以生物学效应机制为基础的削量一反应(BBDR)模型是毒性反应中生物学过程的数学描述。作为对非致癌化学物危险评价常规方法的一种改进．它可将毒作用的教应机制和触量一反应关系联系起来，因而能大大降低评价结果的不确定度．本文以5一氟尿嘧啶(5一Fu)为例，舟绍一利l对大鼠发育毒性评价的BBDR模型．结果表明，胚胎组织中胸苷酸合成酶抑制、DNA合成障碍和茸I}匏周期阻滞是5一Fu发育毒作用中的关键性事件；其剂量一反应关系可通过BBDR模型给出准确的预测。

应用人精子去透明带卵异种体外受精技术, 对第1 次卵裂中期相的染色体畸变进行分析。实验分为对照、咖啡因后处理、丝裂霉素C(MMC) 预处理、预处理同时加咖啡因后处理4个组。咖啡因组、MCC组和MMC+咖啡因组染色体结构畸变精子率依次为27.0% , 23.0% 和45.0% ; 断裂均数依次为0.72, 0.60 和 1.65, 各组上述参数均高于空白对照(8.0% , 0.14), 差异非常显著(P<0.01,P< 0.01)。与MCC组和咖啡因组相比较,MMC+咖啡因组诱发的染色体型和染色单体型畸变均明显增加,以染色体型畸变增加更为明显(P <0.01, P<0.01) 。结果显示, 咖啡因可诱发人精子染色体畸变并能通过抑制金黄地鼠卵母细胞的复制前和复制后修复系统, 有效地增强MM C 对人精子染色体的诱变效应。

本研究1.建立了检测PCD的石蜡切片原位末端标记( ISEL ) 法, 在石蜡切片原位用免疫组化法标记核DNA,使 PCD 细胞呈黄色或棕黄色的阳性着染, 在普通光学显微镜下即可鉴别。本实验用加热和蛋白酶K同时处理背景, 使非特异性染色几乎不存在; 使用过氧化物酶—显色系统缩短时间2小时,提高了筛检DAB 速度。2.应用ISEL法研究外来激素对大鼠睾丸细胞的影响,结果发现GnRH-A是一个促凋原,具有明显的生殖毒性。

本文通过人巨细胞病毒(HCMV)分离、套式聚合酶反应(PCR)及限制酶切分析、弓形虫分离及一次PCR,对不明原因的流产、死胎组织进行HCMV及弓形虫检测。结果发现,28 份流产、死胎组织中,1例死胎肺组织HCMV DNA 阳性, 病毒分离阴性;1例胎儿心、肺、脑、肝、肾、眼组织弓形虫DNA阳性,其脑、肺、眼、肝组织经动物接种后,在小白鼠腹水中找到弓形虫滋养体,但心、肾结果阴性。提示:临床上有些不明原因的流产、死胎是由于胎儿感染HCMV或弓形虫所致。PCR技术较常规病原体分离敏感、快速,适合于HCMV/弓形虫感染所致流产、死胎的早期诊断。

本研究在建立大鼠睾丸支持细胞体外培养方法的基础上, 观察了不同浓度的硫丹、氯化镉对睾丸支持细胞的毒作用, 发现它们对大鼠睾丸支持细胞均有毒作用, 且有良好的时间效应和剂量效应关系。另外还研究了皮下注射 20Λmol/kg 的氯化镉, 24h 后对所分离培养支持细胞存活的影响, 发现体内给予氯化镉后, 大鼠的支持细胞在体外培养4h 后存活率明显低于对照组 (P< 0. 05) 。随着培养时间的延长, 其存活率差距逐渐增大, 说明氯化镉可以透过血睾屏障到达支持细胞。本研究表明大鼠睾丸支持细胞体外测试系统具有快速、简便、终点明确、良好体内外一致性等优点, 可用于雄性生殖毒物的筛试和毒作用机理的评价。

本文以小鼠为实验材料,预先给低水平电离辐射,3—6h 再次接受大剂量X线全射照射, 观察低剂量辐射对大剂量诱变作用的拮抗作用。实验结果证明: 以染色体畸变为观测终点, 则骨髓细胞和初级精母细胞染色体畸变均低于单纯大剂量组 (P< 0. 01) 。雄鼠预先经0.05Gy 线处理6h 后照射2.0Gy 线, 在9wk 内的受育率明显高于单纯大剂量照射组(P< 0.01) 。说明低水平电离辐射不仅具有降低小鼠遗传物质的损伤作用, 而且可以提高受大剂量照射小鼠的生育能力。

为了探讨辐射适应性反应的远期效应, 本文以小鼠为实验材料, 通过检查仔鼠出生后的死亡率及某些生理学、免疫学指标, 发现D1照射后远期小鼠出现了某些适应性反应, 表现为仔鼠的死亡率降低、体重增加、照后时间过开眼时间提前, 但仔鼠成熟后的免疫学指标及其它一些大体指标均未出现适应性反应, 是否与D1长有关还需进一步探讨。

体内实验资料表明氟和砷均能透过胎盘屏障进而干扰胚胎的正常生长发育和形态分化。但关于氟、砷的致畸机理, 是否因母体毒性而伴随胚胎发育异常等一系列问题, 尚无具有说服力的结论。因此,本研究用New等人建立的体外全胚胎培养(W hole Embryo Culture W EC) , 模型并结合电镜技术等探讨了氟砷单独和联合对SD大鼠卵黄囊及胚胎的影响,体外染毒剂量分别为,氟组: 0,2.5,5.0,10,20Λg/ ml; 砷组:0,0.5,1.0,2.0,3.0 Λg/ m l; 氟+ 砷组: 0+ 0,2.5+ ,2.5+1.0,2.5+3.0Λg/ml,10+0.5,10+1.0,10+3.0Λg/ml;20+/0.5,20+1.0,20+3.0Λg /ml, 各剂量组均随立刻离心血清一起加入各培养瓶中。实验结果表明, 随着体外染氟或染砷剂量的增高, 对卵黄囊胎盘的损害越加明显,呈现剂量—反应关系。在氟砷联合染毒组,3×4 析因分析结果表明,二者共存时其交互作用的主效应为协同作用(synergism) ; 各联合组卵黄囊胎盘及胚胎所受损害的程度均大于相应的单独染氟组和染砷组。本实验结果提示: 卵黄囊胎盘超微结构的病理改变是氟或砷致畸机理之一; 氟与砷协同作用的机理与卵黄囊结构和功能受损有一定关联。

用红霉素 N—脱甲基酶活性测定法检测了正常SD大鼠和经苯巴比妥(PB)或地塞米松(DEX)诱导后大鼠肝微粒体细胞色素 P450 3A 的活性。结果发现雌雄之间均存在性别差异, 未诱导的雄鼠 P450 3 A活性是雌鼠的3.7倍。经PB或DEX诱导后, 雌雄之间的差异缩小到1.5—2 倍。其原因主要是对雌鼠的诱导倍数明显大于对雄鼠的诱导倍数。

环磷酰胺(cyclophosphamide CP),分成1.5,3 和 6mg/kg体重三个剂量组,同时设生理盐水对照。小鼠妊娠 d5-15 皮下注射给药,每天 1 次。实验组及对照组给药体积均为0.15ml/10kg 体重。结果表明,6mg/kgCP对母鼠和胚胎有明显的毒性,可诱发胎鼠明显的外观、骨骼和内脏畸形。3 mg/kg对胎鼠有一定的胚胎毒性和致畸胎作用。CP对小鼠的无致畸作用剂量为1.5mg/kg体重以下。

选用 SD大鼠对格兰西隆进行了致畸性研究,试验设 0.25,1.0 和 4.0g/mg即(低、中、高) 3个剂量,同时设生理盐水对照组, 采用尾静脉注射给药。结果表明:孕鼠在染毒期间母体增重随药物剂量升高略有降。高剂量组的吸收胎率、死胎率与阴性对照相差非常显著(P< 0.01),中剂量组中有19 只外观畸形,各剂组活胎的身长、尾长和体重低于阴性对照P< 0.01)。提示药物在1mg/kg剂量以上无明显母体毒性时对胎生存和生长发育有影响, 并可能有致畸作用。

易硫磷为新型有机磷类农药。本文在一般毒性试验及致突变试验的基础上, 按传统致畸方法进一步作致畸试验。易硫磷设3 个剂量组:2.0,6.6,20.0 mg/kg,3个对照组: 溶剂对照(吐温80 和花生油) 、阴性对照(蒸馏水) 、阳性对照( 敌枯双1.0mg/kg)。结果:高剂量组孕鼠体重增长明显低于中、低剂量组及阴性对照组,差异均显著(P<0.05) , 中、低剂量组与阴性对照组比较差异不显著(P> 0.05);中、高剂量组的颅骨、枕骨的骨化迟缓及3个剂量组的胸骨发育迟缓均高于阴性对照组,其差异均显著(P<0.05) 。结果表明易硫磷对胎鼠骨骼发育有一定的影响。

本文用Ames试验、小鼠微核试验和中国仓鼠肺细胞体外染色体畸变试验研究了HG提取物的致突变作用。用受孕小鼠研究了HG 提取物的致畸胎作用。结果表明,Ames试验在10mg/皿浓度下未见回复突变作用; 微核试验在10.5g/kg 剂量下未诱发微核率增高; 染色体畸变试验在 300Λg/ml浓度下不出现细胞染色体畸变率升高;小鼠致畸胎试验在9g/kg 剂量下不存在胚胎毒性和致畸毒性。

本研究表明: 褪黑素胶囊大,小鼠急性经口毒性半数致死量(LD 50) , 雌雄两性均大于10g/kgB.W.,属实际无毒类,Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性。在本试验条件下,褪黑素胶囊为实际无毒, 未显示有致突变作用。

本文用大鼠一般生殖毒性试验和致畸敏感期毒性试验研究了九芝调脂素对大鼠妊娠前期、妊娠初期和器官形成期的毒性及致畸敏感期毒性作用。试验分别设 50、316、2000mg/kg/d三个剂量组,一般生殖毒性试验中,雄性大鼠连续给药80d直至交配成立,雌性大鼠交配前14d至交配成立后10d即胚胎器官形成初期 连续给药,致畸试验则在妊娠6—15d连续给药。结果显示,一般生殖毒性试验的中、低剂量组孕鼠着床率明显降低, 高、中、低剂量组胎鼠胸骨缺失数明显增多, 致畸试验仅在低剂量组出现胸骨缺失明显高于对照组,无剂量反应关系。九芝调脂素对亲代鼠的受孕率、体重及胎鼠的生存和发育未见不良影响, 亦未见其诱发胎鼠的外观、内脏及骨骼畸形。