OBJECTIVE:  Polygonum  multiflorum  Thunb(P.  multiflorum)  has  been  used  in  the  treatment  of  diarrhea  and  detoxification  in  China.  Our  previous  studies  showed  that  R50  part  which  was  separated  from  P.  multiflorum  had  little  toxicity  to  normal  cells  but  certain  toxicity  to  cancer  cells.  This  study  aimed  to  separate  the  component  which  has  different  effect  on  normal  and  cancer  cells  in  R50  part  and  investigate  its  anticancer  mechanisms.  METHODS：Sephadex  LH-20，TLC  chromatography  and  reverse  silica  gel  chromatography  were  employed  to  separate  and  purify  the  emodin-8-O-β-D-glucopyranoside(PMEG).  The  purity  was  evaluated  by  TLC  and  HPLC.  The  viability  of  cells  treated  with  PMEG  at  different  concentration  and  time  was  detected  by  MTT  assay.  Morphological  changes  in  cells  and  nuclei  were  examined  after  Giemsa  staining.  Cell  cycle  and  apoptosis  were  assayed  by  flow  cytometry.  RESULTS：The  purity  of  PMEG  separated  from  P.  multiflorum  was  96%.  MTT  method  showed  that  PMEG  had  significant  growth  inhibitory  effects  on  HepG2，HT29，and  SH-SY5Y  cells(P<0.05)，and  showed  concentration  dependence  in  HepG2  cells  and  HT29  cells(r=0.987，P=0.002；r=0.992，P=0.008).  But  PMEG  had  no  effects  on  L02、HCT116  and  A549  cells.  PMEG  (200  μg/mL)  showed  much  more  growth  inhibition  in  HepG2  cells  to  L02  cells，and  induced  HepG2  cells  apoptosis  and  G2-M  phase  block.  CONCLUSION：PMEG  was  one  of  the  main  active  anticancer  component  separated  from  R50  part  of  P.  multiflorum，and  had  different  effects  on  human  liver  L02  cells  and  liver  cancer  HepG2  cells，which  may  be  related  to  PMEG-induced  apoptosis  and  G2-M  block  in  HepG2  cells.

OBJECTIVE:  To  analyze  LncRNA  differential  expression  in  tumoral  and  normal-paired  tissues  of  esophageal  squamous  cell  carcinoma  in  Huaian  and  to  explore  the  role  of  tumor-associated  LncRNAs  in  the  pathogenesis  of  esophageal  squamous  cell  carcinoma.  METHODS：Total  RNA  was  extracted  from  3  patients'  esophageal  cancer  tissues  and  corresponding  adjacent  normal  tissues.  Then，each  sample  was  amplified  and  transcribed  into  fluorescent  cRNA  with  a  random  priming  method.  The  labeled  cDNAs  were  hybridized  onto  the  Human  LncRNA  Array  v2.0  (8×60K，Arraystar).  After  being  scanned，Agilent  GeneSpring  GX  v11.5.1  was  used  to  screen  the  differentially  expressed  LncRNAs.  qRT-PCR  was  used  to  analyze  LncRNA  expression  in  cells  and  tissues  of  esophageal  cancer.  RESULTS：Among  the  1  019  significantly  differentially  expressed  LncRNAs  (Fold  Change≥2.0，P≤0.05)，there  were  399  LncRNAs  overexpressed  and  620  under- expressed.  GO  analysis  and  Pathway  analysis  showed  that  the  differentially  expressed  mRNAs，regulated  by  LncRNAs，were  mainly  associated  with  the  cell  cycle，cell  differentiation， protease  activities  etc.  Compared  to  LncRNA  differences  related  to  the  Gibb's  esophageal  expression  profile  analysis，LncRNA-UCA1  might  participate  in  esophageal  cancer  development.  qRT-PCR  results  showed  that  LncRNA-UCA1  was  significantly  under-expressed  in  esophageal  cancer  cells  and  esophageal  cancer  tissues  when  compared  with  immortalized  esophageal  epithelial  cell  and  adjacent  normal  tissues.  CONCLUSION：A  total  of  1  019  significantly  differentially  expressed  LncRNAs  were  identified，and  LncRNA-UCA1  may  be  a  potential  biomarker  in  the  early  detection  and  diagnosis  of  esophageal  cancer.

OBJECTIVE:  To  isolate  the  active  component  of  Arca  subcrenata  protein，investigate  the  antitumor  and  immune  activities  in  vitro.  METHODS：The  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  extracted  by  ice  water  and  ammonium  sulfate  precipitation.  Cytotoxicity  in  human  rectal  concinoma  HT-29  and  other  cell  lines  treated  with  Arca  subcrenata  protein  active  component  of  50，100，200，400  μg/mL  for  24，48  and  72  h.  Morphology  changes  in  living  cells  were  examined  under  the  inverted  phase  contrast  microscope.  Cellular  and  nuclear  morphological  changes  in  human  tumor  cells  treated  with  the  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  studied  by  Giemsa  staining.  Cell  cycle  and  apoptosis  in  HT-29  cells  were  determined  by  flow  cytometry.  The  growth  of  mice  macrophage  RAW264.7  treated  the  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  detected  by  MTT  assay.  The  phagocytosis  of  mice  macrophage  RAW264.7  treated  with  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  determined  by  neutral  red.  The  NO  production  by  RAW264.7  was  detected  by  Griess  method.  RESULTS：Arca  subcrenata  protein  active  component  inhibited  the  survival  of  many  tumor  cell  lines  in  concentration  and  time-dependent  manners.  Arca  subcrenata  protein  active  component  induced  cell  were  cycle  arrest  at  G2-M  cycle  phases  and  apoptosis  in  HT-29  cells.  It  also  showed  that  multinucleated  cells  were  increased.  Under  the  concentration  of  50-100  μg/mL，Arca  subcrenata  protein  active  component  could  stimulate  the  growth  of  RAW264.7  cells，enhance  phagocytosis  and  NO  production  activity.  CONCLUSION：Arca  subcrenata  protein  active  component  demonstrated  anti-tumor  activities  due  to  its  immune  activation  and  the  fact  that  it  induced  cell  cycle  arrest  at  G2-M  cycle  phases  and  apoptosis.

OBJECTIVE:  To  investigate  the  expressions  of  Nrf2  and  Bcl-2  and  clinical  pathological  features  in  esophageal  carcinoma  tissues.  METHODS：Immunohistochemistry  (SP)  and  Western  blot  were  used  to  detect  the  expressions  of  Nrf2  and  Bcl-2  in  85  specimens  of  esophageal  carcinoma  tissues  and  normal  esophageal  tissues  (5  cm  distant  to  the  margin  of  esophageal  cancer).  RESULTS：The  positive  rates  of  Nrf2  and  Bcl-2  protein(83.5%  and  72.9%， respectively)  in  esophageal  carcinoma  tissues  were  both  higher  than  normal  tissues(14.2%  and  5.7%， respectively)(P< 0.01).  The  relative  contents  of  Nrf2  and  Bcl-2  protein(0.855±0.078  and  0.801±0.075，respectively)  in  esophageal  carcinoma  tissues  were  both  higher  than  normal  tissues  (0.135±0.011  and  0.173±0.040，respectively) (P<0.01).  There  was  a  significant  difference  in  Nrf2  protein  expressions  between  lesion  length，depth  of  invasion， histological  grade  and  lymph  node  metastasis  (P<0.05)，but  not  correlated  with  lesion  location  and  general  classification  of  tumors  (P>0.05).  Spearman  analysis  showed  that  Nrf2  protein  expression  was  positively  correlated  with  Bcl-2  protein  expression  (r=0.515，P=0.000).  CONCLUSION：Nrf2  and  Bcl- 2  protein  expression  could  be  considered  as  biological  indicators  of  the  malignant  potential  of  esophageal  squamous  carcinoma.

OBJECTIVE:  To  explore  the  effects  of  norcantharidin  (NCTD)  on  myocardial  ischemia-reperfusion  injury  (IRI)  and  its  possible  mechanisms  in  rats.  METHODS：The  effect  of  different  concentrations  of  NCTD  on  primary  rat  cardiomyocytes  and  H9c2  cells  was  examined  by  MTT  assay.  The  apoptosis  effect  of  NCTD  pretreatment  on  IRI  is  detected  by  flow  cytometry.  Ischemia-reperfusion  myocardial  cell  morphology  of  NCTD  pretreatment  was  examined  by  Giemsa  and  Trypan  blue  staining.  The  expression  of  programmed  cell  death  factor  4  (Pdcd4)  in  NCTD-pretreated  ischemia-reperfusion  myocardial  cell  was  examined  by  Western  blot.  The  expression  of  microRNA-21(miR-21)  in  NCTD-pretreated  ischemia-reperfusion  myocardial  cell  was  assessed  by  RT-qPCR.  RESULTS：The  IRI  of  primary  rat  cardiomyocytes  and  H9c2  was  inhibited  by  NCTD  (P<0.01).  Cell  death  caused  by  IRI  was  significantly  inhibited  by  NCTD.  NCTD  could  effectively  inhibit  Pdcd4  protein  up-regulation  and  miR-21  down-regulation  caused  by  IRI  in  rat  cardiomyocytes.  CONCLUSION：Myocardial  IRI  could  be  inhibited  by  NCTD  treatment  in  concentration  of  0.1-0.5  μg/mL，and  miR-21-Pdcd4  signaling  pathways  may  participate  in  myocardial  IRI  and  the  inhibition  of  IRI  by  NCTD.

OBJECTIVE:  To  study  the  cyto-and  genotoxicities  of  silver  nanoparticles  (silver-NPs)  on  Chinese  hamster  lung  fibroblast  cell  line  (CHL)  and  explore  their  possible  mechanisms.  METHODS：CHLs  were  exposed  to  gradient  concentrations  of  silver-NPs  2.5，5.0，10.0，20.0，40.0  and  80.0  μg/mL，then  MTT  assay  was  employed  to  reveal  the  IC50  which  was  used  to  evaluate  the  cytotoxicity  potential  of  silver-NPs.  Cell  cycle  analysis  was  performed  with  PI  dye，and  proliferation  indexes  were  calculated  as  well.  Apoptosis  was  detected  with  Annexin  V  FITC- PI  dye，morphology  changes  after  exposure  and  forward  scatter  channel  (FSC)  and  side  scatter  channel(SSC)  were  recorded  simultaneously.  Chromosomal  aberrations  were  analyzed  by  reading  slides  with  metaphases  stained  by  Giemsa.  RESULTS：Cytotoxicity  on  CHL  was  positively  associated  with  the  concentration  of  silver-NPs  (r=0.804，P<0.05)， IC50  was  21.68  μg/mL.  Morphology  changes  were  clearly  visible  after  CHLs  were  treated  with  22.0  μg/mL  silver-NPs  for  24  h.  Significantly  enhanced  SSC  signal  existed  in  CHL  populations  after  periods  of  exposure  to  silver-NPs，which  implied  uptake  of  silver-NPs.  CHL  cycle  was  found  to  be  arrested  in  G2/M  phase，and  cell  proliferation  index  as  well  as  G0/G1  phase，S  phase  were  significantly  changed  compared  with  vehicle  control  (P<0.01).  Furthermore，apoptosis  was  found  to  be  significantly  increased  after  22.0  μg/mL  silver-NPs  exposure  for  24  h  (P<0.01).  Silver-NPs  exposure  also  induced  CHL  chromosome  structure  aberration  with  more  than  5%  incidence  at  all  tested  concentrations  (P<0.01).  Tetraploid  in  high  and  middle  concentrations- treated  groups  were  10  times  higher  than  the  vehicle  control(P<0.01).  CONCLUSION：Silver-NPs  showed  significant  cytotoxicity  and  genotoxicity  in  CHL，where  mitochondrial  dysfunction  and  apoptosis  might  play  important  roles.

OBJECTIVE：To  observe  the  effect  of  kojic  acid  (KA)  on  the  disequilibrium  of  Treg/Th17  induced  by  4  Gy  γ  ray  irradiation，in  order  to  provide  new  ideas  for  the  study  of  protective  mechanisms  of  KA  on  immune  injury  induced  by  radiation.  METHODS：Male  C57BL/6  mice  were  randomly  divided  into  control  group，radiation  group，KA  low  group  and  KA  high  group.  Mice  in  KA  low，high  group  were  treated  with  75  or  300  mg/kg  KA  subcutaneously，respectively， 27  h  before  irradiation.  Mice  in  radiation  group  and  KA  low，high  group  received  4  Gy  γ  ray  for  whole  body  irradiation(WBI)  and  control  group  received  sham  irradiation.  After  WBI，peripheral  blood  count，spleen/thymus  index  and  percentage  of  splenic  regulatory  T  cells  (Tregs)  and  Th17  cells  were  measured.  RESULTS：Peripheral  WBC  count  in  mice  was  significantly  decreased  after  4  Gy  γ  ray  irradiation.  WBC  count  in  KA  high  group  recovered  at  19  d  post  irradiation，while  that  in  radiation  and  KA  low  groups  did  not  recover.  Mouse  thymus  and  spleen  index  in  radiation  and  KA  low，high  groups  were  significantly  decreased  post  radiation，but  thymus  and  spleen  index  in  KA  high  group  was  significantly  higher  than  that  of  radiation  group.  The  proportion  of  splenic  Tregs  in  radiation  group  and  KA  high  group  was  significantly  higher  than  that  of  control  group  at  4  d  post  irradiation.  The  proportion  of  Th17  in  radiation  group  increased  significantly，but  the  proportion  of  Th17  in  KA  high  group  did  not  change  markedly，and  was  much  lower  than  that  of  radiation  group.  Because  of  no  increase  of  Th17  in  KA  high  group，the  ratio  of  Treg/Th17  was  significantly  raised  at  4  d  post  irradiation，leading  to  an  abvious  shift  towards  Tregs.  CONCLUSION：KA  could  significantly  alleviate  immune  injury  and  inhibit  the  rise  of  Th17  induced  by  γ  ray  irradiation，causing  Treg/Th17  towards  to  Tregs.  These  indicated  that  KA  could  play  a  protective  role  by  inhibiting  the  inflammatory  induced  by  irradiation，thus  reduce  the  damage  effect  of  inflammatory  responses  in  the  body.

OBJECTIVE:  To  explore  the  protection  of  kojic  acid  (KA)  on  CHO  cells  from  radiation.  METHODS：MTT  assay  was  used  to  detect  cell  viability  in  the  following  conditions：CHO  cells  were  exposed  to  different  intensities  (0-20  Gy)  of  60Co  γ  ray，and  were  cultured  for  24，48  and  72  h.  CHO  cells  were  treated  with  KA  (0、0.01、0.1、1、10、100  μg/mL，respectively)  for  1.5  h  before  exposure  to  12  Gy  γ  rays，and  were  cultured  for  24，48  and  72  h，respectively；CHO  cells  were  treated  with  KA  at  1  μg/mL  for  1.5  h  prior  to  exposed  to  6，12  and  16  Gy  γ  ray，then  were  cultured  for  24  h.  RESULTS：CHO  cell  viability  was  decreased  when  they  were  exposed  to  γ  ray  in  a  dose-response  manner.  Cell  viability  was  significantly  increased  when  treated  with  0.01-10  μg/mL  KA  before  exposure  to  12  Gy  γ  ray，with  a  peak  effect  at  1  μg/mL.  Pretreatment  of  1  μg/mL  KA  could  significantly  improve  the  viability  of  CHO  cells  exposed  to  6，12，16  Gy  γ  rays.  CONCLUSION：Pretreatment  with  KA  significantly  improved  the  viability  of  irradiated  CHO  cells  by  its  protective  effect  from  radiation  damage.

OBJECTIVE:  To  compare  the  effects  of  normal  cadmium  sulfide  (CdS)  and  Nano-CdS  on  the  male  reproductive  system  of  mice，and  to  investigate  the  mechanisms  of  reproductive  toxicity.  METHODS：36  male  ICR  mice  were  randomly  divided  into  control  group，and  two  experimental  groups  which  were  exposed  to  50  mg/kg  Nano-CdS  and  CdS，respectively.  Mice  in  control  group  were  exposed  to  same  volume  of  physiological  saline  .  After  45  days，levels  of  cadmium  accumulation  in  testis  were  determined  directly  by  GF  AAS.  The  rate  of  sperm  abnormality  was  also  calculated.  Serum  testosterone  levels  were  measured  by  enzyme-linked  immunosorbent  assay  (ELISA)，expression  levels  of  P450scc  and  P450-17α  mRNA  were  determined  by  real-time  PCR.  RESULTS：Contents  of  cadmium  in  Nano-CdS  and  CdS  groups  were  (425.46±73.89)  and  (183.59±32.46)  ng/g，respectively，and  were  higher  than  the  control  (80.18±13.29)  (P<0.05).  Sperm  deformity  rate  in  CdS  group  (2.28%)  was  significantly  higher  than  the  control  (1.48%)  (P<0.05)，Nano-CdS  group  (1.73%)  was  also  increased.  Concentrations  of  testosterone  in  CdS  and  Nano-CdS  groups  were(12.31±1.10)  and  (15.88±5.41)  ng/dL，respectively，and  were  significantly  lower  than  control  group  (68.41±11.36)  ng/dL (P<0.05).  Expression  levels  of  P450scc  mRNA  in  Nano-CdS  and  CdS  groups  were  (0.50±0.11)  and  (0.84±0.48)，respectively， expression  levels  of  P450-17α  mRNA  were  (0.51±0.13)  and  (0.72±0.06)，respectively.  Except  P450scc  mRNA  in  CdS  group，the  mRNA  expression  levels  in  experimental  groups  were  significantly  lower  than  control  group  (P<0.05).  CONCLUSION：Content  of  cadmium  accumulation  in  testis  and  sperm  deformity  rate  were  increased  by  exposure  to  Nano-CdS  and  CdS，with  a  significant  reduction  in  serum  testosterone  levels  and  expression  levels  of  P450scc  and  P450-17α  mRNA.

OBJECTIVE:  To  investigate  the  expression  of  HER-2，MMP-2，IGF-1  and  VEGF  with  cervical  cancer  for  clinical  assessment.  METHODS：We  collected  cervical  tissue  samples  from  Uygur  women  with  cervical  lesions  (invasive  cervical  cancer，ICC：38  cases，cervicitis：32  cases).  The  mRNA  and  protein  expression  levels  of  HER-2，MMP-2，IGF-1and  VEGF  in  tissues  from  two  groups  were  examined  by  real-time  fluorescence  quantitative  PCR  (Q-PCR)  and  Western  blot.  RESULTS：Compared  with  normal  control  group，the  expressions  of  HER-2，MMP-2，IGF-1  and  VEGF  in  ICC  group  were  increased  to  different  extent  at  mRNA  level，and  the  difference  was  statistically  significant  (P<0.05  or  P<0.01).  At  protein  level，the  expressions  of  HER-2，MMP-2  and  VEGF  in  ICC  group  were  increased  to  different  degree，and  the  difference  was  statistically  significant  (P<0.05  or  P<0.01)，but  there  was  no  statistically  significant  difference  in  IGF-1  expression  (P>0.05).  CONCLUSION： The  excessive  expressions  of  HER-2，MMP-2，IGF-1  and  VEGF  may  be  related  to  the  occurrence  and  development  of  cervical  cancer.

OBJECTIVE:  After  exploring  the  clinical  features  and  resuscitation  methods  of  adverse  drug  reaction  (ADR)  caused  by  medicines  containing  Alkaloid  components，the  authors  analyzed  the  reasons  of  this  kind  of  ADR.  METHODS：The  authors  set  up  the  ADR-database  through  collecting  and  collating  the  documents  containing  the  key  words  “Alkaloids”  and  “ADR”  from  CNKI  database，NCBI  database  as  well  as  related  books，then  analyzed  the  data  using  SPSS  17.0.  RESULTS：Aconitine  in  Chinese  medicines  is  most  likely  to  cause  adverse  durg  reaction.  Alkloid  drugs  are  often  used  in  therapy  of  pains  and  infection，where  they  could  also  cause  rapidly-developing  ADR  at  the  same  time，with  a  high  incidence  in  middle-aged  and  the  elderly.  Over  dosage  and  erroneous  ingestion  happened  most  frequently  among  the  various  reasons  leading  to  ADR  and  neurological  damage  accounted  for  a  high  percentage  of  the  ADR  during  clinical  therapy.  CONCLUSION：The  author  made  suggestions  on  the  adminstration  of  Chinese  medicines  containing  alkaloids：Firstly，we  should  pay  attention  to  the  clinical  dosage，followed  by  close  monitoring  the  patients.  Last  but  not  least，we  should  deal  with  the  suspected-ADR  timely.

OBJECTIVE:  In  order  to  evaluate  the  genetic  toxicity  of  passiflora  fruit  juice，the  mice  dominant  lethal  test  was  conducted.  METHODS：Male  NIH  mice  were  gavaged  for  5  consecutive  days  with  7.2-28.8  g/kg  passiflora  fruit  juice，with  positive  and  negative  controls.  Then  individual  males  were  mated  sequentially  at  predetermined  intervals  with  two  virgin  females.  Females  were  sacrificed  on  the  13th-14th  day  of  pregnancy  and  the  number  of  embryo  implantated，live  births  and  stillbirths  were  recorded.  All  data  were  evaluated  by  appropriate  statistical  methods.  RESULTS：For  cyclophosphamide  and  mitomycin  C  groups，all  indicators  in  different  weeks  were  abnormal  in  addition  to  the  number  of  nidation(P<0.05  or  P<0.01).  For  negative  and  treated  groups，mating  rate  (>133％)，pregnancy  rate  (60 % -93％)，number  of  nidation  (>8.6)，average  number  of  stillbirths  (<0.8)  and  live  births  (>8.1)  were  all  in  the  normal  ranges.  There  were  no  significant  increase  in  stillbirth  rate，dominant  lethality  and  the  mutation  index  nor  reduction  in  fertilized  survival  of  eggs  (P>0.05).  CONCLUSION：7.2-28.8  g/kg  passiflora  fruit  juice  did  not  show  a  positive  response  in  mice  dominant  lethal  test，indicating  that  the  possibility  of  genetic  toxicity  was  small.

OBJECTIVE:  To  study  the  long-term  toxicity  of  anticancer  drug  Chelidonium  majus  by  continuous  administration.  METHODS：Wistar  rats  were  treated  with  dosage  of  12.6，8.4，5.6，3.7  mg/kg  of  the  drug  and  negative  control  via  i.p.  for  6  days，then  8  days  off  treatment  to  complete  one  cycle.  After  3  cycles  6  rats  in  the  12.6  mg/kg  dose  groups  were  dissected，8  rats  in  the  8.4  mg/kg  dose  group，and  12  rats  each  in  the  other  dose  groups  were  dissected.  The  remaining  rats  in  each  group  were  sacrificed  four  weeks  after  treatment.  The  general  condition，body  weight，feed  intake，blood  count，serum  chemistry，autopsies  and  organ  coefficient  and  histopathological  examinations  were  recorded.  RESULTS：After  injection，12.6  and  8.4  mg/kg  dose  group  developed  peritoneal  irritation  immediately，weight  loss  and  passive  posture，slow  growth  reduced  feeding  and  even  death  within  one  week.  Rats  in  the  5.6，8.4  and  12.6  mg/kg  dose  groups  showed  significantly  reduced  erythrocyte，leukocyte  count  and  abnormal  differential，prolonged  coagulation  time，reduced  glucose，increased  alkaline  phosphatase.  Dosage  over  5.6  mg/kg  groups  showed  lung  bleeding，bloody  abdominal  ascites，visceral  adhesions  and  severe  deformation；liver  and  spleen  significantly  enlarged，prostate  and  testicular  size；testicular  seminiferous  epithelium  cells  and  sperm  significantly  reduced  and  so  on.  CONCLUSION：Chelidonium  majus，at  dosage  over  5.6  mg/kg，could  cause  significant  local  irritation  and  systemic  toxicity  and  even  death.