7细胞的增殖率明显下降,差异均有统计学意义 (P<0.05)。结论:大豆黄素能够抑制不同浓度有机氯农药诱导的MCF-7细胞的增殖效应。

环境危险因素和NAT2基因多态性的交互作用与女性乳腺癌的关系
李 君,蒋守芳,陈海燕,刘 坤,袁聚祥,牛凤玲,张国志
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  100-105.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.005
摘要 ( 2771 )   PDF (863KB) ( 880 )  
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目的: 探讨环境危险因素、N-乙酰基转移酶-2(N-acetyltransferase-2,NAT2)基因多态性以及二者的交互作用与女性乳腺癌的关系。方法:采用病例对照研究,选择经病理确诊的原发性乳腺癌新发女性患者140例,对照选择与病例同期入院的非肿瘤女性患者140例,进行饮食习惯与生活方式、环境及职业暴露等问卷调查。采用盐析法提取研究对象静脉血DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段多态性 (PCR-RFLP)技术检测NAT2基因型并分析环境因素、NAT2基因多态性及其基因-环境的交互作用与乳腺癌的关系。结果:女性乳腺癌的环境危险因素为居住地多环芳烃等环境污染、职业接触多环芳烃、职业使用农药≥10年,室内杀虫剂使用≥5年,被动吸烟≥10年,而烹调使用排油设备、豆类摄入多为保护因素。病例组中NAT2基因快、慢乙酰化表型频率为55.0%、45.0%,对照组为77.9%、22.1%,两组间的差异有统计学意义 (P<0.05)。被动吸烟≥10年、职业接触多环芳烃与NAT2慢乙酰化表型存在交互作用,交互作用值分别为3.39和1.70 (P<0.05)。结论:被动吸烟≥10年、职业接触多环芳烃与携带慢乙酰化表型存在交互作用,增加了易感个体乳腺癌的发生风险。

Hh信号通路在口腔鳞状细胞癌中的激活及意义
王俊菊,宋令岗,张 凯,刘艳平
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  106-110.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.006
摘要 ( 2490 )   PDF (1871KB) ( 782 )  
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目的: 研究口腔鳞状细胞癌中Shh、Ptch、Gli-1在基因及蛋白水平的表达,并探讨其阳性表达与口腔鳞状细胞癌生物学特性之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法分别检测40例口腔鳞癌和30例正常口腔黏膜中Shh、Ptch、Gli-1蛋白的表达;RT-PCR法检测10例口腔鳞癌组织及5例正常口腔黏膜组织中Shh、Gli-1和Ptch mRNA的表达。结果:免疫组织化学结果显示,Shh、Ptch和Gli-1蛋白在口腔鳞癌中阳性表达率分别为62.5%、60.0%和65.0%,在正常口腔黏膜中3种蛋白均不表达。非参数统计分析示,Shh及Gli-1的阳性表达与肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关 (P<0.05),Ptch蛋白的表达与淋巴结转移呈显著正相关 (P<0.05)。RT-PCR结果显示,Shh、Ptch、Gli-1 mRNA在口腔鳞癌组织中的阳性表达分别为60%、50%、70%,明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义 (P<0.05)。结论:Hh信号通路在口腔鳞状细胞癌组织中被激活并与口腔鳞癌的发生、发展、转移关系密切。

青岛地区人乳头状瘤病毒感染亚型与肺鳞状细胞癌的相关性
高志棣,邵 纬,李 黎,马晓业,孙玉萍
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  111-114.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.007
摘要 ( 2733 )   PDF (914KB) ( 1363 )  
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目的: 检测青岛地区居民肺鳞状细胞癌 (squamous cell carcinoma,SCC)组织人乳头状瘤病毒 (human papillomavirus, HPV) 感染亚型与肺SCC的相关性。方法:收集肺SCC石蜡病理切片196例,提取癌组织和癌旁组织DNA,应用PCR及斑点杂交技术进行HPV基因检测,并对HPV亚型分布及其与肺SCC分级的关系进行分析。结果:在196例标本中,114例(58.16%)存在不同亚型的HPV感染,较癌旁组织14.80%(29/196)明显增高 (P<0.05)。主要为HPV6 (48/196,24.49%)、HPV16 (61/196,31.12%)、HPV18 (4/196, 2.04%) 及HPV58 (1/196,0.51%)4型,HPV6阳性主要存在于低度恶性鳞癌中,HPV16阳性主要发生在中高度恶性鳞癌中。吸烟 (92.98%)和男性 (70.18%)与肺鳞癌HPV感染阳性率正相关 (P<0.05),低龄 (7.89%)与HPV感染负相关 (P<0.05)。结论:HPV感染与肺SCC的形成密切相关,低危型HPV6感染在肺鳞癌发生中的作用值得进一步研究。

应用MALDI-TOF MS 检测5种白血病细胞株DCK和CDA基因部分单核苷酸多态性
张孝平,菅子莹,陈宝安,许佩佩,彭苗新,夏国华,程 璐,陆祖宏
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  115-119.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.008
摘要 ( 3442 )   PDF (1051KB) ( 1092 )  
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目的: 检测5种白血病细胞株中脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,DCK)和胞苷脱氨酶(cytidine deaminase, CDA)基因的单核苷酸多态性。方法:培养人红白血病细胞株K562,人慢性粒细胞白血病细胞株Ka,人急性髓系白血病细胞株HL-60、U937,人Burkkit淋巴瘤细胞株Raji。采用QIAamp DNA Blood Mini Kit提取基因组DNA,设计引物,PCR扩增相应目的片段,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 (matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)检测DCK基因A674G(rs111454937)、C1644T(rs72552079),CDA基因A79C(rs2072671)、G208A(rs60369023)的单核苷酸多态性。 结果:5种细胞株DCK基因A674G(rs111454937)均为A/A纯合子型,C1644T(rs72552079)均为C/C纯合子型。HL-60、U937、Raji细胞株CDA基因A79C(rs2072671)为A/A纯合子,K562、Ka细胞株为C/A杂合子;5种细胞株CDA基因G208A (rs60369023) 均为G/G纯合子型。 结论:CDA基因的A79C(rs2072671)SNPs位点基因型在5株血液系统肿瘤细胞株中不尽相同,余所测3个SNPs位点基因型在各细胞株中均相同。

MARDHRS4的鉴定及其对DHRS4转录的调节
常晓兰,冯 雷,冯广友
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  120-123.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.009
摘要 ( 2321 )   PDF (1140KB) ( 1144 )  
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 目的: 筛选新的小鼠DHRS4反义链转录本并对其功能进行研究。方法:采用快速cDNA末端扩增方法,从小鼠正常肝细胞株NCTC1469中克隆DHRS4反义链转录本,据此转录本设计合适siRNA,然后转染NCTC1469细胞,转染成功36 h后应用RT-qPCR检测细胞内DHRS4 mRNA水平的改变。结果:成功克隆出1个新的天然反义RNA,全长835 nt,属于长链非编码RNA (long non-coding RNA,LncRNA),命名为MARDHRS4,应用siRNA干扰MARDHRS4后,DHRS4 mRNA降低约40%。结论:来自DHRS4反义链的LncRNA MARDHRS4具有增强DHRS4转录的作用。

转人α-乳清白蛋白奶粉的遗传毒性研究
支 媛,刘海波,耿桂英,崔文明,刘 珊,徐海滨
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  124-126.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.010
摘要 ( 3371 )   PDF (744KB) ( 734 )  
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目的: 评价转人α-乳清白蛋白奶粉的遗传毒性。方法:以转人α-乳清白蛋白奶粉为受试物,设每皿62、185、556、1 667、5 000μg 5个剂量进行Ames试验,按2.5、5.0和10.0 g/kg进行小鼠骨髓嗜多染红细胞 (polychromatic erythrocytes,PCE)微核试验和精子畸形试验,并设立环磷酰胺阳性对照组和蒸馏水阴性对照组。结果:转人α-乳清白蛋白奶粉各剂量组回变菌落数均未超过溶剂对照菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系;各剂量组PCE百分比未少于阴性对照组的20%,微核发生率与阴性对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05);各剂量组小鼠精子畸形发生率与阴性对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)。结论:在本实验条件下,转人α-乳清白蛋白奶粉未见遗传毒性。

肿瘤防治
线粒体DNA中D-loop区突变在非小细胞肺癌中的意义
江 磊,王祖义,汪国文,赵 华
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  127-133.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.011
摘要 ( 3305 )   PDF (1016KB) ( 716 )  
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目的: 探讨线粒体DNA中D-loop区突变在非小细胞肺癌中的意义及其临床应用的可能性。方法:提取20例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织细胞的线粒体DNA (mtDNA),PCR扩增D-loop区并进行测序,然后以人类基因组中的D-loop区序列为对照,分析基因突变。结果:20例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织mtDNA的D-loop区均发生突变,总突变数265个,其中癌组织特异性突变69个,癌旁组织特异性突变96个,共同突变50个,突变主要集中于D-loop的HVRII区。结论:线粒体DNA中D-loop区的突变主要集中于HVRII区,在非小细胞肺癌的发生发展中可能有重要作用。

维吾尔族妇女宫颈病变与CALCA基因启动子甲基化的关系
吐尔逊帕夏?吾布力卡斯木,阿比达?阿布都卡德尔,盛 磊,阿布力孜?阿布杜拉
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  134-138.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.012
摘要 ( 4371 )   PDF (947KB) ( 970 )  
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目的: 研究维吾尔族妇女宫颈病变与降钙素相关肽α(calcitonin-related polypeptide alpha,CALCA)基因启动子区CpG位点甲基化的关系,进一步揭示宫颈癌组织中该基因表达调控的表观遗传学机制。方法:收集维吾尔族妇女宫颈病变患者手术切除或活检组织标本50例,其中宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)25例、宫颈内上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)9例及慢性宫颈炎16例,应用Sequenom MassARRAY 甲基化DNA定量分析平台,对组织DNA的CALCA基因启动子区CpG位点进行甲基化水平的定量分析。结果:宫颈炎、CIN和CSCC组织中CALCA基因启动子区CpG片段甲基化率分别为0.22、0.26和0.33,经统计学分析,CSCC与CIN以及CSCC与宫颈炎之间均有显著差异(P<0.05)。从单一CpG位点角度分析,CSCC与宫颈炎组织CpG-2、CpG-3、CpG-9.10.11和CpG-12等6个CpG位点甲基化率均有显著差异(P<0.05)。结论:CALCA基因启动子甲基化与维吾尔族妇女宫颈癌发生密切相关,其中特定CpG位点甲基化水平变化可能成为宫颈癌早期诊断的分子标志物。

不同分子分型的HR阴性乳腺癌临床病理特征及预后的研究
陈燕枝,卢山珊,万 丽,黄卡特,杨开颜
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  139-143.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.013
摘要 ( 3072 )   PDF (1205KB) ( 937 )  
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目的: 探讨激素受体 (hormone receptor,HR)阴性浸润性乳腺癌的分子分型情况,以及不同分子分型的临床病理特征和预后?方法:应用组织芯片技术及免疫组化将所选200例HR阴性[包括雌激素受体 (estrogen receptor,ER)和孕激素受体 (progesterone receptor ,PR)均为阴性]浸润性乳腺癌,依据HER2及基底细胞标记[包括细胞角蛋白5/6 (cytokeratin 5/6,CK5/6),细胞角蛋白14 (cytokeratin14,CK14)及上皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor,EGFR)]表达情况,分为以下类型:HER2过表达型、基底细胞样型及裸型;HER2过表达型又分两类亚型:单纯性HER2过表达型、基底细胞样-HER2过表达型;比较不同分子分型乳腺癌的病理特征及预后。结果:HR阴性乳腺癌具有病理分级高,临床分期晚,发病年龄近绝经期等特点,各分型间差异无统计学意义;基底细胞样-HER2过表达型远处转移率高于基底细胞样型 (P<0.05),其5年无病生存率及5年总生存率低于各分型 (P<0.05)。 结论:基底细胞样型并非影响乳腺癌预后的独立因素,基底细胞样-HER2过表达型乳腺癌较基底细胞样型具有更差的预后情况。

Notch1在腺样囊性癌组织中的表达及其对预后的影响
赵 华,张 凯,江 磊,汪国文
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  144-148.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.014
摘要 ( 2675 )   PDF (1802KB) ( 623 )  
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目的: 探讨腺样囊性癌 (adenoid cystic carcinoma,ACC)组织中Notch1的表达,分析其表达与临床病理资料间的关系及其对预后的影响。方法:运用免疫组化方法检测38例ACC患者及对照组正常口腔小涎腺中Notch1的表达,并对ACC病例进行随访,分析Notch1的表达与临床病理资料间的关系及其对预后的影响。结果:ACC病例组中Notch1总阳性率为81.6% (31/38),而正常口腔小涎腺阳性率为30% (9/30),Notch1在ACC及正常口腔小涎腺中的表达差异具有统计学意义 (P<0.05)。Notch1的表达与病理分型、T分期及侵犯相邻组织呈正相关 (r =0.550,P=0.002;r =0.741,P=0.001;r =0.523,P=0.005)。单因素分析显示:病理分型、淋巴结转移、Notch1的表达、T分期、侵犯相邻组织对患者的预后有影响 (P<0.05),且Notch1的表达和肿瘤分期是影响患者预后的独立危险因素。结论:ACC生长缓慢,但易复发且伴远处转移,Notch1在ACC的发生和发展中起重要作用,在评估其预后方面起一定作用。

综述
精子发生过程中的组蛋白替换
卢 惠,徐 岚,黄天华
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  149-151.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.015
摘要 ( 1922 )   PDF (706KB) ( 1998 )  
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精子细胞在形态学上高度特化,其表观遗传学调控亦高度特化。组蛋白被鱼精蛋白替换为精子发生过程中独特的、非传统的表观遗传学调控方式。影响精子中组蛋白替换的主要因素有:组蛋白乙酰化修饰、组蛋白变体的影响、过渡蛋白TP1和TP2的作用、鱼精蛋白P1和P2的比值等。本文就精子发生过程中的组蛋白替换相关内容作简要综述。

肿瘤抗原MAGE与p53关系的研究进展
徐莹莹,桑梅香,单保恩
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  152-154.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.016
摘要 ( 2565 )   PDF (684KB) ( 1101 )  
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黑色素瘤抗原 (melanoma-associated antigen gene,MAGE)属于癌睾抗原 (cancer/testis antigen,CTA),CTA在正常组织中仅限于睾丸和胎盘中表达,而在各种肿瘤组织中呈高表达。基于肿瘤特异性基因表达和基因结构的不同,MAGE家族被分为两个亚家族:MAGE-I和MAGE-II,目前研究较多的是MAGE-I。MAGE-I蛋白在细胞增殖的通路调节中发挥了重要的作用,其机制是一些MAGE-I蛋白通过控制p53肿瘤抑制因子的表达来促进肿瘤发生发展。在本文中,我们将讨论MAGE-I蛋白对p53转录活性的调控机制,及其对肿瘤治疗新策略的贡献进行综述。

 

外源化学物的雌性生殖毒性研究进展
张 婷,程 熠,王 永,孙祖越
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  155-158.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.017
摘要 ( 1796 )   PDF (812KB) ( 1319 )  
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 生殖和发育功能障碍是当前严重影响人体健康的主要公共卫生问题之一。一些外源化学物作用于雌性生殖系统可能导致卵巢周期紊乱或不孕,使自发性流产率增加、子代发育异常、生育力下降等,因此鉴定具有雌性生殖毒性的外源化学物,探求其毒性作用机制,对防治外源化学物引起的生殖系统危害具有重要意义。本文总结了外源化学物对雌性生殖系统、孕期胎仔的毒性研究进展,根据其来源用途进行分类,并探索可能的机制及未来展望。

转基因猪体细胞核移植基因载体和供源选择的研究进展
陈佳虹,宋学雄,黄天华
癌变·畸变·突变. 2013, 25(2):  159.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2013.02.018
摘要 ( 1718 )   PDF (774KB) ( 728 )  
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体细胞核移植是动物转基因的常用手段。通过核移植技术获得转基因猪已经成为目前转基因猪新品种培育的主流技术,而载体和供核细胞的选择是转基因能否成功的关键,本文就这两方面的研究进展进行综述。