黑种草子总皂苷对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响

doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2021.02.010

癌变·畸变·突变 ›› 2021, Vol. 33 ›› Issue (2): 143-148,152.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2021.02.010

黑种草子总皂苷对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响

方磊¹, 杨涛², 盛磊², 木塔力甫·艾买提², 齐鑫鑫³, 艾尼娃尔·艾克木¹, 伊力亚尔·尼加提²

1. 新疆医科大学药学院, 新疆乌鲁木齐 830011;
2. 新疆医科大学中心实验室, 新疆乌鲁木齐 830011;
3. 新疆医科大学公共卫生学院, 新疆乌鲁木齐 830011

收稿日期:2020-10-07 修回日期:2021-03-10 出版日期:2021-03-30 发布日期:2021-04-12
通讯作者: 艾尼娃尔·艾克木,E-mail:ainiwa@sina.com;伊力亚尔·尼加提,E-mail:Z4914138@xjmu.edu.cn E-mail:ainiwa@sina.com;Z4914138@xjmu.edu.cn
作者简介:方磊,E-mail:156185444@qq.com。
基金资助:
新疆维吾尔自治区高校科研计划（XJEDU2017S023）；新疆医科大学天山英才项目（2-14-01）；新疆维吾尔自治区自然科学基金（2018D01C164）

Biological effects of saponins from the seeds of Nigella glandulifera Freyn on human cervical cancer SiHa cells

FANG Lei¹, YANG Tao², SHENG Lei², MUTALIFU·Aimaiti², QI Xinxin³, AINIWAER·Aikemu¹, YILIYAER·Nijiati²

1. Pharmacy College, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011;
2. Central Laboratory, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011;
3. School of Public Health, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xinjiang, China

Received:2020-10-07 Revised:2021-03-10 Online:2021-03-30 Published:2021-04-12

摘要/Abstract

摘要： 目的：研究黑种草子总皂苷提取物（TSNG）对人宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、凋亡和自噬等生物学行为的影响。方法：将SiHa细胞分为空白对照组和不同浓度（0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.4、1.6、1.8 mg/mL）的TSNG作用组，以及10 μmol/L羟氯喹（HCQ）干预组；四甲基噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞的生长抑制率；划痕实验检测细胞的相对迁移率；流式细胞术Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率；Hoechst染色观察细胞核凋亡现象；单丹磺酰戊二胺（MDC）染色观察细胞内自噬体数量；Western blot实验检测LC3-Ⅱ和p62蛋白表达。结果：与空白对照组相比，TSNG对细胞的生长有抑制作用且呈剂量效应关系（P<0.05或0.01）；0.9、1.0、1.1 mg/mL TSNG处理组细胞相对迁移率分别为（20.40±2.49）%、（15.14±0.39）%、（5.05±1.04）%，均低于空白对照组的（36.63±2.52）%（P<0.01）；1.0、1.2、1.4 mg/mL TSNG处理组细胞的凋亡率分别为（39.10±0.22）%，（68.37±0.58）%和（80.93±0.12）%，均高于空白对照组的（10.73±0.82）%（P<0.05或0.01）；与空白对照组比较，TSNG处理组细胞核表现出凋亡现象细胞数量增多，且细胞内自噬体数量增加，LC3-Ⅱ和p62蛋白表达上升（P<0.05或0.01）；相较于TSNG作用组，HCQ预处理组LC3-Ⅱ蛋白表达无显著变化（P>0.05）。结论：TSNG对SiHa细胞体外增殖、迁移表现出明显的抑制作用，并在诱导细胞凋亡的同时阻断细胞自噬流。

关键词: 黑种草子, 总皂苷, 宫颈癌, 增殖, 自噬

Abstract: OBJECTIVE: To investigate the effects of total saponins from the seeds of Nigella glandulifera Freyn (TSNG) on proliferation,migration,apoptosis and autophagy of SiHa cells. METHODS: SiHa cells were divided into untreated control group,TSNG (0.8,0.9,1.0,1.1,1.2,1.4,1.6,1.8 mg/mL) treatment group and HCQ (10 μmol/L) intervention group. Growth inhibition was detected by using the MTT assay. Anti-migration effects were detected by the cell scratch assay. Apoptosis rates were determined using the flow cytometry assay with Annexin V-FITC/PI staining. Nuclear apoptosis was observed after Hoechst staining. The formation of autophagosomes was detected after MDC staining. Protein expressions of LC3-Ⅱ and p62 were detected by Western blotting. RESULTS: Compared with the control group,TSNG had an inhibitory effect on cell growth which shows a dose-dependent effect relationship (P<0.05 or 0.01). The relative migration rates from the 0.9,1.0,1.1mg/mL TSNG treatment groups were (20.40±2.49)%,(15.14±0.39)% and (5.05±1.04)%,which were lower than those of the control group (36.63±2.52)% (P<0.01). The apoptosis rates from the 1.0,1.2,1.4 mg/mL TSNG treatment groups were (39.10±0.22)%,(68.37±0.58)% and (80.93±0.12)%,respectively,which were higher than those of the control group (10.73±0.82)% (P<0.05 or 0.01). Compared with the control group,the cell nuclei from thef TSNG treated group showed more apoptotic changes, increased autophagosomes,and increased the LC3-Ⅱ and p62 protein expressions (P<0.05 or 0.01). Compared with the TSNG treatment group,LC3-Ⅱ protein expressions had no significant changes after HCQ pretreatment. CONCLUSION: TSNG exposure caused inhibition of proliferation and of migration,induced apoptosis and blocked autophagy in SiHa cells.

Key words: seeds of Nigella glandulifera Freyn, total saponins, cervical cancer, proliferation, autophagy

中图分类号:

R737.33

方磊, 杨涛, 盛磊, 木塔力甫·艾买提, 齐鑫鑫, 艾尼娃尔·艾克木, 伊力亚尔·尼加提. 黑种草子总皂苷对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响[J]. 癌变·畸变·突变, 2021, 33(2): 143-148,152.

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黑种草子总皂苷对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响

Biological effects of saponins from the seeds of Nigella glandulifera Freyn on human cervical cancer SiHa cells

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