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当期目录

2012年 第24卷 第3期 刊出日期:2012-05-30
论著
癌症高发区环境水样有机提取物诱导L-02细胞转化及其表观遗传学机制
张世鑫,邢秀梅.孙 新,何民富,马 璐,杨 萍,肖勇梅,何志妮,李道传,张 波,王 庆,陈 雯
. 2012, 24(3):  161-165.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.001
摘要 ( 3198 )   PDF (735KB) ( 1020 )  
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目的: 检测华中某癌症高发地区环境水样有机提取物诱导人肝细胞系L-02细胞转化的能力,并初步探讨其诱导细胞转化的表观遗传学机制。 方法:分别采集研究地区河水、离河较近 (约1 km)及离河较远 (约20 km)的浅井水 (约10 m),用固相萃取方法提取其中的有机物。用台盼蓝染色计数法和单细胞凝胶电泳试验检测受试物的细胞毒性和致DNA损伤效应,以受试物对L-02细胞进行长期染毒并利用软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验检测受试物诱导L-02细胞转化的能力。采用甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)技术检测转化细胞中O6-甲基鸟嘌呤- DNA甲基转移酶 (O6-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT) 基因启动子区甲基化状况,并分别用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转化细胞MGMT mRNA和蛋白的表达水平。 结果:河水、离河较近的井水、离河较远的井水的有机提取物处理L-02细胞24 h后,细胞存活率达70%的处理浓度分别为每毫升培养基 30、150、200 ml原水,且均含有致DNA损伤的物质。以此作为最高剂量对细胞进行长期染毒,12周以后各处理组细胞软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验均显示转化特性。MSP结果显示转化细胞中MGMT基因启动子区发生高甲基化,与DMSO溶剂对照组比较,转化细胞中MGMT mRNA和蛋白表达水平均下调 (P<0.05)。 结论:研究地区环境水样有机提取物具有诱导L-02细胞转化的能力,MGMT基因启动子区的高甲基化可能参与有机物诱导的细胞转化过程。
铅和镉对人胎盘绒毛癌细胞中S100钙结合蛋白成员mRNA表达的影响
朱 敏,张庆英,罗家逸,张东红,赵治国,易德青
. 2012, 24(3):  166-171.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.002
摘要 ( 2468 )   PDF (679KB) ( 932 )  
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目的: 探讨重金属铅 (Pb)和镉 (Cd)对人胎盘绒毛癌细胞 (JAR)中一组S100钙结合蛋白家族成员mRNA表达的影响。方法:采用四甲基噻唑蓝 (MTT)实验分别检测乙酸铅 (PbAc)和乙酸镉 (CdAc)对JAR增殖活力的影响。再进一步采用小于半数致死量的不同浓度的PbAc和CdAc分别染毒JAR细胞24 h和48 h,运用半定量RT-PCR检测各染毒组与对照组[金属硫蛋白 (MT)为参照,β-actin为内参]S100钙结合蛋白家族成员mRNA的表达水平。结果:PbAc (2.5~20 μmol/L)和CdAc (2.5~10 μmol/L)染毒24 h后对JAR细胞的相对存活率与染毒浓度呈剂量效应关系,且呈线性负相关 (r 依次为-0.992 4和-0.995 5,P均 < 0.05),半数致死浓度PbAc为23.15 μmol/L, CdAc 为8.30 μmol/L。半定量RT-PCR检测9个钙结合蛋白S100家族成员,仅发现S100A10、S100A11、S100A14和S100P有明显表达,其余的S100成员表达较弱或未能检出。染毒24 h和48 h后,与对照组比较,S100A10和S100A11 mRNA的表达未发生明显变化,但S100A14 mRNA的表达 (除10 μmol/L PbAc染毒24 h外)明显上调 (P <0.05或P <0.01)。S100P的表达经2.5和5 μmol/L PbAc染毒24 h后明显上调 (P <0.05或P <0.01),但随PbAc浓度增高表达有降低的趋势。而经CdAc染毒24 h后各实验组S100P的表达均明显上调 (P <0.05 或P <0.01);经染毒48 h后的表达进一步增加,但与对照组相比差异无统计学意义 (P >0.05)。S100P的表达与MT对照的结果相类似。结论:PbAc或CdAc染毒JAR细胞可引起S100A14和S100P mRNA的表达发生明显的变化,其中S100P的变化规律与MT的表现类似,推测这两种钙结合蛋白在重金属毒作用过程中有参与保护细胞的重要作用,可作为细胞应激的分子生物指标。
小白菊内酯对不同环氧合酶-2表达的鼻咽癌细胞株中干性侧群细胞转归的影响
李晓杰,林丽娜,麦剑荣,陈慧峰,胡耀明,廖 昆,黄奕俊,林忠宁,林育纯
. 2012, 24(3):  172-178.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.003
摘要 ( 2760 )   PDF (1825KB) ( 1315 )  
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目的: 探讨倍半萜烯内酯 (sesquiterpene lactones,SLs)类化合物对不同环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平的人鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞中癌干细胞 (cancer stem cells,CSCs)转归的影响。方法:分别采用实时定量PCR (qRT-PCR)和Western blot检测人鼻咽癌高分化CNE1L和低分化CNE2L细胞株中COX-2 mRNA和蛋白本底表达水平。给予不同剂量SLs活性成分小白菊内酯 (parthenolide,PN)处理2种细胞株后,再分别采用噻唑蓝 (MTT)法测定细胞增殖活性;qRT-PCR检测细胞中干性相关基因COX-2、ABCG2、BMI1、OCT4 mRNA水平;流式细胞术分析干性侧群 (side population,SP)细胞的相对含量;平板克隆集落形成实验检测干性细胞的自我更新和分化增殖能力。结果:CNE1L和CNE2L细胞中COX-2 mRNA和蛋白本底水平显著不同,在CNE1L细胞中明显高于CNE2L细胞 (P<0.05);与对照组比较,PN处理后,细胞增殖抑制率随PN浓度 (10~100 μmol/L)增加呈剂量依赖性增高 (P<0.05),细胞中COX-2 mRNA在CNE1L中升高、在CNE2L中降低,干性相关基因ABCG2、BMI1 mRNA在CNE1L细胞中升高、而OCT4 mRNA在两株细胞中均降低 (P均<0.05);SP细胞抑制率亦随PN浓度 (2.5~40 μmol/L作用24 h)增加呈剂量依赖性增高 (P<0.05);而细胞的集落形成能力随PN浓度 (0.25~1.5 μmol/L作用72 h)增加显著降低 (P<0.05);上述结果在CNE1L和CNE2L细胞株间差异均有统计学意义 (P<0.05),在CNE1L细胞中变化作用更强。结论:PN对不同NPC细胞株中的干性细胞功能具有抑制作用且存在明显差别,可能与不同细胞间COX-2表达的差异性有关。
5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌细胞RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响
叶 静,李明华,张芳婷,万汇涓,龙 霞
. 2012, 24(3):  179-182.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.004
摘要 ( 2677 )   PDF (474KB) ( 1132 )  
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目的: 研究5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌CNE2细胞中RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响。方法:用不同浓度 (0、5、10、20 μmol/L) 5氮杂脱氧胞苷处理CNE2细胞,采用甲基化特异性PCR (MSP)法对处理后细胞中RASSF1A基因甲基化状态进行检测;并用SYBR Green qReal Time-PCR法检测RASSF1A mRNA的表达。结果:阴性对照组CNE2细胞中,RASSF1A基因呈完全甲基化状态,当用5 μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞出现非甲基化产物,20 μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞甲基化状态完全被逆转,均为非甲基化产物。阴性对照组CNE2细胞RASSF1A基因呈低表达,经5~20 μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,RASSF1A mRNA的相对表达量逐渐增加,10和20 μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理组,RASSF1A mRNA表达水平均明显高于阴性对照组 (P<0.01);且20 μmol/L处理组明显高于5 μmol/L处理组 (P<0.01)。结论:CNE2细胞RASSF1A基因甲基化可以被5氮杂脱氧胞苷逆转,且5氮杂脱氧胞苷可促进RASSF1A mRNA的表达。
HBX蛋白对正常肝细胞增殖及端粒酶活性的影响
贺丹丹,邓志华,杨 倩
. 2012, 24(3):  183-187.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.005
摘要 ( 2843 )   PDF (1183KB) ( 1325 )  
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目的: 观察乙型肝炎病毒X (hepatitis B virus X,HBX)蛋白对L02肝细胞的转化作用及其对端粒酶活性的影响。方法:构建PEGFP-N1-HBX质粒,脂质体介导转染L02细胞,倒置荧光显微镜观察EGFP的表达。稳定转染后Western blotting检测L02细胞中HBX蛋白的表达,电子显微镜观察L02细胞的形态,MTT法检测细胞的增殖,RT-PCR检测L02细胞端粒酶逆转录酶 (hTERT)mRNA的表达,TRAP-PCR银染法检测L02细胞端粒酶活性的变化。结果:成功构建了PEGFP-N1-HBX质粒,稳定转染后L02细胞中有HBX蛋白的表达,且细胞形态明显幼稚化,有恶性变趋势,细胞增殖能力明显增加 (P<0.05),细胞hTERT mRNA表达明显增加,端粒酶被激活。结论:HBX蛋白可诱导正常肝细胞的恶性转化,上调hTERT mRNA的表达并能激活端粒酶。
信息
《癌变·畸变·突变》投稿须知
. 2012, 24(3):  188-188.  doi:
摘要 ( 1211 )   PDF (125KB) ( 669 )  
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以下简述如何投稿、投稿的要件和编辑流程,以便作者投稿和了解稿件的处理过程。 1 投稿方式 作者向本刊投稿可邮寄稿件投稿或通过E-mail发送,本编辑部已建立网站,也可通过网站上传投稿。邮寄地址:广东省汕头市新陵路22号,汕头大学医学院《癌变·畸变·突变》杂志编辑部。E-mail:cemsctm@stu.edu.cn;网址:www.egh.net.cn 。 2 投稿要件 向本刊投稿应具备以下文件:①第一作者单位的推荐信,推荐信中应表明无著作权纠纷和无泄密情况。②经邮寄投稿者,稿件需一式两份,图表随文排,如有照片图则文内相应处用草图;原图附稿件的文末;电子版投稿者,需将word版文稿(含图表)发送至上述编辑部邮箱或上传至本刊网站。③基金资助项目的复印件,包括项目名称和编号。④附件:写明第一作者的单位名称、地址、E-mail、联系电话、传真号,以及作者简介(仅第一作者),包括作者姓名、出生年份、性别、籍贯、学位和研究方向等。 3 编辑流程简介 退稿 投稿 编辑部收稿 登记 编辑部初审 专家评审(2位专家) 稿件的编辑加工 返作者修改 修回 修改后复审 登记 编辑再加工 文稿排版 校对(第一次校对 作者校对 第二次校对 第三次校对) 核红 交付印 刷厂印刷出版 由以上编辑流程可见,文稿从投稿到印刷出版须经若干严谨的环节和较复杂的工序,因此作者投稿后要通过一些工作环节和经过一段时间才能决定稿件是否可用及最终印刷出版。若你(作者)知道你的稿件当前所处流程中的位置,那么你就大致知道了稿件的取舍和距刊出还有多久。 4 论文著作权转让书 为贯彻开展国内外学术交流,促进学科繁荣与发展的办刊宗旨,扩大作者的科研成果的影响,本刊已被国内14家知名的数据库作为收录刊源之一。因此,作者修改文稿后应填写论文著作权转让书寄(交)回编辑部(著作权转让书可在本刊网站下载),以便编辑部以纸质期刊、电子期刊,光盘版及网络等其它方式使用,若不同意转让,请于投稿时说明,否则一经刊出即视为同意转让。 《癌变·畸变·突变》编辑部 2012年5月
论著
PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的人肝L02细胞DNA损伤
林丽娜,林育纯,陈慧峰,罗 洁,李晓杰,胡耀明,李 文,张树江,陈 雯,林忠宁
. 2012, 24(3):  189-194.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.006
摘要 ( 2999 )   PDF (982KB) ( 834 )  
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目的: 探讨人正常肝细胞内蛋白磷酸酶2A-B56γ亚基 (PP2A-B56γ,由PPP2R5C基因编码)高表达对镉诱导相关基因转录水平和DNA损伤效应的影响,并探讨其作用机制。方法:构建PP2A-B56γ高表达L02-2R5Cc和空白载体对照L02-pBabe细胞模型;两种细胞分别给予CdCl2 (Cd)、TNFα单独处理及联合处理后,实时荧光定量-PCR(QRT-PCR)检测不同处理组PPP2R5C和金属硫蛋白1B (MT1B) mRNA转录水平;彗星试验(SCGE)检测细胞DNA断裂损伤情况;并按照3×2的析因设计分析不同处理之间是否存在联合作用及作用类型。结果:与L02-pBabe细胞相比较,L02-2R5Cc细胞中PPP2R5C、外源性PPP2R5C-FLAG mRNA显著高表达 (P<0.05),细胞株构建成功。3种因素单独处理时,与阴性对照组相比,Cd降低PPP2R5C、升高MT1B mRNA表达,PPP2R5C基因高表达诱导的效应与Cd处理相反,TNFα降低PPP2R5C和MT1B mRNA表达 (均P<0.05);析因分析表明,在PPP2R5C和PPP2R5C-FLAG mRNA检测中,PPP2R5C高表达与Cd、与TNFα之间均存在协同性交互效应 (P<0.05);在MT1B mRNA检测中,PPP2R5C高表达与Cd和TNFα之间均表现为拮抗作用,PPP2R5C高表达与TNFα为协同抑制作用 (均P<0.05)。SCGE检测表明,与阴性对照相比,Cd诱导彗星尾长、尾矩、尾部DNA含量和拖尾细胞阳性率显著增高 (P<0.05),TNFα、PPP2R5C高表达单独作用均不引起DNA损伤 (P>0.05),但两两联合作用的析因分析结果表明,TNFα预处理与Cd处理对DNA损伤具有协同作用,PPP2R5C高表达与Cd处理存在拮抗作用,交互作用均具有统计学意义 (P<0.05)。结论:Cd抑制肝细胞PPP2A-B56γ编码基因的转录并显著诱导DNA损伤,PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的DNA损伤,而炎症因子可增强镉对细胞DNA的损伤。
信息
《癌变·畸变·突变》征稿简则
. 2012, 24(3):  194-194.  doi:
摘要 ( 1285 )   PDF (227KB) ( 817 )  
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1 投稿总则 基本情况 《癌变·畸变·突变》杂志国际标准刊号:ISSN 1004-616X,国内统一刊号:CN 44-1063/R,大16开,双月刊,每期80页,定价:每册10元,全年60元。国内邮局发行代号:80-285,国外发行代号:6364(BM)。《癌变·畸变·突变》杂志于1989年创刊,是中国科学技术协会主管,中国环境诱变剂学会主办,汕头大学医学院承办,科学出版社和《癌变·畸变·突变》杂志编辑部联合出版的国家级学术期刊,系中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊,是目前我国在环境因子致癌、致畸变和致突变这一跨学科领域唯一的一份学术期刊。本刊以报道环境因子致癌、致畸变和致突变领域的新理论、新方法、新技术以及国内外研究动态,开展学术交流,促进本学科的繁荣与发展为办刊宗旨,被国内14家主要的数据库作为收录刊源之一。 栏目设置 设有“专家述评”、“论著”、“肿瘤防治”、“检测研究”、“相关医学基础与临床”、“技术与方法”和“综述”等栏目。 报道内容范围 ①药物、农药、食品添加剂、化妆品、营养保健品、其它化学物质、放射线、以及水体、空气、土壤中存在的环境污染物与肿瘤发生、胎儿发育畸形、遗传基因突变的关系;②癌变机制;③抗突变物与抗癌物的开发利用;④环境风险因子评价;⑤相关医学基础与临床。 2 撰稿要求 撰稿标准 文稿撰写应遵照国家标准GB7713 科学技术报告、学位论文和学术论文的编写格式,GB/T3179 科学技术期刊编排格式,GB6447 文摘编写规则,GB7714-2005 文后参考文献著录规则等要求。文稿应具科学性、逻辑性、先进性和实用性,应论点明确、内容翔实、数据可靠、简明扼要、重点突出、层次分明。 文稿格式及要求 题名 简明确切地反映文稿的特定内容,起画龙点睛的作用,不用副标题。一般宜20个字左右。应避免用“的研究”或“的观察”等非特定词。 作者署名 作者是指科研内容的构思,具体研究工作的执行及撰稿执笔等方面的主要贡献人员,能够对论文的主要内容负责答辩的人员,是论文的法定主权人和责任者。作者署名不宜过多,一般不超过8名。对研究工作有贡献的其他人员可放在致谢中。 作者单位 作者后刊作者单位,并刊出省、市名称及邮政编码。多个单位时,在作者名的右上角编阿拉伯数字序号,依序刊出作者单位。 基金项目和第一作者简介 论著的科研工作为基金资助课题者,应刊出基金名称及编号,第一作者应作简要介绍,其内容包括作者姓名、出生年份、性别、籍贯、学位及主要研究方向。基金项目和第一作者简介均置首页脚注处。 中文摘要 以提供论著梗概为目的,不加评论和补充解释,简明、确切地记述文献重要信息的短文。中文摘要是具有独立性、自明性的短文,其撰写宜在400字以内。应采用结构式摘要格式撰写,其内容包括:目的、材料、结果、结论4项。 英文摘要 与中文摘要相一致。作者姓名以汉语拼音拼写法书写,先姓后名,姓的字母均用大写、名首字母大写、双名之间用半字线“-”联接。多位作者时用逗号隔开。作者单位采用斜体,作者的国名(China)用正体。 文内标题层次 采用阿拉伯数字分级编号法,文内一级标题用1,2,3 ……文内二级标题序号用1.1,1.2,1.3 ……文内三级标题序号用1.1.1,1.1.2,1.1.3 ……余类推。各层次的序号均左顶格打印,后空一字距后再接标题。 引言 是论著的开场白,应简洁地介绍论著的写作背景和目的。引言的撰写须开门见山、不绕圈子、言简意赅、突出重点、尊重科学、实事求是,不夸大研究的价值。 材料与方法 其撰写应能体现科研重复性的原则。应介绍该研究的主要对象和材料,及其来源、生产者、规格和型号。对新的方法宜详细描述,但应描述准确,实验步骤清晰,而对已有文献报道过的方法则引用参考文献即可。实验分组应说明分组所采用的方法。 结果 如实地列出研究结果,结果的列出应具有条理性和逻辑层次。结果中的数据应准确可靠,须经统计学分析处理。合理采用图表和文字表示,应避免文字叙述与图表内容重复。图表须简洁明了和具有自明性。表格采用三线表。图表的图题表题用中英文对照,图表的注释采用英文。图表的序号应与正文中标注的序号一致。 讨论 对研究结果做出解释和由此得出的合理的结论,而不是结果的重复叙述和综述式的大量文献回顾。讨论应重点突出,内容集中。 致谢 是对曾给予研究的选题、构思或论著撰写以指导或建议,对考察和实验作出某些贡献的人员,或曾经给予技术、资料、信息、物质或经费的团体或个人致以谢意,致谢独立成段,置参考文献前。 参考文献 应是作者直接阅读过、与中文内容相关的文献,未正式发表的资料请勿列入,提倡引用近5年内发表的一次文献。参考文献采用“顺序编码制”著录法,其文内引用处依出现的先后以阿拉伯数字排序,用右上角方括号标注,在文末参考文献中依次列出。参考文献表中的作者为1~3名者全部列出,3名以上者只列出前3位其后加“等”(日文加“他”,英文加“et al”)。 期刊文章 [序号] 主要责任者. 文献题名[J]. 刊名,年,卷(期):起页-止页. 举例: [1] 张清健,黄天华,谢庆东,等. HBV DNA 重组质粒转染小鼠卵母细胞的研究[J]. 癌变·畸变·突变,2004,16(16): 324-327. [2] Imanura T, Takase M, Nishihara A, et al. Smad6 inhibits signaling by the TGF-beta superfamily[J]. Nature, 1997, 389(6651):622-626. 专著、论文集 [序号] 主要责任者. 文献题名[M或C]. 版本. 出版地:出版者,出版年:起页-止页.举例: [3] 黄幸纾,陈星若. 环境化学物致突变致畸致癌试验方法[M].杭州:浙江科学技术出版社,1985:20-30. 《癌变·畸变·突变》编辑部 2012年5月
论著
维生素E琥珀酸酯通过内质网应激诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究
黄晓莉,赵 艳,张志宏,张旭光,王晓琳,贾 莉,吴 坤
. 2012, 24(3):  195-198.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2011.03.007
摘要 ( 2688 )   PDF (1417KB) ( 814 )  
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目的: 探讨内质网应激在维生素E琥珀酸酯 (vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的作用。方法:分别采用Western blotting 和RT-PCR检测VES不同剂量 (0、5、10和20 μg/ml)处理SGC-7901细胞24 h和20 μg/ml VES处理SGC-7901细胞不同时间对内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白 (glucose regulative protein,GRP) GRP78、GRP94和内质网应激凋亡途径关键因子C/EBP同源蛋白 (C/EBP-homologous protein,CHOP)的蛋白和mRNA表达的影响;进一步采用RNA瞬时干扰阻断CHOP的表达后用20 μg/ml VES作用SGC-7901细胞24 h,采用DAPI染色法观察细胞凋亡的改变。结果:20 μg/ml VES组在mRNA水平上均诱导GRP78、GRP94和CHOP的表达增加;在蛋白水平上20 μg/ml VES显著增加GRP78和CHOP的表达,GRP94表达先降低,而后又升高;阻断CHOP后VES诱导的细胞凋亡由46.3%降低为27.9% (P<0.05)。结论:内质网应激可能参与了VES诱导的SGC-7901细胞凋亡。
Survivin和Cox-2蛋白与非小细胞肺癌危险因素的系统评价
孙国贵,张 钧,胡万宁
. 2012, 24(3):  199-204.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.008
摘要 ( 3030 )   PDF (479KB) ( 848 )  
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目的: 系统评价存活蛋白 (Survivin)、环氧化酶2 (cyclooxygenase 2,Cox-2)表达水平与非小细胞肺癌 (non-small cell lung cancer,NSCLC)危险因素的关系。方法:计算机检索Cochrane Library (2011年第1期),PubMed、CNKI等数据库,并辅以手工检索,按照纳入与排除标准选择病例对照试验。评价质量及提取资料后,采用RevMan 4.2.10软件对数据库进行系统评价。结果:对于Survivin,共纳入15个研究,其中1 222例NSCLC患者,447例正常对照。Meta分析结果显示:Survivin在NSCLC组及正常对照组[比值比 (odds ratio,OR)=11.11,95%可信区间 (confidence interval,CI)为5.92~20.83] 的表达差异具有统计学意义 (P<0.05)。临床病理检查结果显示:Survivin在TNM分期T3~T4期与T1~T2期,临床分期Ⅲ~Ⅳ期与Ⅰ~Ⅱ期,淋巴结转移组与非淋巴结转移组,低分化组与中高分化组间的表达差异均具有统计学意义 (P均<0.05)。对于Cox-2,共纳入12个研究,其中975例NSCLC患者,209例正常对照。Meta分析结果显示:Cox-2在NSCLC组及正常对照组 (OR=29.46,95% CI=15.91~54.56)的表达差异具有统计学意义 (P<0.05)。临床病理检查结果显示:Cox-2在TNM分期T3~T4期与T1~T2期的表达差异无统计学意义 (P>0.05)。Cox-2在临床分期Ⅲ~Ⅳ期与Ⅰ~Ⅱ期,淋巴结转移组与非淋巴结转移组,低分化组与中高分化组间的表达差异均具有统计学意义 (P均<0.05)。Spearman等级相关分析显示,Survivin与Cox-2蛋白阳性率在NSCLC中的表达具有相关性 (r =0.514,P<0.05)。结论:Survivin、Cox-2在NSCLC中高表达,增加了其恶性行为的发生危险,同时Survivin与Cox-2在NSCLC表达也有一定的相关性。
人胚肾细胞HEK293中miRNA-128-1表达调控机制的初步研究
徐 可,刘明发,金 涛,蒋嵩山,许海雄
. 2012, 24(3):  205-208.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.009
摘要 ( 2807 )   PDF (492KB) ( 2465 )  
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目的: 初步研究人胚肾细胞HEK293中miRNA-128-1的表达调控机制,为进一步探讨miRNA-128-1在胶质瘤中的表达调控奠定基础。方法:通过软件UCSC预测miRNA-128-1的启动子区域;运用软件UCSC、CBIL预测可能与miRNA-128-1启动子区域结合的候选转录因子;构建相关质粒,包括pB-miRNA-128-1、pShNF1、pShc-Myc、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2、pShRNUX1和pShNFkappaB。然后将pB-miRNA-128-1分别与上述质粒共转染人胚肾细胞HEK293,检测报告基因活性,确定候选转录因子的作用性质。结果:共转染pShc-Myc可显著抑制pB-miRNA-128-1启动子报告基因的活性;共转染pShNFkappaB可显著升高pB-miRNA-128-1启动子报告基因的活性;共转染pShNF1、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2或pShRNUX1对pB-miRNA-128-1启动子报告基因的活性未见明显影响。结论:在HEK293细胞miRNA-128-1的表达调控中,c-Myc可能发挥转录激活作用,而NFkappaB可能发挥转录抑制作用。
稳定干扰SET肝细胞株的生物学鉴定
周 丽; 李 杰; 黄 遂; 杨细飞; 刘建军
. 2012, 24(3):  209-212.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.010
摘要 ( 2800 )   PDF (4490KB) ( 699 )  
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目的: 对稳定干扰SET(patient SE translocation)的肝细胞株进行生物学性状鉴定,为研究SET蛋白在肝细胞中的作用奠定基础。方法:培养人肝L-02细胞、慢病毒载体介导的稳定干扰 ( siRNA) SET L-02肝细胞及psiRNAc L-02肝细胞(空载体转染细胞),于倒置显微镜下观察细胞形态,利用MTT吸光度与细胞数目间关系绘制生长曲线,采用染色体畸变试验观察染色体有无结构异常,软琼脂克隆实验检测细胞的恶性转化。结果:与正常肝细胞比较,稳定干扰SET肝细胞及psiRNAc肝细胞的生长形态无明显变化,3组细胞的生长曲线趋于一致。染色体畸变分析表明SET基因沉默的人肝L-02细胞染色体结构与数目未发生明显改变。软琼脂克隆实验表明SET基因沉默的人肝L-02细胞未发生恶性转化。结论:SET siRNA的导入未引起细胞生物学特征的改变,遗传性状保持稳定,说明所构建的SET基因沉默的人肝L-02细胞模型是稳定的,为后续的研究提供了工具细胞。
放线菌素D对仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞活力和染色体畸变的影响
靳翠红,巫生文,逯晓波,刘秋芳,蔡 原,肖 云
. 2012, 24(3):  213-216.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2011.03.011
摘要 ( 2633 )   PDF (608KB) ( 738 )  
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目的: 观察放线菌素D (actinomycin D,ACTD) 对中国仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞的细胞活力和染色体畸变的影响,以确定ACTD能否诱导旁观者效应的发生。方法:用不同剂量ACTD (0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L)处理V79靶细胞1 h,并选择其中4 mg/L ACTD作用1 h开始计时,分别在第4、8、12和24 h时取靶细胞去细胞培养液 (conditioned medium,CM),培养正常细胞24 h后,进行旁观者效应的观察。用MTT法测定靶细胞和旁观者细胞活力;并对靶细胞和旁观者细胞进行染色体畸变分析。结果:随着ACTD剂量的增加,靶细胞的活力下降,存在明显的剂量-效应关系 (P<0.05)。4 mg/L ACTD作用1 h时细胞活力接近50%且稳定。旁观者细胞活力在用4~12 h CM培养时逐渐增加 (P<0.05),用24 h CM时又下降 (P<0.05),4 h CM诱导旁观者细胞损伤的作用最强。靶细胞的染色体畸变率随ACTD剂量的增加而增高,具有剂量-效应关系 (P<0.05)。旁观者细胞染色体畸变以4 h CM诱导的作用最强,随着加入CM时段的延后,损伤逐渐减轻 (P<0.05),在24 h CM又趋严重 (P<0.05);旁观者细胞与靶细胞染色体畸变类型相似,以断裂为主,伴有少量环形染色体、碎片和双着丝粒染色体。结论:ACTD可以诱导旁观者效应的发生,染色体畸变在靶细胞和旁观者细胞均以断裂为主。
蛋白激酶Cε在缺氧复氧心肌细胞中的调控作用
王锦芝,蔡聪艺,张艳美,石刚刚
. 2012, 24(3):  217-221.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.012
摘要 ( 2074 )   PDF (608KB) ( 727 )  
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目的: 研究蛋白激酶Cε (protein kinase Cε, PKCε)在缺氧复氧 (hypoxia/reoxygenation, H/R)所致心肌细胞损伤中的调控作用。方法:取原代培养心肌细胞制作H/R模型,采用Western blot法检测PKCε蛋白转位;双抗体夹心化学发光法和酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测培养心肌细胞上清液中肌钙蛋白 (cTnI)浓度和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)分泌以观察心肌细胞损伤的状况。结果:与正常对照组比较,缺氧2 h复氧30 min时,PKCε总蛋白表达无明显变化,但PKCε由可溶性成分转位至颗粒性成分 (P<0.05),延长缺氧时间至4 h,PKCε总蛋白表达明显下降 (P<0.05); 与H/R组比较,PKCε亚型特异性抑制剂εV1-2可增加cTnI漏出 (P<0.05),但对TNF-α的分泌无明显影响。结论:PKCε转位可减轻心肌细胞H/R所致的损伤。
肿瘤防治
维吾尔族妇女宫颈癌相关血浆候选肿瘤标志物的双向荧光差异电泳分析
郭 霞,刘开江,吐尔逊帕夏·吾布力卡斯木, 哈丽丹·热依木,阿布力孜·阿布杜拉
. 2012, 24(3):  222-226.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.013
摘要 ( 2502 )   PDF (1008KB) ( 881 )  
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目的: 血清蛋白组学在肿瘤标志物的筛查研究中被广泛应用,本研究采用双向荧光差异电泳联合质谱技术,寻找与维吾尔族妇女宫颈鳞癌相关的血浆蛋白候选肿瘤标志物。方法:收集维吾尔族妇女宫颈病变血浆标本 (慢性宫颈炎患者22例,宫颈癌早期患者26例),制备血浆低丰度蛋白质组样品,通过蛋白质双向荧光差异电泳技术分离与鉴别分析,筛选出慢性宫颈炎与宫颈癌早期患者两组间血浆差异表达的蛋白位点,运用质谱和生物信息学技术对其进行鉴定和功能识别分析。结果:确定了宫颈炎和早期宫颈鳞癌患者的血浆低丰度蛋白质组差异荧光电泳图谱,筛选出43个差异表达蛋白位点,通过质谱技术鉴定出16 种蛋白质,在宫颈鳞癌早期患者血浆中有7个蛋白上调表达、9个蛋白下调表达。通过生物信息学分析,差异蛋白涉及的通路主要有补体和代谢相关蛋白和酶类。结论:本研究针对新疆维吾尔族妇女宫颈癌及宫颈炎患者,展开血浆低丰度蛋白组表达水平的研究,鉴定出多种差异表达蛋白质,为宫颈癌的早期诊断及癌变机制研究提供了依据。
维吾尔族妇女宫颈癌发生与EBV及HPV感染的关系
阿比班·阿克拉,米克热依·玉山江,玛依努尔·尼牙孜,阿布力孜·阿布杜拉,阿比达·阿布都卡德尔
. 2012, 24(3):  227-230.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.014
摘要 ( 3244 )   PDF (2132KB) ( 1144 )  
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目的: 探讨维吾尔族妇女宫颈癌发生过程中EB病毒(Ebstein-Barr virus,EBV)及人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染的作用及其意义。方法:收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN) Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ和宫颈鳞癌患者福尔马林浸泡与石蜡包埋组织标本共178例,提取DNA并采用PCR方法对EBV和HPV DNA进行检测;用免疫组织化学方法检测宫颈癌EBV蛋白表达。结果:病毒DNA检测结果显示,宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ和宫颈癌患者各组HPV DNA检出率依次是2.5%、12.5%、68.0%、96.4%,EBV DNA为0、3.1%、28.0%和69.6%,其中宫颈炎组与CINII~III和宫颈癌组间的差异具有统计学意义(P均<0.05),但宫颈炎与CINI组间的差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈病变病理进程不仅伴随着 HPV及EBV DNA阳性检出率梯度上升,而且与HPV和EBV双重感染检出率增高呈正相关(r =0.46, χ 2=82.50,P<0.01)。对宫颈癌组织进行免疫组织化学分析,发现EBV DNA检测阳性标本中EBV蛋白阳性表达检出率为89.7%(34/39),而阴性标本中蛋白表达阳性率为6%(1/17)。结论:维吾尔族妇女宫颈癌的发生与发展可能与HPV和EBV双重感染密切相关。
检测研究
川芎嗪对辐射所致小鼠氧化应激损伤的保护作用
彭 洁,李玉亮,吴 昊,梁 欣,海春旭
. 2012, 24(3):  231-234.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.015
摘要 ( 2884 )   PDF (429KB) ( 807 )  
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目的: 研究川芎嗪对辐射所致小鼠氧化损伤的预防和治疗作用。方法:采用60Co-γ射线5 Gy全身单次照射小鼠造模,分别于照射前(预防)和照射后(治疗)每天腹腔注射川芎嗪31.2 mg/kg,连续给药10 d,并设生理盐水阴性对照组,检测各组小鼠肝组织中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、还原型谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)及总抗氧化力 (T-AOC)的变化。结果:与阴性对照组比较,60Co-γ射线照射可显著增加小鼠肝组织中MDA的含量 (P<0.05),降低SOD、GSH、GPx的活性 (P<0.05),使肝组织T-AOC下降 (P<0.05),但对CAT的活性无显著影响 (P>0.05)。与照射组比较,照射前和照射后给予川芎嗪,均可降低小鼠肝组织MDA含量 (P<0.05),使SOD、GSH、GPx的活性升高 (P<0.05)、肝组织T-AOC升高 (P<0.05),对CAT的活性仍无显著影响 (P>0.05)。结论:川芎嗪具有较好的抗氧化作用,预防和治疗性用药均可降低辐射所致小鼠的氧化应激损伤。
一先天性头皮单纯少毛症家系CDSN 基因突变分析
姜海鸥,袁 玲全,庆丽,申新田,黄雪霜
. 2012, 24(3):  235-237.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.016
摘要 ( 2361 )   PDF (656KB) ( 958 )  
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目的: 对一个先天性头皮单纯少毛症家系编码角化桥粒素的CDSN基因进行突变分析,旨在寻找致病原因。方法:收集家系中4例患者及正常家系成员的详细临床资料和外周血样本,提取基因组DNA,采用PCR技术扩增CDSN基因的2个外显子,用直接双向测序、BLAST比对进行突变分析。结果:在CDSN基因中发现了7个变异序列,其中4个已被报道为多态,3个为新发现的突变。所有序列变异均存在于患者的正常亲属中,与疾病表型无共分离现象。结论:排除了CDSN外显子突变导致该家系先天性头皮单纯少毛症的可能性。
综述
T细胞活化中微丝骨架及肌动蛋白相关蛋白的调控
齐雪松,苏 旭
. 2012, 24(3):  238-240.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.017
摘要 ( 1975 )   PDF (314KB) ( 1960 )  
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细胞形态是细胞行使功能的前提,微丝骨架是维持细胞形态的主角。 在T细胞中,微丝具有响应T细胞抗原受体介导的信号、促使T细胞极化、协助T细胞受体募集、稳定信号分子等作用。T细胞活化是其行使功能的必要步骤,需要两种信号协同刺激,刺激信号促使微丝骨架重构使T细胞极化,形成免疫突触,便于信号转导。这些过程均离不开微丝骨架及肌动蛋白相关蛋白(actin related proteins,Arps)的参与和调节。因此,本文着重介绍微丝骨架及肌动蛋白相关蛋白在T细胞活化中的调控作用。
胞质分裂阻滞微核细胞组学试验法的研究进展
向梦龙,敖 琳,刘晋祎 ,曹 佳
. 2012, 24(3):  241-244.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2011.03.018
摘要 ( 1810 )   PDF (771KB) ( 1830 )  
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胞质分裂阻滞微核试验法 (cytokinesis block micronucleus test,CBMNT)是一种常见的微核试验法,近年来发展成为检测DNA损伤和错误修复、染色体不稳定、有丝分裂异常、细胞死亡和生长抑制的一种有效的细胞组学 (cytome)检测方法。本文就CBMNT近年来的方法学及应用进展作一综述。