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当期目录

2017年 第29卷 第5期 刊出日期:2017-09-30
论著
阿魏酸对人脐静脉血管内皮细胞辐射损伤的保护作用及其机制
邵帅, 田梅, 刘建香, 苟巧, 齐雪松, 苏旭
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  325-328.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.001
摘要 ( 1014 )   PDF (1666KB) ( 620 )  
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目的:研究阿魏酸对电离辐射所致人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用,及其对辐射敏感蛋白Thbd和γH2AX的影响,探讨阿魏酸的抗辐射作用与机制。方法:以4~16 Gy的60Co γ射线照射HUVEC细胞,照后48 h以MTS法检测细胞活力,探索适宜照射剂量。以10 Gy γ射线照射HUVEC细胞,分别于照射后1、3、6、12、24和48 h提取细胞总蛋白,蛋白质印迹法检测蛋白Thbd和γH2AX的表达水平。并于照射前2 h,预防性给予细胞0.001~1 μmol/L的阿魏酸,照后48 h检测细胞活力、Thbd和γH2AX蛋白表达水平的改变。结果:与未照射组(0 Gy)比较,HUVEC受到10 Gy γ射线照射后48 h,细胞活力约降低30%(P < 0.05)。以此剂量照射,照后1 h Thbd约降至正常水平的0.6(P < 0.05),照射后48 h γH2AX约升高至正常水平的5倍(P < 0.05)。与照射对照组比较,0.1和1 μmol/L 的阿魏酸作用后,受照HUVEC的细胞活力提高(P < 0.05),Thbd蛋白表达升高(P < 0.05),γH2AX蛋白表达降低(P < 0.05)。结论:0.1~1 μmol/L的阿魏酸可调节10 Gy γ射线照射后HUVEC的Thbd和γH2AX蛋白的表达水平,从而促进HUVEC增殖,提高其细胞活力,发挥抗辐射作用。
慢病毒介导的TPX2基因沉默对人宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和细胞周期的影响及机制
宋淑芳, 常海平, 杨彩容, 赵荣伟, 张龙, 任杰, 郑健
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  329-334,339.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.002
摘要 ( 1016 )   PDF (2280KB) ( 613 )  
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目的:研究慢病毒介导的TPX2基因沉默对人宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和细胞周期的影响及其机制。方法:构建4种靶向TPX2基因的慢病毒表达载体(LV-TPX2-shRNA-1/2/3/4),同时构建阴性对照质粒,将5种质粒分别转染到293T细胞中制备慢病毒。慢病毒感染宫颈癌HeLa细胞后,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测TPX2 mRNA和蛋白的沉默效果。选择沉默效果最佳的重组慢病毒进行后续功能实验。分别采用CCK-8法、Transwell迁移实验及流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移及细胞周期分布情况。Western blot检测TPX2-shRNA转染前后Ki-67、cyclin B2、Aurora-A及P53的表达。结果:与对照组比较,构建的靶向TPX2基因的RNA干扰慢病毒载体均可持续稳定的抑制HeLa细胞TPX2基因的表达,尤其以LV-TPX2-shRNA-1最为明显(P < 0.01),故选择LV-TPX2-shRNA-1进行后续实验。与对照组比较,沉默TPX2基因的表达能降低HeLa细胞增殖及迁移能力(P < 0.05),使G2及S期细胞比例明显增加(P < 0.05),且上调P53蛋白的表达水平,下调Ki-67、cyclin B2及Aurora-A蛋白的表达水平(P均 < 0.05)。结论:沉默TPX2基因蛋白表达能抑制宫颈癌细胞的增殖及迁移能力,可能与其改变细胞周期分布及下调Ki-67、cyclin B2、Aurora-A蛋白表达水平,上调P53蛋白表达水平有关。
组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合紫杉醇抑制宫颈癌细胞增殖的体外实验
刘好, 赵滢滢, 金平, 许改霞, 郭宇然, 张可, 王晓梅, 张蕾
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  335-339.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.003
摘要 ( 915 )   PDF (1839KB) ( 610 )  
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目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制效果及其机制。方法:设置空白对照组、紫杉醇(10 nmol/L)、SAHA(10 μmol/L)、紫杉醇(10 nmol/L)+SAHA(10 μmol/L)联合组,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各组HeLa细胞的生长抑制率,计算紫杉醇对HeLa细胞的IC50。RT-PCR法检测各组HeLa细胞中抑癌基因p27 mRNA的相对表达,Western blot检测HeLa细胞乙酰化组蛋白H4(Ac-H4)的表达。结果:紫杉醇、SAHA、紫杉醇+SAHA联合组处理HeLa细胞24 h的相对抑制率分别为25.93%±5.32%、46.38%±3.66%、54.27%±4.02%,联合组抑制率与紫杉醇组相比明显升高,差异具有统计学意义(P < 0.01);48 h的抑制率分别为29.12%±3.09%、65.26%±3.03%、77.02%±3.86%,联合组抑制率最强,显著高于SAHA组和紫杉醇组(P < 0.01)。经SAHA预处理后紫杉醇对HeLa细胞的IC50较单独紫杉醇组均显著下降(P < 0.05或P < 0.01)。紫杉醇组、SAHA组、紫杉醇+SAHA联合组细胞中p27 mRNA的相对表达量分别为5.845±0.548、0.978±0.117和10.601±0.673,乙酰化组蛋白H4(Ac-H4)的相对表达分别为0.878±0.068、1.148±0.018、1.282±0.033,联合组中表达量均显著高于SAHA组和紫杉醇组(P均 < 0.01)。结论:SAHA联合紫杉醇在体外能显著抑制宫颈癌细胞HeLa的增殖,增强组蛋白乙酰化水平,诱导抑癌基因的表达。
甲醛对人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关Bip和CANX mRNA及蛋白表达水平的影响
张超, 白剑英, 王东新, 闫丹丹, 王盼, 刘艳飞
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  340-345,351.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.004
摘要 ( 1043 )   PDF (3402KB) ( 797 )  
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目的:研究甲醛(FA)染毒是否会诱导人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关基因BipCANX mRNA和蛋白表达水平的改变,引起内质网应激反应。方法:用Hoechst 33258进行核染色,以观察不同浓度(0、0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L)FA分别染毒肝细胞株24和48 h 后的细胞核形态学变化。再分别用0.004、0.02、0.1 mmol/L的FA处理人肝癌细胞株HepG2细胞24 h和48 h后,采用荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测内质网应激相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)及钙连蛋白(CANX) mRNA和蛋白的表达水平。结果:Hoechst 33258染色结果表明,染毒24和48 h后,0.5、2.5、12.5 mmol/L FA 组出现大量核呈固缩状态或颗粒状荧光死亡细胞,阴性对照组和0.1 mmol/L及以下剂量组细胞核荧光染色较浅,细胞核未固缩,故后续试验采用0.1 mmol/L及以下剂量。经0.004、0.02和0.1 mmol/L FA处理细胞24和48 h后,qPCR检测结果显示,甲醛各剂量染毒组Bip和CANX的mRNA表达量与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果表明,染毒24 h,不同剂量甲醛处理组与阴性对照组相比,Bip和CANX蛋白表达量均无显著差异(P>0.05);染毒48 h,与阴性对照组相比,各FA处理组Bip蛋白表达量升高,0.02和0.1 mmol/L FA处理组CANX蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P < 0.05)。结论:甲醛染毒可诱导HepG2细胞内质网应激相关蛋白Bip和CANX表达水平升高,引起肝细胞发生内质网应激反应。
阿胶对人工细颗粒物所致大鼠呼吸系统损伤的保护作用
张飘飘, 凌亚豪, 阎晓丹, 魏金锋, 靳洪涛, 王爱平
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  346-351.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.005
摘要 ( 937 )   PDF (2215KB) ( 695 )  
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目的:探讨阿胶对人工细颗粒物(aPM2.5)所致大鼠呼吸系统损伤的保护作用及其机制。方法:SD大鼠96只,雌雄各半,随机分为对照组、模型组、阿胶低剂量组(0.3 g/kg)、阿胶高剂量组(1.2 g/kg)。模型组和阿胶组大鼠口鼻吸入(3.68±0.41) mg/L的aPM2.5,每天1次,每次15 min,连续8周,对照组吸入清洁空气。阿胶组于吸入aPM2.5前1 h灌胃给予阿胶,模型组和对照组灌胃饮用水。试验期间每两周采用EMKA动物肺功能监测系统测定大鼠肺功能,分别于染毒后第2、4、8周各取8只大鼠,采血并收集血清、肺泡灌洗液和肺组织,检测血清和肺泡灌洗液氧化损伤相关指标的变化,进行肺泡灌洗液白细胞计数及肺脏组织病理学检查。结果:与对照组相比,模型组大鼠潮气流量(TV)、呼气量(EV)、分时输出量(MV)等容量指标均显著降低(P均 < 0.05),吸气时间(Ti)、呼气时间(Te)、弛豫时间(RT)等时间指标显著均升高(P均 < 0.05);与模型组相比,阿胶可显著抑制aPM2.5所致大鼠TV、EV、MV的降低及Ti、Te、RT的升高(P < 0.05)。染毒后第8周,模型组与对照组比较大鼠肺巨噬细胞增多,阿胶高剂量组肺巨噬细胞较模型组轻度降低。与对照组相比,模型组大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中丙二醛(MDA)含量升高,而阿胶可抑制MDA含量的增加。与对照组相比,模型组大鼠的血清和BALF中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性有所降低,阿胶可升高GSH-Px的活性。结论:阿胶可改善aPM2.5造成的大鼠呼吸功能降低,抑制肺巨噬细胞的增多,该作用可能与其抑制aPM2.5所致氧化损伤有关,确切机制需要进一步深入研究。
利用CRISPR/Cas9技术构建CYP2E1基因敲除的HEK293FT细胞系
范启明, 李若碧, 王飞, 郭涛, 王婷, 李道传, 邢秀梅, 陈丽萍, 陈雯, 王庆
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  352-357,363.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.006
摘要 ( 1007 )   PDF (2535KB) ( 735 )  
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目的:利用CRISPR/Cas9系统在HEK293FT细胞系中敲除CYP2E1基因并探讨其在检测化学物毒性中的应用。方法:设计3对分别靶向CYP2E1基因第2、第3和第7外显子的sgRNA序列并构建PX461表达载体;将携带靶向CYP2E1的sgRNA表达载体转染至HEK293FT细胞中,通过SURVEYOR检测分析sgRNA的切割效率;利用有限稀释法获得CYP2E1敲除细胞株,通过实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测细胞株中CYP2E1的敲除效果;并检测其对N-(4-羟基苯基)乙酰胺和1,2-二氯乙烷的细胞毒性效应的影响。结果:SURVEYOR检测分析靶向CYP2E1基因第3外显子的sgRNA的切割效率为23%;成功构建了2株CYP2E1基因敲除的细胞株,实时荧光定量PCR结果显示CYP2E1 mRNA表达下降,蛋白印迹结果显示CYP2E1蛋白无表达;CYP2E1基因敲除会显著降低N-(4-羟基苯基)乙酰胺和1,2-二氯乙烷的细胞毒性。结论:通过CRISPR/Cas9构建出CYP2E1稳定敲除的肾细胞系,为研究CYP2E1的功能和作用机制提供了有效的工具。
热休克蛋白HDJ1 影响肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的研究
李雨轩, 李凯, 张彤彤, 郭元彪, 殷俊, 包勇
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  358-363.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.007
摘要 ( 867 )   PDF (2825KB) ( 478 )  
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目的:研究热休克蛋白HDJ1在人肺腺癌组织、肺腺癌细胞株以及正常肺上皮细胞株中的表达情况,探讨HDJ1对肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:采用免疫组织化学法检测HDJ1在人肺腺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况;Western blot检测HDJ1在人肺腺癌细胞A549、H1299、H292及正常肺上皮细胞Bease-2B中的表达情况;使用pMagic 7.1-HDJ1-KD慢病毒转染A549细胞构建HDJ1稳定下调表达的细胞模型,并通过划痕实验、Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果:HDJ1在人肺腺癌组织中呈高表达;HDJ1在A549细胞中呈高表达;细胞划痕实验结果显示,与对照组细胞比较,HDJ1表达下调的A549细胞迁移率下降(P < 0.05);Transwell实验结果表明,相对于对照组细胞,HDJI表达下调的A549细胞在侵袭和迁移实验中的穿膜细胞数均减少(P < 0.05)。结论:HDJ1在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达,并促进肺腺癌细胞的侵袭和迁移能力。
异欧前胡素对体外人表皮黑素细胞酪氨酸酶和β-肌动蛋白表达的调节作用
詹标, 孙贝蕾, 罗思聪, 庄鸿凯, 黄鹏洲, 曾懿, 陈玮芳, 陈玮莹
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  364-369.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.008
摘要 ( 925 )   PDF (1959KB) ( 689 )  
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目的:研究异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和β-actin蛋白表达的影响。方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞,随机分为对照组和异欧前胡素实验组。对照组用M-254培养基培养,实验组加入含25 μmol/L异欧前胡素的M-254 培养基,培养48 h。倒置显微镜下观察人表皮黑素细胞形态,NaOH裂解法检测黑素含量的变化,采用实时荧光定量PCR方法、Western blot方法、免疫荧光法检测酪氨酸酶和β-actin在黑素细胞中的表达及其变化。结果:异欧前胡素作用48 h后,与对照组黑素细胞比较,实验组黑素细胞的树状突起变长,黑素含量减少(P < 0.01);实时荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光法检测结果表明,与对照组相比,实验组黑素细胞酪氨酸酶mRNA及其蛋白的表达降低(P均 < 0.05),β-actin mRNA及其蛋白的表达增加(P均 < 0.05)。结论:25 μmol/L异欧前胡素抑制体外培养人表皮黑素细胞酪氨酸酶mRNA及其蛋白的表达,促进β-actin mRNA及其蛋白的表达,从而降低体外人表皮黑素细胞黑素的含量。
睡莲花烟花苷对半乳糖胺致小鼠急性肝损伤的保护作用
马俊飞, 张石蕾, 吕梅霞, 王浩培, 成晅, 由淑萍, 赵军, 刘涛
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  370-373,378.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.009
摘要 ( 944 )   PDF (2104KB) ( 442 )  
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目的:研究睡莲花烟花苷对D-半乳糖胺(D-Gal)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将60只昆明小鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照联苯双酯组,烟花苷(25、50和100 mg/kg)给药组,共6组,每组10只。阳性对照联苯双酯组和烟花苷给药组按10 mL/kg每日灌胃给药1次,正常组和模型组每日灌胃等体积蒸馏水,连续灌胃7 d,末次给药1 h后,正常组小鼠腹腔注射生理盐水0.02 mL/g,其他各组腹腔注射D-Gal(800 mg/kg,按0.02 mL/g)造模。造模8 h后摘眼球取血,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白细胞介素IL-1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)水平。颈椎脱臼处死小鼠,摘取肝脏、脾脏称取质量,计算脏器系数,取0.3 g肝组织制备匀浆,检测肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)及一氧化氮(NO)含量。并取肝左叶距边缘0.5 cm处小块组织,进行肝组织病理学检查。结果:与模型组比较,烟花苷在(50、100 mg/kg)剂量时,小鼠血清ALT和AST水平均显著降低(P均 < 0.01),血清中促炎因子IL-1、IL-6、TNF-α和INF-γ水平降低(P < 0.05);肝脏、脾脏系数降低(P < 0.05),肝匀浆中SOD和GSH活力均显著升高(P均 < 0.05),MDA和NO含量均显著降低(P均 < 0.05);肝病理检查结果显示与模型组比较,烟花苷各剂量组肝细胞损伤程度明显减轻,炎性细胞浸润显著减少,其中烟花苷50和100 mg/kg组较25 mg/kg组受损程度较轻、修复情况较好。结论:烟花苷对D-Gal致小鼠急性肝损伤具有保护作用,其作用与促进抗氧化酶、抑制促炎因子的表达有关。
纳米二氧化硅经鼻黏膜染毒对大鼠睾丸毒性的机制研究
崔胜金, 陈泽衍, 曹朝鹏, 黄荣, 刘青, 周义文
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  374-378.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.010
摘要 ( 754 )   PDF (2669KB) ( 446 )  
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目的:利用蛋白质组学技术研究纳米二氧化硅颗粒对SD雄性大鼠生殖系统的损伤机制,为深入了解纳米材料的毒性效应及机制提供科学依据。方法:采用鼻腔滴入纳米二氧化硅分散液方式对SD雄性大鼠进行染毒,设置为纳米二氧化硅组;同时经鼻腔滴入生理盐水设置为生理盐水对照组。两组于4周后断颈处死并取睾丸组织。利用荧光差异双向电泳(2D-DIGE)联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术筛选并鉴定出差异表达蛋白,Western blot验证差异蛋白。结果:共筛选并鉴定出9个差异表达的蛋白,分别是GRP78、HSP7C、KNT1、HSP72、ALBU、STIP1、PDIA1、ALDR和GDIR1;并经Western blot验证了PDIA1和HSC70表达水平变化与2D-DIGE实验结果一致。结论:本研究发现纳米二氧化硅作用后大鼠睾丸组织中凋亡相关蛋白PDIA1和HSC70发生异常变化,初步阐明了二氧化硅染毒导致大鼠生殖毒性的细胞凋亡分子机制,为预防纳米二氧化硅毒性奠定基础。
PM2.5对斑马鱼胚胎发育早期氧化应激和DNA甲基化调控相关基因表达的影响
吴德生, 杨飞, 袁建辉, 杨淋清, 黄海燕, 刘建军, 庄志雄
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  379-382.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.011
摘要 ( 783 )   PDF (1788KB) ( 543 )  
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目的:探讨细颗粒物(PM2.5)暴露后,斑马鱼胚胎发育过程中氧化应激和DNA甲基化基因表达的改变。方法:使用大功率大气PM2.5采样器收集PM2.5样品,超声后冷冻提取PM2.5,分别以0、5、20 μg/mL的浓度作用于斑马鱼胚胎。在暴露后2、6、24、48 h提取胚胎RNA,用荧光定量PCR法检测氧化应激相关基因超氧化物歧化酶1(sod1)和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(ogg1)以及DNA甲基化相关基因DNA羟化酶1(tet1)、DNA甲基转移酶(dnmt1) mRNA的表达。结果:斑马鱼胚胎暴露于0、5、20 μg/mL的PM2.5后2~6 h,sod1tet1dnmt1的mRNA相对表达量均随着剂量升高而明显升高,呈剂量-效应关系(r依次=0.98、0.98、0.99,P均 < 0.05);PM2.5暴露后2~6 h ogg1的mRNA相对表达量在5 μg/mL剂量组显著升高(P < 0.05)。而PM2.5暴露后24~48 h,sod1ogg1tet1dnmt1的mRNA相对表达量相对2~6 h均明显下降(P < 0.05)。结论:PM2.5对斑马鱼胚胎的氧化应激相关基因sod1ogg1以及DNA甲基化相关基因tet1dnmt1的mRNA表达均有影响。
苯并芘诱导肝脏的炎症损伤及EGFR的表达变化
邓燕霞, 古盼, 刘海龙, 郑凯, 刘建军, 黄新凤, 李习艺, 黄海燕
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  383-386.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.012
摘要 ( 834 )   PDF (2244KB) ( 502 )  
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目的:探讨苯并芘(BaP)长期暴露对大鼠肝脏的炎症损伤及表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化。方法:选择6周龄雌性SPF级SD大鼠36只,将其随机分为染毒组和对照组,每组18只,染毒组胸腔注射10 mg/mL的玉米油-苯并芘0.2 mL,对照组注射0.2 mL玉米油,每2周注射1次,共4次,连续观察1年,期间记录大鼠的生存状况和体质量变化,实验结束时收集大鼠肝脏组织,利用HE染色进行病理分析,同时采用免疫组化、免疫荧光和Western blot检测肝脏组织中EGFR蛋白的表达变化。结果:与对照组比较,染毒组实验期间大鼠体质量和生长未见明显异常;病理分析发现BaP作用后的大鼠肝脏出现了明显的碎片状坏死和炎性浸润;免疫组化、免疫荧光结果均显示染毒组大鼠肝脏内EGFR表达增强;Western blot检测发现,染毒组EGFR蛋白表达水平(0.915±0.253)较对照组(0.452±0.095)明显升高(P < 0.05)。结论:BaP诱导肝脏炎症的同时可激活EGFR高表达,推测BaP诱发的炎症与EGFR的表达密切相关。
技术与方法
流体动力学基因转染技术构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型
黄丹梅, 吴曼鹏, 黄晓华, 张莹, 倪仰鹏, 牛永东
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  387-389,393.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.013
摘要 ( 683 )   PDF (1709KB) ( 657 )  
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目的:构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型,为研究HBx在HBV感染相关原发性肝细胞癌发生中的分子机制奠定基础。方法:8只6~8周龄雄性CD-1小鼠,尾静脉注射真核表达质粒pcDNA-HBx及空载体pcDNA3.0,6~8 h处死小鼠并收集肝组织,抽提RNA及蛋白。RT-PCR和Western blot检测HBx表达情况;实时荧光定量PCR检测FXR靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达。结果:核酸和蛋白水平上,pcDNA-HBx注射组小鼠肝脏内均可检测到HBx的表达;空载体对照组肝组织中未检测到HBx的表达;肝组织中瞬时过表达的HBx可以有效调控FXR通路下游靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达。结论:成功实现了HBx在小鼠肝脏中的瞬时高表达,为今后整体水平上研究HBx提供了有效的动物模型。
人尿源性干细胞的原代培养
周明, 孙震晓
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  390-393.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.014
摘要 ( 849 )   PDF (1795KB) ( 638 )  
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目的:建立一种人尿源性干细胞(hUSCs)的原代分离培养及保存方法,为hUSCs的应用奠定基础。方法:取10例成人健康志愿者的尿液分别进行hUSCs原代培养,台盼蓝染色法比较不同冻存液配方复苏后的细胞存活率,进而确定hUSCs的最佳冻存液配方;采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测hUSCs细胞的增殖活性;流式细胞术测定间充质干细胞表面抗原CD44和CD90的表达情况。结果:10例健康成人志愿者中6例成功提取了hUSCs并体外培养形成集落;台盼蓝染色法确定配比为DMSO∶FBS∶hUSCs培养基=1∶4∶5的冻存液细胞存活率最高,与其他组比较差异具有统计学意义(P < 0.05);MTT法检测显示hUSCs生长曲线呈S形且具有良好的增殖活性;流式细胞术鉴定干细胞表面抗原CD44和CD90呈阳性表达。结论:成功建立了一种人尿源性干细胞的原代分离培养及保存方法。
综述
宫颈癌辐射敏感性相关基因的研究进展
丁立新, 赵现哲, 姜晓燕, 丁库克
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  394-396,401.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.015
摘要 ( 629 )   PDF (1628KB) ( 644 )  
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宫颈癌治疗以手术切除辅以放化疗作为首选治疗方法,但是上述治疗手段创伤较大,不良反应也较严重,甚至可能剥夺年轻患者的生育功能。近年来随着分子生物学的发展,研究者试图从基因水平寻找对辐射敏感的放疗靶点,以最高效的杀灭肿瘤,同时最大限度地保护正常组织,从而提高放疗效果,减少放疗副作用。本文主要就宫颈癌辐射敏感性相关的多种基因及其表达产物展开综述,为研究放疗抵抗的分子机制,预测宫颈癌放射治疗预后效果奠定基础,并为肿瘤的放疗增敏治疗提供新思路。
CD10蛋白在肿瘤中的表达及其临床意义的研究进展
杨修远, 潘月龙
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  397-401.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.016
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CD10蛋白是一种细胞表面糖蛋白金属结合酶,具有中性肽链内切酶(NEP)的功能,表达于各种组织中且功能不尽相同。目前广泛应用于血液系统肿瘤和部分实体肿瘤的诊断和预后判断,CD10表达往往提示预后不良。本文简要综述CD10蛋白在实体肿瘤中的表达及其在预测肿瘤预后以及生物学行为中的临床意义等相关研究进展。
胆管癌干细胞标志的研究进展
王龙, 安慧蒙, 彭为, 王亚运, 张勇, 郑鹏飞, 程志斌
癌变·畸变·突变. 2017, 29(5):  402-405.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2017.05.017
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胆管癌是胆道系最常见的恶性肿瘤,目前治疗方式以手术为主,术后辅助化疗,但这类患者具有预后差、复发率高且易转移的特点。肿瘤干细胞学说认为肿瘤组织中存在一类具有多向分化、无限增殖能力的干细胞。这类干细胞为我们寻找某种治疗和抑制肿瘤细胞生长和增殖的方法提供了切入点,而研究、分离及鉴别这类干细胞需要特殊标志,本文就胆管癌干细胞增殖、分化和转移过程中出现的标志予以综述。