目的: 观察华卟啉钠(DVDMS)在不同溶液中及动物皮肤中的光漂白性质。方法: 采用微量分光光度计,测量不同浓度DVDMS(10、20、40 μg/mL)在生理盐水(NS)、RPMI-1640培养基(RPMI-1640)、含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基(RPMI-FBS)和HaCaT细胞悬液中的吸收峰;设置DVDMS浓度1、2.5、5、10、20、40 μg/mL,采用酶标仪分别检测在激光照射3、6、10、20、40、50、60、120、180 min后DVDMS在上述4种溶液中的光漂白;正常和银屑病裸鼠均尾静脉注射DVDMS 2 mg/kg,采用小动物活体成像仪观察DVDMS在皮肤组织中的分布及激光照射后在银屑病模型动物皮肤组织中的漂白现象。结果: DVDMS 10、20、40 μg/mL在本实验设置的4种溶液中特征吸收峰明显;在前期药效学研究的条件下(激光照射3 min),DVDMS在4种溶液中发生了光漂白;在180 min内,DVDMS的光漂白呈现先快后慢的二相过程;DVDMS在正常和银屑病模型动物组织中分布均匀,在9.6 J/cm²激光照射后,DVDMS在银屑病模型动物皮肤组织中发生了明显光漂白。结论: DVDMS体外光漂白受光剂量、初始浓度、溶剂种类的影响,符合二级动力学模型,在银屑病模型动物皮肤组织中被激光照射后可发生光漂白。

目的: 建立叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人正常肝细胞系L02自噬模型并探讨其中的线粒体应激机制。方法: 体外培养L02细胞,用不同浓度(100、200、400、800、1000 μmol/L)t-BHP及线粒体靶向抗氧化剂MitoQ或p38/MAPK特异性抑制剂SB203580进行处理,采用免疫荧光和Western blot检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和p62蛋白水平,以及p38/MAPK信号通路的激活情况;Mito-SOX Red染色流式法检测细胞线粒体活性氧(ROS)水平。结果: 免疫荧光结果显示t-BHP剂量≥800 μmol/L时可明显诱导L02细胞内LC3-Ⅱ发生聚集。Western blot结果显示,与对照组比较,800和1000 μmol/L t-BHP处理可显著增加LC3-Ⅱ蛋白水平,并降低p62蛋白水平(P均<0.05)。同时线粒体ROS水平在≥400 μmol/L t-BHP处理后明显升高,在1000 μmol/L t-BHP处理后p38蛋白磷酸化水平显著增加(P均<0.05)。给予线粒体靶向抗氧化剂MitoQ或p38/MAPK特异性抑制剂SB203580预处理后可有效拮抗t-BHP(1000 μmol/L)处理引起的LC3-Ⅱ和p62蛋白水平改变。结论: 我们成功建立了t-BHP诱导体外培养人正常肝细胞系L02的自噬模型,证明线粒体ROS介导了此过程的发生,同时p38/MAPK通路在此过程中发挥了重要作用。

目的: 探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)在鼻咽癌组织中的异常表达与临床病理的关系,为临床提供参考。方法: 计算机检索Cochrane Library、Pubmed、EMbase数据库以及中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库中有关E-cadherin与鼻咽癌研究的文献,采用STATA 11.0软件包进行分析。异常表达、分化程度、T分期、淋巴结转移状况及临床分期采用优势比(OR)及95%可信区间(CI)作为效应量进行分析。结果: 入选16篇文献共包括1040例鼻咽癌患者,结果显示E-cadherin在鼻咽癌组织中的异常表达较正常对照组明显增加(OR=0.096,95% CI:0.036~0.252,P=0.000);E-cadherin异常表达与分化程度、淋巴结转移及临床分期明显相关(OR=0.232,95% CI:0.061~0.884,P=0.032;OR=0.324,95% CI:0.198~0.531,P=0.000;OR=0.441,95% CI:0.232~0.835,P=0.012)。E-cadherin异常表达者肿瘤分化程度低,更易出现淋巴结转移,肿瘤分期偏晚。结论: E-cadherin在鼻咽癌组织中存在异常表达。E-cadherin可以作为鼻咽癌患者分化程度、淋巴结转移及临床分期的判断指标,值得进一步深入研究。

目的: 研究酒石酸长春瑞滨脂质微球注射液(NVB-lip)对荷人乳腺癌裸鼠肿瘤生长的影响。方法: 35只雌性BALB/c-nu裸鼠,随机分为NVB-lip高(10 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(2.5 mg/kg)剂量组,阳性对照组(酒石酸长春瑞滨注射液,5 mg/kg)和阴性对照组(脂质化空白溶液),每组7只。给裸鼠接种人乳腺癌BCAP-37瘤株,待成瘤后,每只动物每次按0.20 mL经尾静脉注射给药,间隔3~4 d注射1次,每周注射2次,共注射6次。在第1次注射后第4、7、11、14、18和23天时分别称小鼠体质量和测量肿瘤体积,计算得出相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率和肿瘤抑制率。结果: 与阴性对照组相比,各组荷瘤裸鼠体质量差异均无统计学意义(P均>0.05)。NVB-lip各剂量组的相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率显著减小,肿瘤抑制率显著增大,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论: NVB-lip在2.5~10 mg/kg范围内抑瘤作用明显,具有可开发潜力。

目的: 探讨miR-338基因簇在食管癌组织中的表达模式及其与食管癌发病风险的关系。方法: 选取86例经病理确诊的食管癌患者,分别提取食管癌和癌旁组织总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测hsa-miR-338-3p、hsa-miR-338-5p与hsa-miR-657的表达,应用配对样本t检验分析癌和癌旁组织中miRNA表达差异,Pearson相关分析检验基因簇各miRNA表达的相关性,logistic回归分析miRNA异常表达对食管癌发病风险的影响。结果: hsa-miR-338-3p与hsa-miR-338-5p在食管癌组织中的表达均较癌旁组织降低(P均<0.05),hsa-miR-657在食管癌和癌旁组织中表达的差异无统计学意义(P>0.05),hsa-miR-338-3p与hsa-miR-338-5p表达显著相关(r=0.754,P<0.05),hsa-miR-338-5p的低表达增加了食管癌的发病风险(OR=1.264,P<0.05),可能是食管癌的危险因素。结论: miR-338基因簇可能抑制了食管癌的发生,hsa-miR-338-5p可能成为食管癌诊断的潜在标志物。

目的: 探讨干细胞相关因子Notch3在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂化疗敏感性中的作用。方法: 用Lipofectamine 2000试剂转染乳腺癌MDA-MB-231细胞并用G418筛选稳定转染细胞系,根据转染质粒不同分为MDA-MB-231-PCLE组(对照组)和MDA-MB-231-N3ICD组(过表达Notch3组),应用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测不同组间Notch3表达的差异;用CCK8法检测各组MDA-MB-231细胞对顺铂敏感性的差异;同时利用Lipofectamine 2000转染Notch3的小干扰序列,根据转染序列不同分为T47D-NC(对照组)和T47D-siNotch3(Notch3敲减组);采用免疫印迹检测Notch3表达改变后凋亡相关因子caspase-3的表达情况。结果: 与对照组比较,高表达Notch3后三阴性乳腺癌对顺铂的敏感性增加(P<0.05),同时caspase-3的表达随着Notch3的增加而增加,而在高表达Notch3的乳腺癌T47D细胞中,敲减Notch3的表达使caspase-3表达减少。结论: 高表达Notch3可以增加三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂的敏感性,从而增强患者化疗疗效。

目的: 探讨二亚硝基哌嗪(DNP)通过调控AGR2表达参与鼻咽癌转移的分子机制。方法: 以具有低转移潜能的鼻咽癌细胞6-10B作为研究材科,应用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度;分别采用间接免疫荧光法、Western blot和实时荧光定量PCR法检测DNP对6-10B细胞中AGR2蛋白及mRNA表达的影响;采用针对AGR2基因的特异性小干扰RNA(siRNA)沉默6-10B细胞AGR2的表达,并用Transwell小室法检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响。结果: MTT法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度为0~10.0 μmol/L;8.0 μmol/L DNP处理6-10B细胞后,间接免疫荧光法检测发现AGR2蛋白表达明显上调,且以在细胞质中表达为主;不同浓度的DNP处理6-10B细胞24 h或用8.0 μmol/L的DNP处理6-10B细胞不同时间后,Western blot结果发现AGR2蛋白的表达水平增加且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);siRNA-AGR2沉默6-10B细胞屮AGR2基因的表达后,DNP诱导6-10B细胞的侵袭及迁移能力较干扰前明显降低(P<0.05)。结论: DNP可能通过在转录水平上调AGR2的表达,影响鼻咽癌细胞的侵袭和转移能力。

目的: 探讨缝隙连接蛋白beta2(GJB2)基因rs2274083、rs2274084和rs72474224位点多态性与汉族人群职业噪声性听力损失易感性之间的关系。方法: 应用1:1病例-对照研究,病例组177例为电测听结果双耳高频平均听阈≥40 dB的在岗工人,对照组177例为年龄、性别、作业工龄与病例组相匹配,并且电测听结果双耳高频平均听阈<25 dB的同岗位轮班工人。采用PCR扩增177对样本目的基因片段,对目的基因片段进行测序,确定待研究位点的基因型。结果: GJB2基因的rs2274084位点C、T等位基因频率在病例组和对照组中分布分别为73.73%、26.27%和63.84%、36.16%,其中CC、TC、TT基因型在病例组和对照组中的分布分别为55.37%、36.72%、7.91%和40.11%、47.46%、12.43%。该位点的基因型频率与等位基因频率在病例与对照组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。rs2274083和rs72474224位点基因型分布在病例与对照组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论: GJB2 rs2274084可能是汉族人群职业噪声性听力损失的易感基因位点,携带C等位基因的工人,暴露职业噪声时更易发生听力损失。

目的: 比较3种不同培养条件下原代小鼠肝细胞的形态以及肝细胞功能,寻找适合于原代小鼠肝细胞体外培养的培养基配方。方法: 采用改良Seglen两步胶原酶灌注法分离原代小鼠肝细胞,糖原染色观察细胞纯度,在贴壁4 h后用基础培养基、基础培养基加DMSO(DMSO组)、基础培养基加DMSO和EGF(DMSO+EGF组)等3种不同的条件培养肝细胞。镜下观察肝细胞形态,用MTT法检测细胞活力,生化分析仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平以及用ELISA法检测细胞培养上清液中白蛋白水平。结果: 成功分离小鼠原代肝细胞,肝细胞纯度达95%以上;原代肝细胞培养至96 h时,DMSO组仍能较好地维持细胞形态,基础培养基组的细胞活力比DMSO组和DMSO+EGF组分别降低了66.87%和67.16%(P<0.05),且基础培养基组的LDH水平均高于DMSO组和DMSO+EGF组(P<0.05)。此外DMSO组在96 h时仍能维持较高水平的白蛋白分泌,比基础培养基组和DMSO+EGF组分别增加了185%和24.2% (P<0.05)。结论: 小鼠原代肝细胞培养基中加入DMSO对于维持肝细胞的形态和功能有促进作用,本研究为体外原代肝细胞培养模型的建立和优化提供了实用的方法。

目的: 建立一种稳定、简便的人卵母细胞染色体荧光原位杂交技术,为揭示母方减数分裂错误及其发生原因、探讨非整倍性发生机制、评价外环境因素对人卵母细胞的遗传学效应提供有力工具。方法: 经签订知情同意书后,取体外受精术后废弃的人卵母细胞,经低渗、渐进固定处理、制备人卵母细胞染色体核型。应用人16号染色体着丝粒荧光探针,经变性处理后与人卵母细胞核型进行荧光原位杂交,再经洗脱和染色等步骤,在荧光显微镜下分析。结果: 经过上百批次重复实验,人卵母细胞染色体形态与分散良好,荧光信号明亮清晰、背景干净。结论: 成功建立人卵母细胞染色体荧光原位杂交技术。

目的: 探讨中国人群中X射线交叉互补修复基因1(XRCC1)的194位点(Arg194Trp)多态性与结直肠癌(CRC)易感性的关系。方法: 检索万方数据知识服务平台、中国生物医学数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)、PubMed、EBASE等数据库,获取有关XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性关系的文献,应用Meta分析软件Review Manager 5.1对最终纳入的文献进行综合定量评价,并进行异质性分析、敏感性分析、发表偏倚分析及亚组分析。结果: 经过筛选最终纳入10个研究。Meta分析结果示纯合子模型的合并OR=1.40,95%CI(1.13~1.73),P=0.002;显性模型的合并OR=1.22,95%CI(1.01~1.47),P=0.04;隐性模型的合并OR=1.30,95%CI(1.06~1.60),P=0.01;杂合子模型的合并OR=1.19,95%CI(1.00~1.42),P=0.05。在亚组分析中,病例组吸烟者和对照组吸烟者的OR=1.04,95%CI(0.84~1.29),P=0.72;病例组饮酒者和对照组饮酒者的OR=1.08,95%CI(0.81~1.44),P=0.60。结论: XRCC1 Arg194Trp位点多态性和结直肠癌易感性有关系,在纯合子模型、显性模型及隐性模型中携带194Trp基因型个体发生结直肠癌的危险性会增加,吸烟、饮酒与结直肠癌发病率无明显关联。

目的: 利用蚕豆根尖细胞微核技术对核设施周围水域的水质污染情况进行检测。方法: 分别于芙蓉溪桥河水、涪江河水、安昌河水等7个位点进行水样采集,以采集水样直接处理蚕豆根尖,测定各采样点水样的蚕豆根尖微核率(MNF)及污染指数(PI)和放射性水平,并进行了统计分析。结果: 各采样点放射性污染水平均低于国家标准限值,但各采样点的MNF有显著差异,7个采样点中有5个采样点的PI在2以上,和对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论: 核设施周围水域污染主要是由两岸工业、生活和垃圾等排污引起,核设施运行所产生的放射性流出物对公众和环境的影响轻微。

目的: 分析广州市非缺失型α-地中海贫血(α-地贫)的临床特征、基因突变类型及构成比,为临床遗传咨询提供依据。方法: 259例受检者均进行血液常规和高效液相色谱分析(HPLC),筛查阳性者采用跨越断裂点PCR(Gap-PCR)和PCR结合反向杂交(PCR-RDB)技术进行α-地贫基因分析。夫妇为同型α-地贫携带者进一步行胎儿α-地贫基因诊断,产后随防。结果: 259例受检者中,αα^QS/αα 170例、αα^WS/αα 43例、αα^CS/αα 34例、——^SEA/αα^QS 6例、——^SEA/αα^CS 4例、-α^3.7/αα^QS 1例、-α^4.2/αα^QS 1例。同性别的患者3种非缺失型α-地贫红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)比较差异有统计学意义(P<0.05),而血红蛋白(HGB)比较差异无统计学意义(P>0.05)。经产前基因诊断检出非缺失型HbH(——^SEA/αα^T)病胎儿5例,胎儿引产后留脐血进行复核,均与产前基因诊断结果一致。结论: 广州市非缺失型α-地贫发生率高,以αα^QS/αα最常见,对疑似非缺失型α-地贫携带者进行基因检测,可显著降低非缺失型HbH病患儿的发生率。

目的: 了解2011-2014年深圳市贝类产品的生物毒素污染状况。方法: 采集2011-2014年深圳市6个区386份23种贝类样品。依据相关标准用酶联免疫法(ELISA)检测了样品的麻痹性贝类毒素(PSP)、腹泻性贝类毒素(DSP)、神经性贝类毒素(NSP)和遗忘性贝类毒素(ASP)水平。结果: 386份样品的毒素超标率为20.21%(78/386),其中PSP超标率3.11%(12/386),DSP超标率18.13% (70/386),未检出NSP和ASP超标样。23种贝类中,有16种DSP超标,3种PSP超标。DSP超标以花蚧、毛蚶、生蚝等贝类最为严重,而PSP超标以圆贝最为突出。结论: 近年来深圳市贝类产品存在DSP和PSP污染,应加强卫生监管,确保消费者食用安全。

食管鳞状细胞癌(ESCC)是一种常见且预后较差的恶性肿瘤,其发病机制尚未完全明确。建立ESCC模型,研究ESCC发病机制,对于降低ESCC的发病率和病死率具有重要意义。4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)是一种肿瘤诱导剂,已广泛用于口腔癌的研究,而在ESCC研究中的应用还较少。因此,本文就4NQO体内代谢特点、诱导ESCC模型及诱癌机制的相关文献进行综述,以期为食管癌的防治提供一些新的研究线索。

蛋白磷酸酶2A(PP2A)是真核细胞内广泛表达的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶家族的主要成员,参与细胞周期、增殖分化及凋亡等过程中信号通路的去磷酸化调控。研究表明,PP2A不同亚基表达调控与人群肿瘤风险存在关联性;PP2A与细胞周期相关激酶相互作用,二者调控平衡的研究有助于致癌机制的探讨和靶向PP2A抗肿瘤作用的探索。本文对PP2A调控细胞周期的研究进行综述,着重阐述PP2A-B亚基经由细胞周期因子依赖性激酶1(CDK1)调控细胞周期发挥抑癌作用的机制,为肿瘤的化学预防和靶向干预提供理论依据。

大量基础和临床研究表明,由生物、物理、化学因素以及自身免疫疾病导致的炎症反应与肿瘤的发病密切相关。流行病学资料也证实炎症与肿瘤之间存在明显关联性,是导致肿瘤的重要危险因素。氧化应激与炎症紧密相连,炎症可导致氧化应激,氧化应激亦可引发炎症。在致癌因素和致炎因素刺激下,机体会生成大量活性氧(ROS),如果无法及时清除,便可能造成周围组织细胞的DNA损伤和恶性转化。本文阐述了ROS参与调控慢性炎症诱发肿瘤的可能机制及最新研究进展,以期为肿瘤的预防和治疗提供新的思路。