目的： 研究TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌脊髓转移株Ms(metastatic cells of mucoepidermoid carcinoma in spinal cord，MS)细胞生长及粘附的影响。 方法： 体外培养Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞，利用细胞计数法，克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化；同质粘附实验与异质粘附实验测定细胞的粘附率；考马斯亮蓝染色法检测细胞骨架的改变及免疫荧光法检测Ezrin蛋白的表达。 结果： 稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞和Ms细胞的群体倍增时间分别为30.8，28.8和29.0 h；平板克隆形成率分别为14.2％，24.5％和25.1％。Ms细胞转染了TGF-β1 shRNA后，30 min同质粘附率升高了18.6％；细胞在FN基质表面上1 h的粘附抑制率为35.3％。与未转染组、转染空载体组相比，转染TGF-β1 shRNA组细胞生长缓慢(P<0.05)，同质粘附能力增强(P<0.05)，异质粘附能力降低(P<0.05)，细胞骨架明显改变，Ezrin蛋白表达降低。 结论： TGF-β1 shRNA能影响Ms细胞在体外的生长和粘附能力，其机制可能与细胞骨架和Ezrin 蛋白表达的改变有关。

目的： 探讨BCR/ABL融合基因对抑癌基因PTEN介导的信号传导通路在K562细胞增殖和凋亡中的影响。 方法： 用不同浓度的格列卫(0.5、1、2、5、10 μg/ml)干预K562细胞不同时间，观察其对细胞增殖的影响。用1 μg/ml浓度的格列卫干预K562细胞不同时间(12、24、36、48、72 h)后，通过荧光定量PCR检测细胞BCR/ABL、PTEN、mTOR mRNA水平的变化，并分析它们之间的相互关系。Western blotting检测细胞Akt和p-Akt水平，分析BCR/ABL融合基因对PTEN mRNA表达的影响。 结果： 1 μg/ml格列卫作用K562细胞后随着BCR/ABL融合基因表达减低，PTEN mRNA表达上调，mTOR mRNA表达下调，p-Akt表达下调。48 h后随着BCR/ABL融合基因的抑制减弱，PTEN mRNA表达进而减低，而mTOR mRNA表达升高，p-Akt持续降低。BCR/ABL mRNA表达与PTEN mRNA表达呈负相关(r=－0.881, P<0.05)，与mTOR mRNA及p-Akt表达呈正相关(依次为r=0.961, r=0.879, P均<0.05)。 结论： BCR/ABL融合基因可以通过抑制PTEN基因表达，调控PI3K/Akt、mTOR信号传导通路，参与细胞增殖、凋亡及细胞周期调控等生物学特性。

目的： 研究煤焦沥青烟提取物对人肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)Nrf2、NQO1 mRNA及Nrf2蛋白表达的影响。 方法： 煤焦沥青烟提取物以0.00、1.25、2.50、5.00、10.00 μg/ml分别染毒BEAS-2B细胞24 h后，提取细胞总RNA和总蛋白。采用RT-PCR检测Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量，Western blot测定Nrf2蛋白相对表达量。 结果： 染毒组BEAS-2B细胞Nrf2 mRNA及蛋白相对表达量均低于对照组，差别均有统计学意义(P均<0.05)，在1.25～5.00 μg/ml浓度范围内，随着染毒浓度的增加，Nrf2 mRNA和蛋白表达呈递增趋势，而当染毒浓度为10.00 μg/ml时，Nrf2 mRNA和蛋白表达量均有所减少(P<0.05)。随着染毒浓度的增加，NQO1基因表达水平升高，在5.00、10.00 μg/ml时NQO1基因相对表达量比对照组高(P<0.05)。 结论： 在煤焦沥青烟提取物浓度较低时(1.25～5.00 μg/ml)，随染毒浓度增加Nrf2表达水平升高，可能上调NQO1基因的表达，增强BEAS-2B细胞氧化应激能力。

目的： 研究贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma，GCA)中分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled related protein 4, SFRP4)及SFRP5基因启动子区甲基化状态与贲门腺癌发生发展的关系。 方法： 采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR，MSP)方法检测94例GCA组织及47例相应癌旁正常组织中SFRP4和SFRP5基因的甲基化情况，并分析其与临床病理特征之间的关系。 结果： 94例GCA组织中SFRP4 基因甲基化率为68.1％(64/94)，显著高于癌旁正常组织中的甲基化发生率8.5％(4/47)(P<0.01)；SFRP5基因在贲门腺癌组织中的甲基化发生率为79.8％(75/94)，显著高于癌旁正常组织中的甲基化发生率12.8％(16/47)(P<0.01)。SFRP4基因在高、中分化腺癌组甲基化发生率为35％(14/40)，显著低于低分化腺癌组的发生率92.6％(50/54)(P<0.01)；SFRP4基因在无淋巴结转移组的甲基化发生率为60.5％(23/38)，低于有淋巴结转移组73.2％(41/56)，但其差异无统计学意义(P>0.05)。SFRP5基因在低分化腺癌组甲基化发生率为85.1％(46/54)，高于高、中分化腺癌组甲基化发生率72.5％(29/ 40)，但其差异无统计学意义(P>0.05)；SFRP5基因甲基化发生率在无淋巴结转移组为65.8％(25/38)，显著低于有淋巴结转移组89.3％(50/56)(P<0.05)。57例贲门腺癌组织中SFRP4和SFRP5基因同时发生甲基化者，高、中分化18例，低分化39例，两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论： SFRP4和SFRP5基因可能参与了贲门腺癌的发生，SFRP4, SFRP5基因的高甲基化状态与贲门腺癌的恶性行为有关。

目的： 观察木鳖子(cochinchina momordica seed，CMS)水提物(water extract of CMS, CMSWE)和醇提物(ethanol extract of CMS, CMSEE)对肿瘤细胞生长的影响, 探讨CMSEE的抗肿瘤机制。 方法： 制备CMSWE和CMSEE。MTT法检测CMSWE和CMSEE对人黑色素瘤B16、肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MDA-MB-231、食管癌细胞TE-13，以及正常人外周血淋巴细胞(PBMC)生长的影响，计算细胞生长抑制率；光镜下观察细胞形态变化；瑞氏-吉姆萨染色观察B16细胞凋亡形态学变化。流式细胞技术(FCM)检测B16细胞凋亡率和细胞周期分布。 结果： CMSEE(25～300 mg/L)对B16、A549、MDA-MB231和TE-13细胞增殖均有明显的抑制作用(P<0.01)，对PBMC的增殖没有明显影响。CMSWE(25～300 mg/L)对A549、TE-13、MDA-MB231、PBMC的生长没有明显影响，仅对B16细胞的增殖有较弱的抑制作用，且各浓度组抑制率均小于相同浓度的CMSEE(P<0.01)。经CMSEE处理后，B16细胞显示典型的凋亡形态变化，凋亡率明显增高(P<0.01)， G0/G1期细胞明显增加，S期、G2/M期细胞减少(P<0.01)。 结论： CMSEE体外对人肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用，其抗肿瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。

目的： 探讨联合应用选择性环氧合酶-2(cyclooxyenase-2，COX-2)抑制剂NS-398与奥曲肽对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法： 体外培养人结肠腺癌Lovo细胞，分别用 NS-398(100 μmol/L)和奥曲肽(1 μmol/L)单独及联合处理24、48和72 h后，采用MTT法检测细胞的增殖，透射电镜观察细胞凋亡形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期改变，RT-PCR检测COX-2基因的表达。 结果： NS-398和奥曲肽对Lovo肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用(P<0.05)，且存在时间依赖性，联合应用组抑制效应明显高于单一用药组(P<0.05)。透射电镜观察可见典型的细胞凋亡形态改变。NS-398联合奥曲肽诱导Lovo细胞的凋亡率明显高于单一用药组和对照组。细胞周期分析表明，与对照组比较，各处理组S期细胞比例降低，G0/G1期细胞比例增高(P<0.05)。各处理组均使Lovo细胞COX-2基因mRNA表达下调(P<0.05)。 结论： NS-398联合奥曲肽可协同抑制人结肠腺癌Lovo细胞增殖并诱导其凋亡，其机制可能与细胞周期阻滞和下调COX-2基因表达有关。

目的： 观察菊科植物中分离出的3种倍半萜化合物异土木香内酯、1-氧-乙酰大花旋覆花内酯和大花旋覆花内酯对体外培养的人子宫颈癌HeLa细胞、人子宫内膜癌HEC-1细胞、人卵巢透明细胞癌SHIN3及HOC-21细胞和人卵巢囊腺癌HAC-2细胞增殖的影响，研究这3种倍半萜化合物的体外抑制肿瘤细胞增殖作用及其结构与活性之间的构效关系，进而探讨3种倍半萜化合物的体外抑制肿瘤细胞增殖的可能机制。 方法： 以HeLa、HEC-1、SHIN3、HOC-21和HAC-2细胞为研究对象，利用四唑盐(MTT)比色法检测3种倍半萜化合物对上述5种妇科肿瘤细胞增殖的抑制作用；利用流式细胞术检测异土木香内脂对HeLa细胞凋亡的影响。 结果： 异土木香内酯对上述5种肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用，1-氧-乙酰大花旋覆花内酯和大花旋覆花内酯即使在100 μmol/L的高浓度下，对5种妇科肿瘤细胞的增殖不显示抑制活性；流式细胞学检查发现异土木香内脂处理后的HeLa细胞出现凋亡现象。 结论： 提示A-环开环可能是导致桉叶烷型倍半萜内酯的体外抑制肿瘤细胞增殖作用消失或减弱的原因；异土木香内酯抑制肿瘤细胞增殖作用有可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡机制而实现的。

目的： 在亚慢性染毒的条件下，研究甲醛对SD雌性大鼠卵巢储备功能的影响。 方法： 将40只SD雌性大鼠随机分为正常对照组和3个不同浓度(0.2、2.0、20.0 mg/kg)的甲醛染毒组。腹腔注射甲醛染毒，每天1次，连续染毒14 d，14 d后称体质量，并采用股动脉放血处死受试动物，取血清，用化学发光法测定血清雌二醇(E2)浓度；用酶联免疫方法测定抑制素B(inhibin B)浓度；用放射免疫方法测定卵泡刺激素(FSH)和黄体生成激素(LH)的浓度。并解剖摘取卵巢称重，计算脏器系数。 结果： 甲醛染毒组与对照组比较，各染毒剂量组大鼠血清E2、Inhibin B水平明显降低(P<0.05)，FSH水平显著升高(P<0.05)；高、中剂量组大鼠血清LH水平均有所升高，但差异无统计学意义(P>0.05)。各染毒剂量组卵巢脏器系数显著降低(P<0.05)。 结论： 在亚慢性染毒条件下，甲醛对SD雌性大鼠卵巢储备功能有一定损害作用。

目的： 研究碳离子辐照诱导淋巴细胞染色体畸变的时间和剂量效应。 方法： 以加速的碳离子为辐射源，吸收剂量分别为2、4 Gy的碳离子辐照人外周血淋巴细胞后，分别培养48、72、84 h后收集细胞，用姊妹染色单体区别染色法分析淋巴细胞第一次分裂中期染色体畸变，以研究畸变的时间效应；吸收剂量为0、0.5、1、2、3、4 Gy的碳离子辐照人外周血淋巴细胞后，培养48 h，用常规染色体技术研究碳离子辐照诱导淋巴细胞染色体畸变的剂量效应。 结果： 辐照后分别培养48、72和84 h得到的双着丝粒和着丝粒环畸变(“双＋环”畸变)频率没有明显差异；在0.5～4 Gy剂量范围内，“双＋环”畸变的量效关系符合线性关系：Y=0.000 5＋0.689D。 结论： 在本实验辐照条件下，碳离子辐射诱导淋巴细胞染色体畸变不存在时间效应，可以用48 h的培养时间来研究碳离子的生物学效应，并发现染色体“双＋环”畸变随剂量的增加而呈线性增加。

目的： 建立HIV-1 gag基因经卵母细胞垂直传递的模型，为HIV通过雌性生殖细胞垂直传递的研究奠定实验基础。 方法： 将含有HIV-1 gag基因的重组质粒pIRES2-EGFP-gag注射到小鼠双侧卵巢，转染生殖细胞。应用超排获得实验用卵母细胞，收集显示绿色荧光的卵母细胞，将一部分呈现绿色荧光的卵母细胞裂解，提取基因组DNA，采用PCR检测gag DNA是否存在卵母细胞中；再将另一部分带有绿色荧光的卵母细胞常规制备中期染色体片，用荧光原位杂交(FISH)技术检测HIV-1 gag基因在成熟卵母细胞染色体上的整合。 结果： 转染pIRES2-EGFP-gag后，在荧光显微镜下能够很清楚地看到带有绿色荧光的卵母细胞；PCR结果显示在带有绿色荧光的卵母细胞中可检测到HIV-1 gag 基因特异的阳性条带；FISH检测结果显示在卵母细胞的中期染色体上检测到HIV-1 gag DNA的阳性信号。 结论： HIV-1 gag基因能够通过卵透明带和细胞膜并整合到卵母细胞基因组内，本研究为HIV-1 gag基因可经过雌性生殖细胞垂直传递给子代奠定了实验基础。

目的： 探讨人精子穿去透明带金黄地鼠卵实验(SPA)和精子DNA完整性检测在体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)助孕中的应用价值。 方法： 选择兰州大学第一医院生殖医学研究中心，行IVF-ET助孕的不孕不育夫妇中的41名男性，根据不孕不育原因分为完全男方因素引起的不孕不育组(n=20)和完全女方因素引起的不孕不育组(n=21)，比较分析两组男方年龄、穿透率、受精指数、IVF受精率、DNA碎片率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎着床率及临床妊娠率的差别。 结果： 完全男方因素引起的不孕不育组和完全女方因素引起的不孕不育组之间，在男方年龄、IVF受精率、卵裂率、胚胎着床率、临床妊娠率等方面的差异均无统计学意义(P均>0.05)，在穿透率、受精指数、DNA碎片率方面的差异均具有统计学意义(P<0.05)；前者的SPA穿透率与IVF受精率、卵裂率和优质胚胎率之间均存在显著正相关(r=0.908，0.55，0.852，P均<0.05)，DNA碎片率与IVF受精率和优质胚胎率均存在显著负相关(r=－0.636，－0.634，P均<0.05)；后者SPA穿透率与IVF受精率、卵裂率和优质胚胎率之间均存在显著正相关(r=0.893，0.53，0.626，P均<0.05)，DNA碎片率与IVF受精率和优质胚胎率之间均存在显著负相关(r=－0.636，－0.634，P均<0.05)。 结论： SPA和精子DNA完整性检测在辅助生殖技术中可能具有一定的应用价值。

目的： 探讨微囊藻毒素LR(microcystin LR，MC-LR)抑制小鼠淋巴细胞免疫功能的可能机制。 方法： 分离小鼠脾淋巴细胞，分别用含MC-LR为0、1、3、5、10 μg/ml的培养液，染毒脾淋巴细胞，MTT法检测MC-LR对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响；ELISA法测定淋巴细胞IL-2的含量；FCM法检测淋巴细胞凋亡率。 结果： 各MC-LR剂量组淋巴细胞的增殖指数均下降；1 μg/ml MC-LR刺激淋巴细胞分泌IL-2，而5、10 μg/ml MC-LR组却抑制淋巴细胞分泌IL-2；10 μg/ml MC-LR组淋巴细胞凋亡率明显升高(P均<0.05)。 结论： 体外培养条件下，MC-LR能明显抑制小鼠脾淋巴细胞增殖，降低淋巴细胞因子IL-2的含量并诱导淋巴细胞凋亡。

目的： 探讨五味子提取物对CCl4中毒大鼠肝细胞超微结构的保护作用。 方法： Wistar大鼠25只，随机分为对照组、CCl4中毒24 h组及10 d组、五味子24 h组及10 d组，共5组，每组5只。CCl4中毒组大鼠用生理盐水(0.5 ml/100 g)灌胃3 d，对照组和治疗组大鼠用五味子提取液(0.5 ml/100 g)灌胃3 d后，中毒组和五味子组大鼠按0.2 ml/100 g体质量用量经腹腔一次性注射200 ml/L CCl4致毒，对照组大鼠腹腔注射同体积植物油。然后，五味子组每天按0.5 ml/100 g体质量用量给予五味子提取液灌胃，而对照组、中毒组以等量生理盐水灌胃。不同时间点处死大鼠，透射电镜下观察肝脏超微结构的改变。 结果： CCl4中毒24 h组大鼠肝组织超微结构发生改变，表现为胞质基质疏松、空泡化；肝细胞线粒体肿胀，嵴断裂或消失；内质网呈片层状；核膜皱缩、断裂，染色质边集于核膜下,CCl4中毒10 d组肝细胞核形态仍呈明显异型性。与CCl4中毒组大鼠相比较，五味子组大鼠肝细胞超微结构的病理性改变减轻。 结论： 五味子提取物对CCl4中毒大鼠肝细胞的超微结构具有保护作用。

背景与目的： 研究昆明周边生活区水体污染程度与致突变物质的关系。 材料与方法： 用蚕豆根尖细胞微核技术对各采样点水样进行监测，并对各水样进行化学需氧量(chemical oxygen demand，CODcr)的测定，统计分析各采样点水样的蚕豆根尖细胞微核千分率(MCN,‰)及污染指数(PI)。 结果： 各采样点水样的蚕豆根尖细胞微核率均高于对照组(P<0.01)，9个采样点中有7个采样点的污染指数(PI)在2以上，污染指数高的水样组细胞微核率也高。各水样CODcr测定结果未见明显规律。 结论： 水体污染程度与水体中存在致突变性物质多少相关，但是水质诱变活性与化学需氧量没有直接关系。

目的： 了解松塔球提取物的抑突变作用。 方法： 不同剂量(50、250和500 mg/kg)的松塔球碱性提取物溶液与环磷酰胺(50 mg/kg)联用，连续4 d腹腔注射昆明小鼠，取骨髓制片，计数含微核的骨骼嗜多染红细胞。 结果： 50 mg/kg松塔球提取物溶液和环磷酰胺联用时与环磷酰胺组比较微核率差异无统计学意义(P>0.05)；松塔球提取物250和500 mg/kg剂量与环磷酰胺联用组微核率明显低于环磷酰胺组(P<0.05)，其微核抑制率分别为22.35％、65.35％。雌性和雄性小鼠组间微核率差异无统计学意义(P>0.05)。 结论： 松塔球提取物可有效抑制环磷酰胺诱导的小鼠骨髓细胞微核的产生，并且存在明显的剂量-反应关系，具有抑突变性，提示松塔球提取物对肿瘤的防治可能具有积极的作用。

目的：研究复方消经痛胶囊的致突变性。 方法： 采用小鼠精子畸形试验、骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验，观察其致突变性。 结果： 复方消经痛胶囊的小鼠精子畸形试验，骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠染色体畸变试验结果均为阴性。 结论： 在本实验条件下，未发现复方消经痛胶囊的致突变性。

MicroRNA(miRNA)是一类具有调控功能的小分子非编码RNA，主要参与基因转录后水平的调控，对生物体的生长、发育、衰老和死亡等生命过程都有着重要的作用。近年来，大量研究结果表明，许多miRNA可作为原癌基因或者抑癌基因，在肿瘤的发生和发展中扮演着重要的角色，其中miR-21最受人重视。大量实验证明在多种肿瘤细胞中，miR-21的表达均出现显著异常，揭示miR-21作为一个致癌miRNA，在多种肿瘤的发生和发展中起着重要的作用。本文综述了miR-21在肿瘤细胞中调控的靶基因及其功能，以及miR-21自身的表达调控机制研究进展，这将为miR-21在肿瘤的诊断、治疗和预后判断中的应用提供重要资料。

蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A，PP2A)是真核生物体内广泛存在的Ser/Thr蛋白磷酸酶，调节细胞内多种生理过程。近年来的大量实验证据表明，PP2A的失调与多种肿瘤发生具有相关性，由此PP2A被认为是一个潜在的肿瘤抑制因子。本文从两方面介绍了PP2A在乳腺癌的发生、转移和乳腺癌辅助治疗中扮演的重要角色，包括：PP2A的自身突变以及PP2A与Akt信号通路、细胞粘附因子、雌激素受体、mTOR等乳腺癌相关因子的相互作用。

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4(p21-activated kinases 4, PAK4)，是生物学界新发现的一种蛋白因子，在细胞信号转导过程中起重要作用。研究发现PAK4与细胞凋亡、肿瘤发生、细胞骨架重建等关系密切。本文对PAK4与细胞骨架重组、抑制细胞凋亡及肿瘤形成转移等生物学特性作一综述。

骨骼是乳腺癌优先且最常见的转移部位之一。患者常先出现骨骼微转移(转移前龛影)，进而发展为明显的转移灶，这一过程有赖于骨微环境提供的生长支持和癌细胞对这一环境的适应能力。骨微环境可产生多种因子促进肿瘤细胞的生长和骨转移的进展，而癌细胞也经常模拟骨和骨髓环境的细胞行为和基因表达。对乳腺癌骨转移的特异性分子与机制的研究对乳腺癌晚期骨转移的治疗有重要意义。