背景与目的: 研究双酚A(BPA)和敌匹硫磷单独和联合作用对MCF-7细胞增殖的影响。 材料与方法: 设BPA、敌匹硫磷1.0×10-12～1.0×10-5 mol/L 的不同浓度组(组间10倍浓度差),分别作用雌激素敏感型与不敏感型MCF-7细胞,观察其对细胞增殖的影响,及分别加入雌激素受体抑制剂ICI182780后,对细胞增殖影响的变化。实验并设立溶剂对照组。BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8、5.0×10-9和2.5×10-9 mol/L 浓度时,两者联合作用MCF-7细胞,采用2×2析因设计分析对其增殖的影响。 结果: BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8 mol/L时促增殖效应均达到最大,相对增殖率分别为2.473和2.167,与溶剂对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);加入ICI182780后,二者对MCF-7的促增殖作用均减弱;二者在各浓度组对雌激素不敏感型MCF-7细胞均无明显促增殖效应;BPA和敌匹硫磷在1.0×10-8、5.0×10-9和2.5×10-9 mol/L各浓度组均表现出明显拮抗作用。 结论: BPA和敌匹硫磷具有明显的拟雌激素活性,并且通过雌激素受体途径对细胞发挥促增殖效应,二者的联合作用为拮抗作用。

背景与目的: 探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者PIG-A基因外显子2、4、5的突变及粒细胞表面CD55、CD59锚蛋白表达的情况。 材料与方法: 从30例AA患者及20例正常对照组人群外周血提取基因组DNA,采用PCR扩增PIG-A基因外显子2、4、5,再将纯化的PCR产物双向测序检测基因序列;并用流式细胞术检测两组人群外周血粒细胞中CD55、CD59的表达。 结果: 30例AA患者中11例发现PIG-A基因外显子2突变,包括碱基替代、缺失、插入;PIG-A基因外显子4和外显子5突变各5例,仅为碱基替代;共5例患者有2个或2个以上外显子存在突变,正常对照组未发现突变。粒细胞CD55和CD59的表达率在AA患者PIG-A基因突变者中分别为(86.57±5.90)%、(88.17±5.90)%,在PIG-A基因未突变者中分别为(91.87±4.79)%、(94.24±3.76)%,均较正常对照组(97.86±1.52)%、(98.82±1.42)%显著降低(P均<0.05)。 结论: 再生障碍性贫血患者存在PIG-A基因突变和粒细胞CD55、CD59表达缺失的现象,提示再障患者可能存在造血的克隆源性异常。

背景与目的:激活转录因子3 (activating transcription factor 3,ATF3)在食管癌中表达异常下调,但其功能仍不清楚。本研究拟探讨ATF3在食管癌细胞过表达对癌细胞生长及裸鼠成瘤的影响。 材料与方法: 利用分子克隆技术将ATF3基因完整编码区克隆至真核细胞表达载体pcDNA3中,获得重组表达质粒;将该表达质粒转染食管癌EC109细胞并用G418筛选稳定表达的细胞克隆;用Western blot检测ATF3的过表达效果;对ATF3过表达的细胞与相应对照细胞进行细胞克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验,以分析ATF3过表达对食管癌细胞生长的影响。 结果: ATF3的过表达在体外可以降低食管癌细胞的克隆形成能力;在体内可以抑制食管癌细胞在雌鼠中的成瘤能力,但对雄鼠中的成瘤能力没有明显影响。 结论: ATF3的过表达可以抑制食管癌细胞的生长,ATF3可能在食管癌的发生发展中发挥重要作用。

背景与目的: 为研究三氯乙烯诱导的差异蛋白SET在肝细胞L-02中的相互作用,构建带串联亲和纯化(tandem affinity purification,TAP)标签融合表达的真核表达载体pcDNA3.1/SET-TAP。 材料与方法: 从L-02肝细胞中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增SET基因,从质粒中扩增得到TAP基因,采用重叠PCR法将基因SET与TAP连接成SET-TAP,双酶切后纯化序列定向克隆至pcDNA3.1/zeo(+)并转化E.coli DH 5α ,取阳性克隆进行酶切和测序鉴定,重组质粒瞬时转染L-02肝细胞进行表达,Real Time-PCR和Western blotting检测融合蛋白的表达。 结果: 经双酶切和DNA测序鉴定,证实pcDNA3.1/SET-TAP真核表达载体构建成功,将该载体转染L-02细胞后,融合蛋白在肝细胞中获得高效表达。 结论: 该结果为研究SET在三氯乙烯致肝细胞毒性的蛋白质相互作用以及三氯乙烯致机体损伤的机制奠定了基础。

背景与目的: 评价X线放射治疗对鼻咽癌患者外周血淋巴细胞DNA的损伤。 材料与方法: 采用碱性单细胞凝胶电泳技术,检测19例鼻咽癌X线放射治疗患者在累积照射剂量为0、2、4、8、10、16 Gy时,外周血淋巴细胞的拖尾率,尾长及Olive尾距。 结果: 鼻咽癌患者接受X线放射治疗后,淋巴细胞拖尾率、尾长在累积照射剂量为2 Gy时即出现明显上升(P<0.01 和 P<0.05),Olive尾矩在累积照射剂量为8 Gy时出现明显上升(P<0.01)。在0～16 Gy照射剂量范围内随着剂量的升高外周血淋巴细胞的拖尾率,尾长及Olive尾距随之增加,且呈剂量-反应关系。 结论: 在本实验条件下,X线放射治疗在低剂量时即对鼻咽癌患者外周血淋巴细胞DNA有损伤作用,其照射剂量与外周血淋巴细胞的拖尾率,尾长及Olive尾距呈剂量-反应关系。

背景与目的: 研究p63与p73的mRNA表达与BaP致人肺腺癌细胞(H1299)和人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤的关系、 材料与方法: 分别用不同浓度BaP(8 、16 、32 、64和128 μmol/L)处理H1299和16HBE两种细胞,在4 h和12 h时,使用相应的生化检测试剂盒分别测定细胞裂解液中MDA的水平和SOD、GSH-Px的活性,用qRT-PCR方法测定处理后细胞的p53、p63、p73、mdm2和mdm4的mRNA水平;用Comet实验评价细胞DNA损伤程度、 结果: 16、32和64 μmol/L BaP处理4 h时,两种细胞MDA水平显著性升高,SOD和GSH-Px活性显著性下降(P<0.05)、用BaP处理H1299和16HBE细胞4 h和12 h时均观察到DNA损伤随浓度增加而加重,且呈剂量-效应关系(P<0.01), mdm2、mdm4 mRNA表达水平升高(P<0.01)、不过仅在12 h时p53 基因mRNA表达水平较对照组显著增加(P<0.01)、在4 h和12 h时点,仅在H1299细胞的p63和p73 mRNA表达增加(P<0.05)、 结论: 在BaP致p53缺失的H1299细胞的DNA损伤中,BaP可能通过不依赖p53信号通路激活了p63和p73 mRNA的表达、

背景与目的: 研究苯并(a)芘BaP对褐菖鲉的毒性效应。 材料与方法: 将褐菖鲉分别暴露于不同浓度(10、100、1 000 ng/L)的苯并(a)芘,0、7、25 和50 d以及恢复期7 、20 d取鱼肝脏,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,还原型谷胱甘肽(GSH)含量和DNA单链断裂指标。实验同设溶剂对照组。 结果: 总 SOD 活性在Bap暴露 7 d后被抑制,25 d后,10 ng/L和100 ng/L Bap组SOD活性升高(P<0.05);50 d时,1 000 ng/L组SOD活性显著升高(P<0.05)。10 ng/L BaP暴露7 d以及100 ng/L和1 000 ng/L BaP暴露50 d时,GSH含量显著增加(P<0.05)。而GST活性在100 ng/L和1 000 ng/L BaP分别暴露25 d、50 d时显著增加,随着暴露时间的延长和暴露浓度的增加,各BaP浓度组DNA 损伤呈加重趋势。 结论: 褐菖鲉肝脏SOD、GST酶活性与GSH含量结合使用以及DNA单链断裂损伤可以作为监测海洋环境中多环芳烃(PAHs)污染的潜在生物标志物。

背景与目的: 探讨汉族、维族和哈族儿童δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶(ALAD)、维生素D受体(VDR)基因多态性及其与铅中毒遗传易感性的关系。 材料与方法: 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对新疆乌鲁木齐市的489名汉族、499名维族和525名哈族儿童ALAD、VDR基因多态性进行分析。 结果: ALAD、VDR不同基因型在汉、维、哈族中分布的差异均具有统计学意义(P<0.01)。对VDR基因的3个等位基因位点BsmI、Taq I和Apa I单体型分析发现,汉族儿童中单体型Atb、AtB在铅中毒组显著降低(P<0.01),而单体型ATb、aTb在铅中毒组显著增高(P<0.05)。其它民族单体型分析未显示统计学意义(P>0.05)。 结论: ALAD、VDR不同基因型分布具有种族差异;在汉族儿童中,单体型Atb和AtB可能是铅中毒的保护因素,而单体型ATb和aTb可能是铅中毒的危险因素。

背景与目的: 应用基因芯片技术建立弱精症患者精子基因表达谱。 材料与方法: 收集30份弱精症患者精液标本和20份成年健康有生育能力男性的精液标本,提取精子RNA,制备生物素标记的cDNA探针,与含有30 968个探针的Phalanx OneArrayTM芯片杂交,分析弱精症患者与健康有生育能力成年男性精子中基因的表达情况。 结果: 高活力精子和低活力精子共1 995个基因存在表达差异,上调基因394个,下调基因437个。功能聚类分析结果提示,弱精症患者精子中表达上调的基因集中在物理化学刺激、压力应激、炎性反应等聚类,或一些催化酶聚类,这些因素可能是导致精子活力降低的重要诱因;而弱精症患者精子中表达下调的基因主要集中在一些与精子发生和抗凋亡相关的基因聚类中。 结论: 弱精症患者精子基因表达谱的建立对分析精子运动的分子机制和探讨弱精症的病因将会有所帮助。

背景与目的: 探讨FHIT和p16基因甲基化与肺癌发生之间的关系。 材料与方法: 采用甲基化特异性PCR检测59例原发性肺癌组织,相对应的32例正常组织及11例支气管鳞状化生组织中FHIT基因、p16基因启动子区CpG岛甲基化状况。 结果: 肺癌组织和正常肺组织中的FHIT基因甲基化率分别为37.3%(22/59)、0.0%(0/32);两组间的差异有统计学意义(P<0.01);支气管鳞状化生组织FHIT基因甲基化阳性率为18.1%(2/11)。肺癌组织和正常肺组织中的p16基因甲基化率分别为50.8%(30/59)、0.0%(0/32);两组间的差异具有统计学意义(P<0.01);支气管鳞状化生组织p16基因甲基化阳性率为18.1%(2/11)。肺癌患者吸烟组中FHIT、p16基因甲基化联合检测的阳性率为90.6%(29/32),与非吸烟组(33.3%;9/27)相比较,其差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论: FHIT基因和p16基因启动子区甲基化可能与肺癌的发生有关。

背景与目的: 研究亚硫酸钠和亚硝酸钠对蚕豆根尖细胞的致突变作用。 材料与方法: 用不同浓度的亚硫酸钠和亚硝酸钠(25、50、100、 200、400 mg/L)分别处理蚕豆根尖4 h,并以蒸馏水作为对照,用石炭酸品红染液染色,分别观察、测定蚕豆根尖细胞的微核率和染色体畸变率。 结果: 与对照组相比,不同浓度的亚硫酸钠和亚硝酸钠均能诱导蚕豆根尖细胞微核率和染色体畸变率增加(P<0.05或P<0.01),且随处理浓度的增大而增加。在相同浓度下,亚硝酸钠诱导的微核率高于亚硫酸钠诱导的微核率。亚硫酸钠和亚硝酸钠诱导蚕豆根尖细胞产生游离的染色体、染色体断片、染色体粘连、染色体滞后、染色体桥、多极分裂和染色体环等多种类型的染色体畸变。 结论: 亚硫酸钠和亚硝酸钠对蚕豆根尖细胞具有明显的致突变效应,具有一定的遗传毒性,其中亚硝酸钠对植物根尖细胞的致突变效应比亚硫酸钠强。

背景与目的: 探讨多氯联苯(polychlorinated biphenyl; PCB)对大鼠海马神经元细胞生长发育的影响。 材料与方法: 取新生Wistar 大鼠双侧海马,无菌条件下制备细胞悬液。实验分为对照组和PCB低(1×10-8 mol/L)、中(1×10-7 mol/L)、 高(1×10-6 mol/L)3个剂量实验组。运用光镜、免疫组化技术研究PCB对大鼠海马神经元细胞形态学及bcl-2和TGF-β1表达的影响。 结果: PCB对大鼠海马神经元细胞的损伤随着PCB剂量的增加呈升高趋势,高剂量PCB组海马神经元细胞结构改变明显,神经元细胞轴突和树突消失仅部分残存,胞体萎缩;PCB能诱导海马神经元细胞 bcl-2和TGF-β1的表达,PCB低剂量组bcl-2呈强阳性表达,中剂量组bcl-2表达显著下调,高剂量组bcl-2为阴性表达; 低剂量组TGF-β1表达显著下调,中剂量组TGF-β1表达上调;高剂量组呈阴性,而对照组神经元细胞的bcl-2和TGF-β1均为阳性表达。 结论: PCB对大鼠海马神经元细胞的生长产生影响。

背景与目的： 探讨巯基乙酸(thioglycolic acid, TGA)对孕酮诱导的爪蟾卵母细胞核成熟的影响。 材料与方法： 用不同浓度的TGA(5、25 、125 μg / ml )在体外预处理爪蟾卵母细胞2 h后，再用孕酮诱导成熟，实验并设不经TGA预处理的对照组。在培养过程中观察卵母细胞的外观和核形态，以判断生发泡破裂(GVBD)情况；在培养结束时(加入孕酮后8 h)，收集卵母细胞进行荧光染色, 观察染色体的状态。 结果： 经不同浓度TGA 处理后卵母细胞的GVBD50明显缩短，与对照组比较均具有统计学意义(P均<0.05)，说明TGA加快卵细胞GVBD的发生；荧光染色观察GV期卵母细胞未见凝集的染色体, 第一次减数分裂中期细胞可见赤道板形成, 第二次减数分裂中期细胞除染色体赤道板外，还可见第一极体(PB1)。经25 mg/ml和125 mg/ml浓度的TGA处理后，排出PB1的爪蟾卵母细胞比例明显降低(P<0.05)，即抑制了MI--MII转变和第一极体的释放。 结论： TGA可抑制孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟。

背景与目的: 研究生物活性肽粉的急性毒性与致突变性。 材料与方法: 采用小鼠经口急性毒性试验?Ames试验?小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验检测生物活性肽粉的急性毒性与致突变性。 结果: 生物活性肽粉对小鼠的经口急性毒性LD50大于10 g/kg。Ames试验?微核试验和精子畸形试验结果均为阴性。 结论: 在本实验条件下,生物活性肽粉属于实际无毒物质,未显示致突变性。

背景与目的: 采用小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)和小鼠骨髓微核试验(MNT)研究五味子水煎剂的遗传毒性。 材料与方法: 在MLA中,设五味子0.97、1.94、3.88、7.77 mg/ml (生药)等4个浓度组,在非代谢活化(-S9)和代谢活化(+S9)条件下处理L5178Y细胞3 h;表达2 d,制备基因突变频率平板并培养12 d,计数含大、小突变细胞集落的孔数,计算基因突变频率(MF)和小集落突变百分率(SC%);在MNT中,设3.13、6.25、12.50 g/kg (生药)3个剂量组,每组10只ICR小鼠,雌雄各半,间隔24 h 实施2次小鼠灌胃给予五味子水煎剂,制作骨髓涂片,计数每只小鼠2 000个嗜多染红细胞中含微核的嗜多染红细胞数(MNPCE),计算每组动物嗜多染红细胞微核率。 结果: 在-S9条件下,7.77 mg/ml (生药)浓度组诱发的MF是阴性对照组的2倍以上(P<0.01), SC%随五味子浓度增加而升高。 +S9条件下的各浓度组诱发的MF存在剂量-反应关系,7.77 mg/ml (生药)浓度组的MF明显增加(P<0.01),其MF、SC%与阳性对照组相近;五味子水煎剂各剂量组未显示骨髓抑制作用,所诱发的微核率与阴性对照组比较未见明显增加(P>0.05)。 结论: 五味子水煎剂在+/-S9条件下均可诱发L5178Y细胞tk位点突变并导致染色体损伤,提示对人体具有潜在的遗传毒性;但对小鼠骨髓细胞染色体无损伤,经体内代谢活化后未显示遗传毒作用。

背景与目的: 对番茄红素和大豆异黄酮组合物的食用安全性进行毒理学评价。 材料与方法: 根据《保健食品检验与评价技术规范》进行大鼠经口急性毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验。 结果: 番茄红素和大豆异黄酮组合物的大鼠经口LD50>10.0 g/kg;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验及Ames试验结果均为阴性。 结论: 番茄红素和大豆异黄酮组合物属无毒级物质,无致突变作用。

背景与目的: 了解红曲黄色五味子水煎剂的遗传毒性研究素对机体是否具有毒性作用。 材料与方法: 选用清洁级SD大鼠,试验设3个红曲黄色素剂量组(0.23、0.47、0.93 g/kg)及空白对照组(基础饲料)。试验期间观察动物形态,每周称重,记录饲料消耗量。第45 d时,采尾血测血常规、血生化，喂养90 d后,摘眼球采血作血常规及生化指标测定,然后取出肝、肾、脾、睾丸称重,并对肝、肾、脾、胃肠、睾丸、卵巢作病理学检查。 结果: 实验期间3个红曲黄色素组的大鼠体重增加、饲料利用率与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。喂养45 d和90 d后,3个红曲黄色素组大鼠的血红蛋白含量、红细胞、白细胞计数及白细胞分类均在正常值范围内。其血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白测定值均在正常值范围内。且3个红曲黄色素组大鼠的肾体比、脾体比、肝体比、睾体比与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。组织病理学检查结果显示各剂量组大鼠的肝、肾、胃、脾切片染色后在光镜下检查未见特异性病理改变。 结论: 在本实验条件下,红曲黄色素喂养90 d对大鼠未产生毒性作用,提示可作为天然色素在食品加工生产中在安全的剂量范围内可适当使用。

邻苯二甲酸酯(PAEs)是目前我国环境污染最广、检出率最高的持久性有机污染物; 是一类典型的具有环境雌激素效应的化合物。作者综述了近年来国内外有关PAEs致男性生殖损害和不育的细胞及分子机制、人群流行病学研究、环境易感性和环境-基因交互作用的最新研究进展。

SOX基因家族是一类编码转录因子的基因,该家族成员在性别决定及胚胎发育过程中起着重要作用,SOX蛋白的典型特征就是具有一个保守的HMG基序。研究发现,SOX基因异常表达与胃肠癌的发生发展有一定的关系,如SOX2基因的表达下调和SOX18基因的过表达与胃癌的发生有关;SOX4基因的高表达、SOX7和SOX17基因的表达下调均可以激活Wnt信号通路,与结肠癌的发生发展有一定关系;此外,SOX7基因的表达下调还与直肠癌的发生发展有关。本文就SOX基因异常表达与胃肠癌发生发展的关系作一综述。

有丝分裂原诱导基因-2 (mitogen inducible gene-2，Mig-2) 是新发现的一种人类基因，编码一种80 kD的蛋白，与整合素、Migfilin和Rho族GTP酶的关系十分密切，对肿瘤的形成和发展有重要作用。本文对Mig-2的基本特性和最新研究进展作一综述。