目的： 观察熊果酸 (ursolic acid，UA)对小鼠H22移植瘤的抑制作用并对其机制进行探讨。方法：将75只昆明种小鼠于左前腋下皮下接种H22肝癌细胞，24 h后随机分为5组，每组15只，模型组、环磷酰胺 (cyclophosphamide，CP)对照组[25 mg/ (kg·d)] 和UA低、中、高剂量药物组[50、100、150 mg/ (kg·d)]。UA各剂量组和CP对照组分别以相应剂量UA和CP灌胃，模型组以等体积花生油灌胃，每天灌胃1次，连续给药2周。末次给药24 h后，称小鼠体质量，摘除眼球取血后处死。无菌条件下完整剥离小鼠肿瘤及肝、肾、脾组织，计算抑瘤率及肝、肾、脾指数；HE染色观察肿瘤组织病理学改变；分离脾淋巴细胞，CCK8法测定小鼠脾淋巴细胞增殖活性；免疫组化法检测肿瘤组织中CD4+、CD8+ T细胞亚群的分布情况，计数CD4+ T细胞和CD8+ T细胞个数。并采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测血清中白细胞介素12 (interleukin-12，IL-12)的浓度。结果：UA各剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较缓慢，其中UA中、高剂量组肿瘤质量明显减小，与模型组比较，差异均具有统计学意义 (P<0.05)；UA中、高剂量组抑瘤率分别为30.15%和39.80%。UA各剂量组肝、肾指数与模型组比较差异无统计学意义 (P>0.05)，而脾指数则随UA剂量增加逐渐升高，其中，UA中、高剂量组脾指数与模型组比较差异具有统计学意义 (P<0.05)。HE染色病理观察结果显示，模型组肿瘤细胞生长旺盛，细胞体积较大，胞质丰富，少见坏死区域；UA干预组肿瘤组织中瘤细胞生长增殖明显受到抑制，肿瘤细胞数量减少，密度降低，排列稀疏，细胞核固缩深染或破裂，细胞间质较多，核浆比例减少，坏死区域明显增多。CCK8实验结果显示，随着UA剂量增加，脾淋巴细胞增殖活性逐渐升高，其中，UA中、高剂量组脾淋巴细胞增殖活性显著升高，与模型组间的差异具有统计学意义 (P<0.05)。免疫组化结果显示，UA中、高剂量组肿瘤组织中CD4+、CD8+ T细胞个数与模型组比较均明显增加，差异具有统计学意义 (P<0.05)。UA高、中、低剂量组血清中IL-12的含量均较模型组升高，差异均有统计学意义 (P<0.05)；UA高剂量组与CP对照组相比亦显著升高 (P<0.05)。 结论：一定剂量UA可抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长，其作用机制可能与UA促进机体免疫器官发育和淋巴细胞增殖，增加CD4+、CD8+ T细胞向肿瘤组织浸润，并提高血清中IL-12等抗肿瘤活性细胞因子的浓度诱导细胞免疫有关。

目的： 构建CYP1A2基因高表达载体，转染到L02肝细胞，建立CYP1A2高表达细胞株并检测三氯乙烯对该细胞株凋亡基因和癌基因的影响。方法：根据GenBank提供的CYP1A2基因cDNA序列设计引物，PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒高表达载体pLVX-acGFP1-C1中，将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染，收集病毒上清，感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP1A2高表达L02细胞株，通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP1A2高表达细胞进行染毒12 h，采用PCR方法检测凋亡基因 (Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因 (c-fos、c-myc、K-ras、p53)mRNA表达的变化。结果：测序证明重组慢病毒高表达载体CYP1A2基因序列与GenBank提供的CYP1A2序列一致，荧光定量PCR检测显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2 mRNA表达比正常L02肝细胞提高317倍，Western blot结果显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2蛋白表达水平比正常L02肝细胞高3.41倍。三氯乙烯染毒后，CYP1A2高表达细胞中凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平与正常肝细胞无显著性差异(P>0.05)，而Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。CYP1A2高表达细胞中癌基因c-myc和p53 mRNA表达水平低于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)，而c-fos和K-ras mRNA则高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。结论：三氯乙烯对CYP1A2高表达细胞凋亡基因和癌基因表达有显著影响，提示CYP1A2是三氯乙烯在体内代谢的重要因素，与三氯乙烯毒性存在一定关系。

目的： 探索131I-单克隆抗体对人OC-3-VGH卵巢癌裸鼠肿瘤的抑制作用。方法：建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型，将28只移植瘤模型裸鼠随机分成7组，即阴性对照组 (等体积生理盐水)、60 mg/kg环磷酰胺 (cyclophosphamide，CP)阳性组、单抗高 (10 mg/kg)、低 (2 mg/kg)剂量组、131I-单抗高剂量组 (10 mg/kg＋125 μCi)、131I-单抗中剂量组 (6 mg/kg＋75 μCi)、131I-单抗低剂量组 (2 mg/kg＋25 μCi)，各组连续腹腔给药14 d，分别在第0天 (d0)、d4、d8、d12、d15称量裸鼠体质量，测量肿瘤体积，于末次给药后24 h，剖瘤称取质量，计算相对肿瘤增殖率和抑瘤率。结果：与阴性对照组相比，单抗高剂量组、131I-单抗中、高剂量组均显著抑制肿瘤生长，相对肿瘤增殖率分别是54%、48%、30%，抑瘤率分别为33.59%、45.80%、64.89%，差异均具有统计学意义 (P＜0.01)，单抗高剂量组与131I-单抗高剂量组间的差异也具有统计学意义 (P＜0.05)。结论：单克隆抗体和131I-单克隆抗体对人OC-3-VGH卵巢癌均有明显的抑制作用，131I-单克隆抗体高剂量组有明显的增效作用。

目的： 观察甲基丙烯酸环氧丙酯 (glycidyl methacrylate，GMA)致人支气管上皮 (16HBE)细胞恶性转化过程中不同时点P15基因甲基化状态，探讨其在细胞恶性转化过程中可能的作用。方法：收获GMA转化前期 (第10代)、转化中期 (第20代)、转化后期 (第30代)16HBE 细胞，应用甲基化芯片技术和甲基化特异性PCR (MSP)检测P15基因在GMA诱导16HBE细胞恶性转化不同阶段的甲基化状态。结果：甲基化芯片结果显示，P15基因在转化中期、转化后期出现甲基化而转化前期未见甲基化，MSP法检测结果与芯片结果一致。结论：P15基因可能为GMA诱导细胞恶性程度相关的特异性基因，可考虑将其作为诱导细胞恶性转化的生物标志物。

目的： 观察γ射线对人外周血线粒体编码基因mRNA表达水平的影响，探讨线粒体编码基因用于辐射生物剂量估算的可行性。方法：用不同剂量水平 (0~5 Gy)的60Co γ射线照射3名正常人离体外周血样本，照射6 h后，提取总RNA，应用实时荧光定量PCR技术检测ND1，ND6，细胞色素C氧化酶亚基 (cytochrome C oxidase subunit，COX)I、II、III，三磷酸腺苷酶6 (adenosine triphosphatase，ATPase6)，三磷酸腺苷酶8 (adenosine triphosphatase，ATPase8) mRNA表达水平的变化，采用Origin 7.5拟合照射剂量与基因表达水平的剂量-效应关系曲线。结果：γ射线照射人外周血后，线粒体编码基因COXI及 ATPase6的相对表达水平在0~5 Gy剂量范围内表达先增加，3 Gy剂量点之后显现下降趋势，对这两个基因在0~3 Gy剂量范围内分别进行拟合，得到COXI 剂量-效应关系方程为Y=0.625 9+0.256 1D (r2=0.916 3，P<0.01)； ATPase6基因表达剂量-效应关系方程为Y=0.218 9+ 0.806 0 D (r2=0.912 6，P<0.01)，其他5个基因的相对表达水平与照射剂量间不存在明显的剂量-效应关系 (P>0.05)。结论：γ射线对人外周血线粒体编码基因COXI 及 ATPase6的mRNA表达水平具有明显的影响，这两个基因的表达水平与γ射线的照射剂量存在线性关系，有望用于辐射生物剂量的估算。

目的： 探讨叶酸和核黄素对乳腺癌患者外周血淋巴细胞8和17号染色体非整倍体的影响。方法：采用多色荧光原位杂交 (FISH)比较乳腺癌患者与对照组淋巴细胞在叶酸高 (200 nmol/L，HF)、低 (20 nmol/L，LF)浓度和核黄素高 (500 nmol/L，HR)、低 (1 nmol/L，LR)浓度不同组合 (LFLR，LFHR，HFLR，HFHR)下，8和17号染色体在单核细胞及胞质阻断双核细胞中非整倍体的发生频率及其差异。结果：乳腺癌及对照组在高叶酸组合 (HFLR+HFHR)培养条件下8和17号染色体单、双核细胞异常信号数总和均显著低于低叶酸组合 (LFLR+LFLR) (P<0.01)。在各组合浓度下，两条染色体的异常信号频率总和在单核和双核细胞中，乳腺癌患者均较对照组显著增高 (P<0.01)。叶酸和乳腺癌因素对两条染色体的异常分离均有显著影响 (P<0.01)，但叶酸缺乏的影响强于乳腺癌因素；核黄素缺乏与乳腺癌因素对两条染色体分离的变异贡献率差异无统计学意义 (P>0.05)。结论：叶酸缺乏可能导致8和17号染色体形成非整倍体，在本研究体系中叶酸缺乏是影响染色体正常分离的主导因素。

目的： 研究毒死蜱和乐果联合染毒对大鼠血清和脑组织乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase，AChE)和丁酰胆碱酯酶 (butyrylcholinesterase，BuChE)活性的影响。方法：采用3×3析因设计，雌性SD大鼠按体质量随机分为9个剂量组和1个阴性对照组，每组10只。选用毒死蜱和乐果的无可见有害作用水平 (no observed adverse effect level，NOAEL)、1/100半数致死剂量 (median lethal dose，LD50)和1/50 LD50作为低、中、高3个剂量水平，分别为毒死蜱0.03、1.35、2.70 mg/ (kg·d)，乐果1.20、3.25、6.50 mg/ (kg·d)。灌胃染毒30 d，染毒结束后，经乙醚麻醉，股动脉取血，脱臼处死，剥取大脑皮质和海马，使用胆碱酯酶试剂盒测定胆碱酯酶活性。结果：染毒30 d后，高剂量组大鼠胆碱酯酶活性低于对照组 (P＜0.05)；析因设计方差分析显示，毒死蜱和乐果联合染毒，对大鼠血清和皮质AChE活性无交互影响；对海马AChE和血清、脑组织BuChE活性存在交互作用 (P＜0.01)。结论：经口染毒高剂量有机磷农药可显著抑制血清和脑组织的胆碱酯酶活性，两种有机磷农药混配后可对胆碱酯酶活性产生交互作用。

目的： 探讨精子相关抗原9 (sperm-associated antigen 9，SPAG9)在膀胱移行细胞癌 (bladder transitional cell carcinoma， BTCC)中的表达并分析其临床意义。方法：选取经临床病理诊断的BTCC标本98例，正常膀胱组织30例，应用免疫组化染色方法检测SPAG9在BTCC中的表达和分布情况，分析其与肿瘤的临床分期、病理分级及2年复发率的关系。结果：SPAG9在正常膀胱组织中为阴性表达，而在BTCC组中的阳性表达率为75.5% (74/98)，并且随着肿瘤分期和分级的升高SPAG9蛋白的表达增加，SPAG9阳性表达率在病理分级G1、G2与G3级之间的差异有统计学意义 (P<0.05)；在临床分期Ta与T1组间的差异有统计学意义 (P<0.05)； SPAG9蛋白表达阳性的非肌层浸润性膀胱癌患者，其2年复发率显著高于阴性表达者 (P<0.05)。结论：SPAG9蛋白在BTCC中呈高表达状态，可成为BTCC有意义的肿瘤标志物，并有可能作为判断 BTCC侵袭力、监测复发的重要指标。阻断SPAG9表达有望成为膀胱癌靶向治疗的新靶点。

目的： 检测消化道肿瘤早期相关基因survivin mRNA在哈萨克族食管癌组织中的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态，并进一步探究survivin启动子甲基化是否参与了食管癌的发生。方法：提取哈萨克族食管癌患者癌组织及远端无癌组织RNA，RT-PCR检测组织中survivin mRNA的表达水平，甲基化特异性PCR (methylation specific PCR，MSP)检测survivin启动子区CpG 岛的甲基化状态。结果：在20对食管癌组织标本中，癌组织中survivin mRNA阳性表达率 (95%)明显高于远端无癌组织 (65%) (P＜0.05)。癌组织及远端无癌组织中survivin基因启动子区CpG岛多为杂合型甲基化，且两种组织间甲基化状态无明显差异 (P＞0.05)。结论：survivin mRNA表达水平的增高在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起到了一定的作用，但其表达与启动子区CpG岛甲基化无关，提示甲基化并未直接调控该基因的表达并促进哈萨克族食管癌的发生发展。

目的： 构建SET基因shRNA慢病毒表达载体，为研究SET在三氯乙烯毒性机制中的作用提供技术支持。 方法：通过NCBI检索SET序列，设计合成5对shRNA片段，退火后连接到慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector。挑取筛选的单菌落，经PCR和测序鉴定后提取质粒。将质粒共转染到293T细胞，收集病毒上清，转导入L-02肝细胞中，利用嘌呤霉素筛选得到SET缺陷型细胞，最后利用荧光定量PCR和Western blot鉴定干扰效果。结果：PCR和测序结果证明双链shRNA正确插入慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector，共转染293T细胞得到高滴度病毒，转导L-02细胞筛选出SET基因缺陷型细胞。结论：利用慢病毒介导的RNAi技术成功构建了SET基因缺陷型细胞。

目的： 为快速检测食品中的伏马毒素B1 (fumonisin B1，FB1)，制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法：在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上，采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水，经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体，利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数：线性范围、检出限及与黄曲霉毒素 (aflatoxins，AFB1)、呕吐毒素 (deoxynivalenol，DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性；对试剂盒稳定性采用37 ℃破坏实验；采用3个浓度的加标回收试验确定回收率；对19份样品及FB1玉米盲样进行检测，并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果：所研制试剂盒的最低检出浓度为2 ng/mL，检测线性范围为2～512 ng/mL，线性方程为Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998)，50%抑制浓度为10.07 ng/mL，加标提取后，玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%～116.76%之间，与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性，试剂盒常温下可保存315 d以上。结论：本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。

目的： 建立一种具有分裂指数高和染色体分散好等优点的550~850条带纹高分辨染色体的制备方法。方法：取10例健康人外周血为样本制备淋巴细胞高分辨染色体。固定5-氟尿嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺的剂量，进行5个因素3个水平的正交设计15种实验方案。5个因素分别为培养时间、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺作用时间以及低渗时间。3个水平分别为培养时间64、72、80 h；胸腺嘧啶核苷作用时间16、17、18 h；溴化乙锭作用时间3、4、5 h；秋水仙胺作用时间10、15、20 min以及低渗时间30、40、50 min。每例样本同时采用15种方案进行实验，比较各方案带纹在550条以上时染色体分裂指数和分裂相分散的情况。结果：在15种方案中培养时间以及秋水仙胺作用时间对分裂指数有显著影响 (P＜0. 01)，其中培养72 h后加5-氟尿嘧啶核苷和尿嘧啶核苷进行同步化和秋水仙胺作用15 min高分辨染色体分裂指数最大。37 ℃低渗40 min高分辨染色体分散效果最佳。结论：本实验方案的高分辨染色体制备方法，具有分裂指数高和染色体分散好等优点，具有较好的推广价值。

目的： 研究四物汤抗环磷酰胺的诱变作用。方法：小鼠骨髓细胞实验中，设四物汤高、中、低剂量组[分别为9.36、4.68、2.34 mg/(kg·d)]，环磷酰胺(cyclophosphamide，CP)阳性对照组和空白对照组，四物汤各组以不同浓度药液给小鼠连续灌胃7 d，阳性对照组和空白对照组灌服等量生理盐水。于第7天灌胃后，四物汤各组和阳性对照组小鼠腹腔注射CP 20 mg/kg，24 h后处死动物，取股骨骨髓细胞制备微核标本和染色体标本。人外周血淋巴细胞实验中，四物汤设高、中、低剂量[分别为3.36、1.68、0.84 g/(kg·d)]，以家兔含药血清的形式加入淋巴细胞培养液中，四物汤各组和阳性对照组均在培养液中加入10-5 mg/mL 的CP，空白对照组加入等量生理盐水。培养72 h后收获细胞，制备微核标本和染色体标本。在光镜下观察、计数含微核及染色体畸变的细胞数，计算微核率及染色体畸变率。结果：四物汤3个剂量组在上述测试系统中，与阳性对照组比较，微核率及染色体畸变率均明显降低，差异有统计学意义 (P＜0.01)；与空白对照组比较，微核率及染色体畸变率差异均无统计学意义 (P＞0.05)。结论：在本实验条件下，四物汤有明显的抗环磷酰胺诱变的作用。

目的： 研究不同比例的三聚氰胺 (melamine，M)与三聚氰酸 (cyanuric acid，C )联合给药对小鼠的联合急性毒性。方法：选择SPF级昆明种小鼠240只，随机分为20组，每组12只，雌雄各半。采用寇氏法研究三聚氰胺与三聚氰酸 (M+C)对小鼠的联合急性毒性，M+C按1∶1、2∶1、1∶2三种比例混合经口一次性灌胃给药。每种比例设立6个剂量组即109、173、274、435、689和1 092 mg/kg，灌胃容量为0.02 mL/g。并设溶剂对照组(给予等体积的玉米油)，另设空白组。动物给药后记录生长情况、死亡情况、死亡动物体质量与肾脏质量，连续观察14 d，计算半数致死剂量 (median lethal dose，LD50)。第15 天将存活动物全部脱臼处死，解剖观察，记录动物体质量与肾脏质量。结果：M+C (1∶1)组，雄鼠LD50为274 mg/kg、雌鼠LD50为401 mg/kg；M+C (2∶1)组，雄鼠LD50值为401 mg/kg、雌鼠LD50值为546 mg/kg；M+C (1∶2)组，雄鼠LD50值为344 mg/kg、雌鼠LD50值为589 mg/kg。M+C 3种比例混合物经口灌胃，剂量为1 092 mg/kg时，动物均死亡；剂量低于173 mg/kg时，各组动物均无死亡。M+C各给药试验组，小鼠肾脏均发生病变，肾脏不同程度膨胀，表面可见斑点，肾脏脏器系数值大于两个对照组 (P<0.05)。结论：三聚氰胺与三聚氰酸混合物在1∶1比例下，经口毒性较大，对雄鼠的毒性大于雌鼠，可引起肾毒性。与单独三聚氰胺或三聚氰酸毒性相比，M+C联合毒性大。

目的： 研究国产医用抛射剂HFC-134a的急性毒性，为进一步扩大其在医疗上的应用提供可靠的实验安全数据。方法：将60只昆明小鼠分成5组，每组12只，雌雄各半，分设剂量为0、100、500、1 000、5 000 mg/m3，连续吸入HFC-134a气体染毒4 h，后常规饲料喂养，期间每天观察小鼠行为学改变，7 d后处死小鼠，比较染毒前后小鼠体质量变化，并行大体病理形态学检查，观察肝、肾、胰腺等脏器的变化。结果：与阴性对照组相比，染毒组小鼠体质量，行为及肝、肾、胰腺等脏器未发现异常改变。最高给药剂量(5 000 mg/m3吸入4 h)组，无动物死亡，平均体质量增至(26.3±5.8) g，无致炎、致敏和中毒反应。结论：在本实验条件下，医用抛射剂HFC-134a未发现明显的急性毒副反应，常规用药剂量安全。

胞质分裂阻滞法 (cytokinesis-block micronucleus，CBMN)主要用来分析双核细胞中的微核，研究发现该方法还可以分析其他指标，如核质桥和核芽等。目前核质桥 (nucleoplasmic bridge，NPB)及核芽 (nuclear bud，NBD) 分析是细胞组学分析的重要组成部分。NPB和NBD的形成受到许多因素的影响，而且有望成为新的辐射损伤生物标志物。本文将对NPB和NBD的定义、形态特征、形成机制及影响因素等方面进行综述。

氧化应激损伤与机体多种病理过程密切相关，如肿瘤、老年性神经退行性疾病等。核转录因子Nrf2以Keap1-Nrf2-ARE信号通路介导并激活多种抗氧化基因和II相解毒酶基因的转录，从而减轻ROS和亲电子物质引起的细胞损伤，维持机体氧化-抗氧化的生理平衡。本文综述了Keap1-Nrf2-ARE介导抗氧化物对抗氧化应激损伤的作用和机制，为抗氧化药物机制的探讨奠定基础。

抑癌基因p53调节多种microRNA的表达，其中最典型的是miR-34家族。miR-34以p53依赖的方式诱导下游基因的表达，使细胞周期阻滞，促进细胞凋亡及衰老等。在肿瘤中恢复miR-34的表达可抑制细胞增殖，从而发挥抑癌作用。另外，在辐射损伤中miR-34异常表达以促进DNA损伤修复；增强或抑制miR-34的表达可提高肿瘤的辐射敏感性或增强正常组织的辐射抗性，以达到更好的放疗效果。本文主要综述miR-34在肿瘤中的表达情况及诊断治疗方面的最新进展，并介绍了miR-34在辐射损伤及影响辐射敏感性方面的作用。

哺乳动物体内的活性氧 (reactive oxygen species，ROS)是一类含有氧元素的自由基，与肿瘤的发生、发展关系密切。过氧化氢酶 (catalase，CAT)是体内重要的抗氧化酶，在清除ROS、维持氧化还原状态的平衡方面发挥着重要作用。本文对CAT的结构、作用机制及其在肿瘤发生、发展和治疗中的作用进行综述，为肿瘤的预防和治疗提供新思路。