背景与目的： 研究野生型和179位残基突变型p53基因在HELF细胞周期调控中的作用。探讨p53基因的179位残基突变对细胞生长的影响。 材料与方法： 用野生型p53(pcDNA3_wtp53)和179位残基突变的突变型p53(pcDNA3_mtp53)转染HELF细胞，观察细胞生长情况，绘制细胞生长曲线；用流式细胞仪分析细胞周期；用RT_PCR和Western blotting方法检测p53 基因转染后HELF细胞周期相关基因mRNA和蛋白的表达。 结果： 野生型p53表达的上调使HELF细胞周期阻滞于G1期，细胞体积减小，并下调cyclin D3、cyclin E、Cdk2和Cdk4的表达，同时上调p21的表达。而179位残基突变的突变型p53表达的上调则促进细胞周期从G1期到S期的转换，同时细胞体积增大，上调cyclin A和Cdk4的表达。 结论： p53的179位残基突变对于HELF细胞cyclin A和Cdk4的表达有诱导作用，并可能借此促进细胞周期进程。

背景与目的： 除草醚(nitrofen)是一种除草剂，已被广泛用于肺发育不良动物模型的制备。本研究旨在观察除草醚对体外培养的II型肺上皮细胞增殖、凋亡活性的影响及其分子机制。 材料与方法： 分别用20、40、80 μmol/L除草醚处理II型肺上皮细胞 A549后，采用MTT比色法、集落形成实验检测细胞增殖活性，western blot和实时RT－PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，TUNEL法及吖啶橙－溴化乙啶荧光染色法观测细胞凋亡情况，western blot检测凋亡相关基因表达。 结果：与对照组比较，20、40、80 μmol/L除草醚作用12～48 h后，A549细胞增殖活性降低12.43％～71.73％(P<0.01)，克隆形成能力抑制79.2％(P<0.01)；细胞内PCNA蛋白及mRNA表达水平显著降低，且呈时间和剂量依赖性(P<0.01)；除草醚作用后部分A549细胞发生凋亡形态学改变，凋亡率为8.0％～22.5％(P<0.01)，且不受caspases抑制剂zVAD_fmk的影响，凋亡抑制基因Bcl_xL表达显著下调(P<0.01)。 结论：除草醚可能通过分别下调PCNA和Bcl－xL的表达抑制II型肺上皮细胞增殖、诱导凋亡。

背景与目的： 研究茶多酚的主要植物化学物质成分(－)_epigallocatechin_3_gallate(EGCG)对人膀胱癌BIU_87细胞间隙连接蛋白43(Cx43)的表达和细胞间通讯功能的影响，探讨EGCG防治膀胱肿瘤的机制。 材料与方法： 分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、膜联蛋白/碘化丙锭双标流式细胞术、RT_PCR、Western印迹和划痕标记荧光染料传输技术，体外观察不同浓度的EGCG(0、5、10、20 mg/L)对BIU_87细胞的生长抑制率、凋亡率、Cx43 mRNA及其蛋白的表达、细胞间间隙连接通讯功能(GJIC)的变化。 结果： 10 mg/L和 20 mg/L的EGCG均能明显抑制BIU_87细胞的生长和诱导细胞凋亡，其抑制率分别为(15.67±1.15)％、(18.33±1.53)％，凋亡率分别为(42.00±4.34)％、(27.33±3.21)％ 。与对照组和5 mg/L EGCG相比，EGCG 10 mg/L和20 mg/L组能显著上调Cx43 mRNA及其蛋白的表达，并增强细胞间的GJIC功能(P<0.05)。EGCG在10～20 mg/L范围内对BIU_87细胞的生长的抑制作用、诱导细胞凋亡和上调Cx43表达的效应均随浓度的增加而增强，呈剂量依赖性(P<0.05)。 结论： EGCG(10、20 mg/L)能通过有效上调BIU_87细胞Cx43转录水平的表达、增强细胞间隙连接所介导的GJIC功能，从而诱导膀胱肿瘤细胞凋亡，抑制其生长。

背景与目的： 观察桑黄胞内多糖(PLIP)对体外培养的人白血病细胞K562的增殖抑制作用，并初步探讨其作用机制。 材料和方法： 采用MTT法及台盼蓝拒染法测定细胞增殖抑制率和生长曲线， Hoechst_PI双荧光染色，流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。 结果： PLIP在25 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml、200 μg/ml、400 μg/ml、800 μg/ml剂量时均能显著抑制K562细胞增殖(P<0.05)，其中400 μg/ml剂量时抑制率最高，达52.55％，半数抑制浓度(IC50)为262.36 μg/ml，流式细胞仪检测PLIP在100 μg/ml、 200 μg/ml、400 μg/ml剂量时K562细胞凋亡率分别为5.72％、13.57％、19.39％，并能诱导K562细胞出现凋亡所具有的形态学及生化特征。 结论： PLIP对体外培养的人白血病细胞K562生长增殖具有明显的抑制作用，其作用机制可能与诱导K562细胞凋亡和影响细胞周期有关。

背景与目的： 探讨三氧化二砷(As2O3)对人乳腺癌MDA_MB_468细胞的生长抑制作用及其对syk表达的影响。 材料与方法： 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度As2O3作用MDA_MB_468细胞不同时间后，对细胞增殖的抑制作用；显微镜观察细胞的形态变化；As2O3作用细胞后用流式细胞术检测细胞周期及Syk蛋白表达变化；RT_PCR检测syk mRNA的表达变化。 结果： As2O3可显著抑制MDA_MB_468细胞增殖，且抑制效应呈剂量和时间依赖性(P<0.05)；As2O3可使细胞周期阻滞在S＋G2/M期；候选抑癌基因syk在乳腺癌MDA_MB_468细胞中表达，经As2O3作用后，MDA_MB_468细胞syk mRNA和Syk蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。 结论： As2O3可能通过上调候选抑癌基因syk的表达，抑制MDA_MB_468细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用。

背景与目的： 研究端粒酶抑制剂叠氮胸苷(Azidothymidine，AZT)对人宫颈癌HeLa细胞 DNA放射性损伤修复的影响，探讨端粒酶在放射诱导的DNA损伤修复中的作用。 材料与方法： 实验分为空白组，AZT组(400 μmol/L AZT处理HeLa细胞24 h)，放射组(2 Gy 60Co γ射线照射)，AZT放疗组(400 μmol/L AZT处理HeLa细胞24 h后，用2 Gy 60Co γ射线照射)。照射后于0、5、10、30、60、180及360 min分别收集细胞，用端粒重复序列扩增法(PCR_based telomeric repeat amplification protocol，TRAP)_联合酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)即TRAP_ELISA法检测端粒酶的活性。用单细胞凝胶电泳法检测DNA单链断裂损伤，以彗尾DNA百分含量表示DNA单链断损伤量。 结果： HeLa细胞受2 Gy 60Co γ射线照射后10 min，端粒酶活性即开始增加，60 min后增加明显，360 min时达到最高。AZT处理HeLa细胞后，能使端粒酶活性下降约50％，而且能抑制HeLa细胞照射后端粒酶活性的增加 (P<0.05)。单细胞凝胶电泳实验表明，2 Gy 60Co γ射线照射HeLa细胞后0～10 min，AZT放疗组与放射组的彗尾DNA百分含量无明显差异(P>0.05)，照后30～360 min AZT放疗组彗尾DNA百分含量均高于放射组(P均<0.05)。 结论： AZT能阻抑照射后30～ 360 min DNA单链断裂的修复，说明端粒酶可能在放射性DNA损伤修复中具有重要作用。

背景与目的： 探讨胆固醇(cholesterin)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡及细胞增殖的影响，同时观察CuSO4溶液在其中所起的作用。 材料与方法： 实验分为8组：对照组(等体积溶剂)、胆固醇低剂量组(25 mg/L)、中剂量组(50 mg/L)和高剂量组(100 mg/L)；另外4组分别为以上各组加入终浓度为10 μmol/L的CuSO4溶液。应用流式细胞仪检测不同浓度胆固醇对细胞凋亡率的影响；应用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT试验)检测细胞的生存率。 结果： 不同浓度的胆固醇可不同程度地诱导HUVEC细胞发生凋亡，可明显抑制HUVEC细胞增殖，且随浓度增高，其作用均明显增强。同时发现各组加入CuSO4溶液后可使其细胞凋亡率明显增加，生存率下降。 结论： 胆固醇可以诱导内皮细胞凋亡及抑制细胞增殖，CuSO4溶液可促进胆固醇对HUVEC的损伤作用。

背景与目的： 探讨2,2＇,4,4＇_四溴联苯醚(2,2＇,4,4＇_tetrabromodiphenyl ethers, PBDE_47)对人神经母细胞瘤SH_SY5Y细胞的致突变作用。 材料与方法： 设空白对照组、溶剂对照组、3个不同BDE_47剂量的试验组(1 μg、2 μg、4 μg/ml)和阳性对照组(MMC)，共6组。SH_SY5Y细胞分别暴露于各组不同受试物24 h后，采用胞质分裂阻断法测定微核率、核浆桥率。 结果： PBDE_47可诱导SH_SY5Y细胞核分裂指数呈剂量依赖性下降，微核细胞率和核浆桥率呈剂量依赖性增加；2 μg/ml和4 μg/ml的染毒剂量可引起SH_SY5Y细胞核分裂指数明显降低(P<0.05)以及微核细胞率和核浆桥率的明显增加(P<0.05)，而仅在4 μg/ml PBDE_47染毒组发现微核率明显增加(P<0.05)。 结论： PBDE_47可诱导SH_SY5Y细胞微核和核浆桥的形成，具有致突变作用。

背景与目的： 探讨白藜芦醇(Rev)对结肠癌细胞系HT_29生长的影响，并结合细胞内环氧酶_2(COX_2)以及凋亡相关蛋白Bcl_2和Bax的表达情况探讨白藜芦醇的作用机制。 材料与方法： 分别以含有0、12.5、25、50、100 μmol/L白藜芦醇(Rev)的完全培养液培养HT_29细胞。用MTT法检测HT_29细胞生长情况，用western blot法测定细胞内COX_2的含量，用免疫细胞化学法检测细胞内凋亡相关蛋白Bcl_2和Bax的表达情况。 结果： 与对照组相比，Rev能够抑制HT_29细胞的生长，且呈剂量和时间依赖性。以不同浓度的Rev作用HT_29细胞48 h后发现，Rev对细胞内Bcl_2的表达水平没有明显影响，但50和100 μmol/L的Rev能够明显抑制细胞内COX_2的表达，并且100 μmol/L的Rev能够明显上调细胞内Bax的表达。 结论： Rev能够抑制结肠癌细胞HT_29的增殖，且具有剂量和时间依赖性，其作用与Rev能够抑制细胞内COX_2的表达以及上调Bax的表达有关。

背景与目的： 用TK6人类淋巴母细胞TK基因突变试验评价葛根素的抗诱变性。 材料与方法： 设溶剂对照组、5 μg/ml 甲基磺酸甲酯(MMS)组、5 μg/ml MMS分别加葛根素25 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml的各试验组、 5 μg/ml MMS＋100 μg/ml VitC对照组,共6组。按上述分组加入葛根素与MMS处理4 h后测定第0 d的平板接种效率 (PE0)、第3 d的平板接种效率 (PE3)、细胞悬浮生长率 (RSG)和总突变频率 (TMF)。 结果： 100 μg/ml葛根素剂量组能显著降低MMS诱导的TK基因突变频率。 结论： 在本实验条件下，葛根素在较高剂量范围可抑制MMS诱导的TK6细胞TK基因突变，有潜在的开发应用前景。

背景与目的： 探讨肺癌组织及其癌旁组织中RAP2B的表达及其意义。 材料与方法： 以β_actin为内参，运用半定量RT_PCR技术检测30例肺癌组织及其癌旁组织RAP2B mRNA的表达水平。用Western_blot方法检测RAP2B 蛋白的表达。 结果: ①肺癌组织中RAP2B mRNA的阳性表达率为73.3％(22/30)，在癌旁组织中的阳性表达率为30.0％(9/30)，两者间的差异具有统计学意义 (P<0.05)。RAP2B mRNA在癌组织的相对表达量为0.155 (0.000～0.530)，在癌旁组织的相对表达量为0.000(0.000～0.160)，两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。② RAP2B 蛋白在肺癌组织中的检出率为80.0％(24/30)，在癌旁组织的检出率为60.0％(18/30)，两者间的差异无统计学意义(P>0.05)。RAP2B 蛋白在癌组织的相对表达量为0.195(0.050～0.580)，在癌旁组织的相对表达量为0.030(0.000～0.180)，两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论： RAP2B的过表达可能是肿瘤发生的一个重要标志，在肿瘤的发生发展过程中可能有重要作用。

背景与目的： 探讨Cap43蛋白在肺癌组织中表达及其与组织学类型之间的关系。 材料与方法： 分别采用免疫组化法检测79例临床肺癌患者肿瘤组织和免疫印迹法检测28例临床肺癌患者新鲜肿瘤组织中Cap43蛋白的表达，并用图像分析系统进行半定量分析。 结果： 免疫组化结果显示，Cap43蛋白在细胞内分布以胞质为主，也有部分分布在胞核；其半定量结果显示，Cap43蛋白在非小细胞肺癌组织中表达量明显高于癌旁正常对照组织(P<0.05)，且在肺腺癌组织中表达量明显高于肺鳞癌组织(P<0.01)。免疫印迹也显示，Cap43蛋白在非小细胞肺癌组织中高表达；其半定量结果显示，Cap43蛋白在肺粘液性腺癌组织中的表达量明显高于其它组织学分型肺癌组织(P<0.01)。随着肺癌组织分化程度的增高，Cap43蛋白表达量有明显降低的趋势(P<0.05)。两种检测方法均提示Cap43蛋白在癌旁正常对照组织和小细胞肺癌中低表达。免疫印迹检测方法所测阳性率(82.14％)高于免疫组化法(69.62％)，但两种检测方法的阳性率间无明显差异(P>0.05)。 结论： Cap43蛋白在非小细胞肺癌组织中高表达，该蛋白表达水平与肺癌组织学分型密切相关。

背景与目的： 比较三价铬(CrCl3)和六价铬(K2Cr2O7)对大鼠长期慢性毒性。 材料与方法： 采用90 d喂养实验。Wistar大鼠按10％LD50、6％LD50、2％LD50分为高、中、低3个剂量组，同时设立阴性对照，染毒90 d后检测血清学指标、脏/体比及组织病理学检测。 结果： CrCl3高剂量组CHO、HDL、TG、Glu与对照组相比显著降低(P<0.05)，其余指标均无显著性差异(P<0.05)。K2Cr2O7高剂量组大鼠体重随着染毒剂量的增加而下降，与对照组相比降低显著(P<0.05)；高剂量组白细胞计数与对照组相比有显著性升高，淋巴细胞与对照组相比显著降低 (P均<0.05)；血清学指标检测显示，高剂量组CHO、HDL、TG、Glu与对照组相比显著降低，而ALT、Cr、BUN与对照组相比则显著升高(P均<0.05)。病理组织学检查显示，K2Cr2O7高剂量组肝脏表现为明显的肝窦扩张，淤血及少量渗出性出血，并偶见坏死灶。 结论： K2Cr2O7高剂量组对大鼠免疫系统、肝、肾脏有损伤；K2Cr2O7长期慢性毒性明显高于CrCl3 。

背景与目的： 探讨乳腺外不同部位具有微乳头结构(micropapillary pattern, MPP)癌的临床病理和预后。 材料与方法： 对33例具有MPP结构的癌分别进行病理组织学观察及免疫组织化学EMA、E_cd、CD44v6及Ki67检测，并加以随访。 结果： 33例具有MPP结构的癌发生于肺、膀胱、胰腺、肾及结肠。组织学观察肿瘤组织中均可见比例不等的典型MPP结构，肿瘤中央及周边区可见明显的淋巴管癌栓，其中25例见淋巴结转移。在MPP结构区，Ki67阳性率与周围普通型癌相同，但EMA、E_cd、CD44v6表达部位与普通型癌不同。随访时间6～103个月，死亡23例，复发3例。 结论： 乳腺外伴有MPP结构的癌可发生于膀胱、肺、胰腺及大肠等多个部位，具有较高的淋巴管侵犯和淋巴结转移率，预后极差，需引起临床和病理医师的高度重视。

背景与目的： 检测单味马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性。材料与方法： 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验 (Ames test)检测含马兜铃酸的两味单、复方中药的细菌回复突变率；采用96孔微孔板接种法进行小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(mouse lymphoma assay，MLA)，经单、复方含马兜铃酸浓度5 μg/ml对L5178Y/tk(＋/－) －3.7.2c细胞进行染毒，分别测定其接种效率(PE)，相对总增长率(RTG)和突变频率(MF)。 结果： Ames试验结果为阴性,而小鼠淋巴瘤试验显示单味马兜铃具有一定细胞毒性并诱导tk基因突变，产生突变集落；而复方龙胆泻肝丸未诱发tk基因突变。 结论： 受试的单味马兜铃具有一定的遗传毒而复方龙胆泻肝丸具有对马兜铃的减毒效应。

背景与目的： 建立H22肝癌荷瘤鼠实验动物模型，研究壳寡糖协同双歧杆菌对荷瘤鼠免疫功能的影响。 材料与方法： 采用体内注射的方法将壳寡糖和双歧杆菌注入荷瘤小鼠体内，观察肿瘤生长情况，并进行免疫功能的测定，及观察肿瘤病理变化。 结果： 壳寡糖协同双歧杆菌对肿瘤的生长有抑制作用，可提高荷瘤小鼠血清的IL-2和INF-γ含量,增加荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的重量，显微镜下观察显示肿瘤组织出现坏死。 结论： 壳寡糖协同双歧杆菌可抑制肿瘤生长，提高机体免疫功能,促使肿瘤细胞坏死。

背景与目的： 探讨一种简便的γ射线照射致小鼠衰老模型。 材料与方法： 将45 只小鼠随机分成3组：对照组和2个模型组，对照组正常饲养，2个模型组分别给予不同剂量的γ射线照射。50 d后观察血常规、胸腺指数、脾脏指数、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、脂褐素含量、β-半乳糖苷酶染色结果。 结果： 与对照组相比，2个模型组的血常规相关指标、胸腺指数和脾脏指数和SOD活性均降低(P<0.05)；MDA含量和脂褐素含量升高(P<0.05)；β-半乳糖苷酶染色呈阳性改变。 结论： 采用γ射线照射建立急性小鼠衰老模型的方法可行。

背景与目的： 探讨不同强度低功率微波辐射对雄性小鼠生殖系统的影响。 材料与方法： 48只雄性ICR小鼠，随机分为3个辐射组和1个对照组，每组各12只，辐射组用频率900 MHz,功率密度分别为250、150、50 μW/cm2的连续波，对小鼠每天辐射24 h，连续辐射34.5 d。辐射结束观察小鼠性行为能力的扑捉潜伏期(capture incubation period ，CIP)、睾体比、睾丸病理变化、精子相对计数、精子畸形率及血清睾酮等指标的变化。 结果： 各辐射组与对照组比较, 150 μW/cm2组小鼠CIP明显延长(P<0.05)、睾丸发生轻微病理变化、精子相对计数明显减少(P<0.05)；精子畸形率明显增加(P<0.05)；血清睾酮水平明显降低(P<0.05)；睾体比之间的差异无统计学意义。结论： 低功率微波辐射(150 μW/cm2)能引起雄性小鼠睾丸病理改变，性功能(CIP)减退,精子相对计数减少，精子畸形率升高，血清睾酮水平降低，影响雄性小鼠生殖功能。

背景与目的： 探讨检测育发剂致突变性的适宜的方法。 材料与方法： 运用Ames试验、小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)对3种育发剂的致突变性进行研究。 结果： 28种育发剂中有85.72％的样品对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌均有程度不同的抑菌或杀菌作用，选取的3种育发剂对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌均有较强的抑菌杀菌作用，在试验浓度下均未呈现致突变性；MLA试验结果显示，1号样品和3号样品育发剂在测试浓度下未呈现致突变性；2号样品育发剂随浓度增大，L5178Y细胞TK位点的突变频率有升高的趋势，其中8 μl/ml、40 μl/ml和200 μl/ml剂量组的突变率，与对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05)。 结论： 小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)可做为毒性较大育发剂的遗传毒性筛检的补充试验。

背景与目的： 检测T细胞非霍奇金淋巴瘤(T_NHL)中ZAP_70的表达水平变化，分析ZAP_70与P53、Ki67的相关性，探讨ZAP_70蛋白在T_NHL中表达的意义。 材料与方法： 采用SP免疫组织化学方法检测48例T_NHL中ZAP_70、P53、Ki67蛋白的表达，利用χ2、t检验、Spearman's等级相关检验方法分析3种蛋白表达的相关性。 结果： ZAP_70在T_NHL中的表达阳性率为58.3％。肿瘤恶性程度越高，ZAP_70蛋白的表达水平越低，ZAP_70蛋白与肿瘤的恶性程度呈负相关关系(P=0.001)；P53、Ki67蛋白与肿瘤的恶性程度呈正相关， P53蛋白的表达与Ki67蛋白之间存在相关性(P<0.01)，且P53蛋白与EB病毒感染呈正相关(P<0.05)。 结论： ZAP_70蛋白表达的缺失对于恶性T细胞淋巴瘤的诊断可能具有一定的辅助作用；联合检测P53与Ki67蛋白的表达水平对判断T_NHL 的预后，指导术后辅助治疗具有重要意义。

细胞因子信号转导抑制分子(suppressor of cytokine signaling，SOCS)是一类新型的免疫抑制分子，其家族包括细胞因子诱导的含SH2结构域的蛋白(CIS), SOCS1～SOCS7，含有WD_40重复序列及SOCS盒的蛋白(WSB),含有锚蛋白重复序列及SOCS盒的蛋白(ASB), 含有SPRY结构域及SOCS盒的蛋白(SSB)等成员。SOCS 分子主要通过抑制 JAK/STAT(Janus激酶／信号转导和转录激活子) 通路抑制信号转导，从而调控细胞因子、激素、生长因子作用的强度和持续时间。近年来研究发现，在多种肿瘤组织中发生 SOCS 基因表达异常，提示其可能在肿瘤的发生、发展、转移过程中扮演重要角色。

IAP(inhibitor of apoptosis)是内源性凋亡抑制蛋白家族，其中效力最强的是X连锁凋亡抑制蛋白(X chromosome linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)。它主要通过BIR结构域和RING锌指结构域抑制caspase活性、调节核因子NF2κB并参与信号的转导过程。XIAP受到不均一核糖核酸蛋白C1和C2等的正向调节和XAF1 和Smac/DIABLO等的负向调节。近年来XIAP在临床方面的研究也取得了很大进展。

正常人体细胞从增生、异型增生、原位癌发展到浸润转移癌，要经过细胞永生化、分化异常和恶性转移等过程。而在体外细胞水平则需经历永生化和恶性转化这两个过程。近年来随着端粒酶研究的不断深入，人们对细胞的永生化以及细胞转化有了更清晰的认识，细胞转化试验在致癌机制以及肿瘤研究等领域中得到广泛应用。人体细胞与啮齿类动物细胞在永生化和细胞转化两个阶段均存在着一定差异，本文从端粒及端粒酶的调控、永生化和恶性转化条件等方面对上述两种细胞进行比较，并探讨细胞转化模型在毒理学中的应用价值。