癌变·畸变·突变 ›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (2): 115-118.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2008.02.010
封江彬,陆 雪,陈德清,刘青杰
FENG Jiang-bin, LU Xue, CHEN De-qing, LIU Qing-jie
摘要: 背景与目的: 探讨电离辐射是否诱发人淋巴细胞永生化细胞系中mtDNA中多个片段的缺失。 材料与方法: 用10 Gy 60Co γ射线照射指数生长期的人淋巴细胞永生化细胞系,照射后24 h、48 h提取纯线粒体DNA,用巢式PCR方法进行线粒体DNA 889 bp、3 895 bp和7 436 bp的缺失分析,并与未照射细胞进行比较;并将纯化的最后一轮PCR产物进行DNA测序和核苷酸同源性分析。 结果: 用于分析线粒体DNA 3 895 bp缺失的并引物对可特异性扩增出线粒体DNA 3 895 bp缺失,该扩增产物经纯化、测序证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt 548~4 443之间。用于扩增线粒体DNA 889 bp的引物对可扩增出目的DNA片段,同时也可扩增出未发生缺失的DNA片段,扩增产物经纯化、测序,证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt 11 688~12 576之间。所有未照射细胞无线粒体DNA 889 bp和3 895 bp的缺失。而照射前后mtDNA 7 436 bp缺失并未增加。 结论: 电离辐射可诱发淋巴细胞线粒体DNA 889 bp和3 895 bp的缺失,而对7 436 bp缺失影响不大。