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当期目录

2003年 第15卷 第4期 刊出日期:2003-10-30
论著
镍化合物诱发恶性转化细胞的端粒酶活性表达
王 敏 吴中亮 陈家
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  193-194.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.001
摘要 ( 2059 )   PDF (493KB) ( 2496 )  
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目的:探讨二种镍化合物诱发细胞恶变过程中端粒酶活性的变化。方法:二种镍化合物转化细胞接种BALB/c裸鼠,应用端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol, TRAP)检测转化细胞和肿瘤细胞的端粒酶活性。 结果:结晶型硫化镍和氯化镍诱发的BALB/c-3T3恶性转化细胞的端粒酶活性均表现为阳性。结论:镍化合物诱发的细胞恶性转化涉及了端粒酶活性改变,提示了端粒酶表达与镍转化作用有关。
倍半萜烯内酯通过非caspase途径诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡
林忠宁, 林育纯, 杨杏芬, 朱 伟, 余贵英, 蔡承铿, 魏 青
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  195-198.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.002
摘要 ( 2843 )   PDF (571KB) ( 2525 )  
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目的:探讨半胱天冬酶(caspase)活化途径是否在倍半萜烯内酯(SLs)诱导人鼻咽癌(NPC)细胞凋亡中起作用。 方法:CNE1细胞株给予SLs的活性成分parthenolide (PN)处理,以及与caspase-3和-9特异性抑制剂联合作用进行caspase途径阻断实验,检测细胞内caspase-9和-3活性,观察其与细胞毒性和凋亡指标的关系。 结果:PN作用后细胞TUNEL阳性率和SubG1细胞亚群增高,细胞失贴壁率和LDH漏出率显著增加(P<0.05),但caspase-9和-3活性未见升高。特异性抑制剂作用后caspase活性明显降低(P<0.05),而细胞凋亡和毒性指标未见明显改变。 结论:提示PN诱导CNE1细胞凋亡作用与其细胞毒性效应有关,与caspase活化途径无关。
彗星电泳法检测H2 O2对人淋巴细胞DNA损伤及其激光扫描共聚焦显微境下的观察和三维重建
张俏忻, 罗文鸿, 李 慧, 林哲绚
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  199-202.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.003
摘要 ( 3024 )   PDF (758KB) ( 2506 )  
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目的: 应用彗星电泳法于荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察人淋巴细胞经H2O2作用后的DNA损伤情况。方法:人淋巴细胞经不同浓度H2O2(0、10、20、40、80μmol/L)作用20 min,或20 μmol/L H2O2作用不同时间(0、10、20、30 min)后,采用彗星电泳法,荧光显微镜下观察、照相,对尾长、总彗星长度、尾距进行测量和分析。同时采用激光共聚焦显微镜(LSCM)进行观察和三维重建;比较了不同染料(PI、AO、EB、Hochest 33258)的染色效果。 结果: H2 O2作用浓度为0、10、20、40、80 μmol/L时,尾距(-±s)分别为0.001±0.002、0.31±0.35、1.23±0.96、2.82±1.38、3.52±0.96(P<0.01);作用时间为0、10、20、30 min时,尾距(-±s)分别为0.05±0.09、0.22±0.30、1.62±0.93、1.89±1.09(P<0.01)。尾长、总彗星长度也有显著性增加,经统计学检验,P<0.01。与荧光显微镜相比,LSCM下的"彗星"轮廓十分清晰;PI和EB染色效果较好。 结论: H2O2能剂量依赖性和时间依赖性地导致人外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤。利用LSCM构建"彗星"的三维图像将更有利于DNA损伤的准确测量。鉴于染色效果的差异,PI和EB是比较适合的彗星电泳染料。
pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达
吴丛梅, 黄天华, 吴德生, 谢庆东, 徐小虎
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  203-204.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.004
摘要 ( 2307 )   PDF (448KB) ( 2644 )  
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目的:构建pEgr-P16重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导表达。方法: 人P16 cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成pEgr-P 16重组质粒,利用脂质体介导转染人EC9706细胞,用Western blot方法检测不同剂量γ射线照射后被转染细胞中P16的表达。结果:酶切鉴定证实pEgr-P 16重组质粒构建正确。被pEgr-P16重组质粒转染的人食管癌EC9706细胞经不同剂量γ射线照射后,P16基因表达均高于未照射组。结论:γ射线可诱导pEgr-P16重组质粒在人EC9706细胞中表达增强。
药物AC-88对荷瘤鼠T细胞内TNF-α、lL-1β和IL-6 mRNA
马栋柱, 孙克任, 赵 丽, 肖志峰, 李 慧
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  205-208.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.005
摘要 ( 2175 )   PDF (603KB) ( 2490 )  
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目的:探讨AC-88抗肿瘤作用及可能机制。方法:以移植H22肝癌细胞的小鼠为体内模型,研究了AC-88的抑瘤作用;应用细胞培养和MTT法研究荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖功能;用RT-PCR法研究荷瘤小鼠T淋巴细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA含量变化。结果:实验发现,AC-88的体内抑瘤率可高达76 %,而且AC-88能促进荷瘤鼠T淋巴细胞的增殖,能使T细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞因子的mRNA含量增加2~4倍。 结论:AC-88有良好的抑瘤作用,还可以调节T淋巴细胞的功能,是一种具有较高开发价值的抗癌药物。
铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对P53基因表达影响的研究
安兰敏, 杨 军, 徐 兵
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  209-211.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.006
摘要 ( 2893 )   PDF (618KB) ( 2699 )  
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目的:为进一步揭示铅的神经毒作用机制,对醋酸铅诱导大鼠脑细胞凋亡及对P53基因表达的影响进行了研究。 方法: 取成年SD大鼠,每组6只,染毒剂量分别为25、50、100 mg/kg,连续染毒5 d,经升主动脉灌注4 %多聚甲醛内固定后分别取其海马、皮层部位脑组织,制备石蜡切片,用原位末端标记法观测细胞凋亡,免疫组化方法分别测定海马、皮层组织中P53的蛋白含量。 结果: 各剂量组大鼠海马、皮层组织凋亡细胞数量明显增加,显著高于对照组,并有良好的剂量反应关系;大鼠脑组织海马、皮层P53表达阳性细胞数显著增加,表达强度有升高趋势;铅诱导的神经细胞凋亡与P53的表达呈正相关。 结论:醋酸铅可以诱发大鼠皮层、海马细胞的凋亡,且与剂量呈正相关;醋酸铅可以促进大鼠海马、皮层细胞中P 53基因的表达,并有良好的剂量反应关系,提示P53可能作为调控因子参与铅对中枢神经系统损害的毒性过程;高表达的P 53启动凋亡过程,诱导细胞凋亡。
绿芦笋提取液抑制肿瘤细胞核酸生物合成的研究
夏 俊, 陈治文, 石 莹
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  212-214.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.007
摘要 ( 2491 )   PDF (503KB) ( 2607 )  
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目的:研究绿芦笋原汁和提取液对小鼠S180肉瘤细胞和小鼠艾氏腹水癌细胞(EAC)核酸生物合成的影响。方法:采用3H-TdR和3H-UR掺入肿瘤细胞DNA和RNA的方法,观察不同浓度的芦笋原汁和提取液对肿瘤细胞核酸生物合成的抑制作用。 结果:绿芦笋原汁及其乙醇提取液浓度分别为20、40、80、160 mg/ml时,对S180 DNA的掺入抑制率分别为:20.40 %、52.19 %、56.90 %、77.11 %和53.25 %、76.86 %、88.86 %、94.62 %;对S180 RNA的掺入抑制率分别为:24.70 %、41.53 %、76.06 %、85.72 %和60.17 %、80.90 %、94.08 %、97.26 %;对EAC的DNA掺入抑制率分别为:5.16 %、13.00 %、31.44 %、57.09 %和20.56 %、43.02 %、58.55 %、75.99 %;对EAC的RNA掺入抑制率分别为:10.52 %、23.04 %、45.60 %、68.39 %和13.37 %、32.60 %、59.70 %、81.85 %。结论:不同浓度的绿芦笋原汁和提取液能显著抑制肿瘤细胞核酸的生物合成,且抑制程度随原汁和提取液浓度的升高而增强。结果显示,在20~160 mg/ml浓度范围内,绿芦笋乙醇提取液的作用强于同等量的绿芦笋原汁。
鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系
杨开颜, 俞 康, 李剑敏, 黄卡特
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  215-216.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.008
摘要 ( 2318 )   PDF (359KB) ( 2531 )  
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目的:探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法: 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果: 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。 结论: Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。
子宫内膜癌组织中PTEN mRNA表达的研究
李 超, 戴淑真
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  217-219.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.009
摘要 ( 2044 )   PDF (600KB) ( 2554 )  
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目的: 探讨子宫内膜癌组织中PTEN mRNA的表达及临床病理意义。 方法: 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增65例子宫内膜癌和15例正常子宫内膜组织中PTEN基因外显子1-8、5-9和5-8片段,并结合临床病理资料进行分析。结果: 在65例子宫内膜癌组织中,PTEN mRNA的表达缺失率在外显子1-8、5-9和5-8分别为 49.23 % (32/65)、 38.46 % (25/65)和 32.31 %(21/65),而正常子宫内膜组织中全部呈阳性表达。二者在三组中表达缺失率的差别显著 (P < 0.05) 。而且子宫内膜癌组织中的表达缺失率在特殊类型癌和G 3级组织中分别高于内膜样腺癌和G1~2级组织 (P < 0.05) 。 结论: 子宫内膜癌组织中存在较高比例的PTEN mRNA表达缺失,表明PTEN基因转录水平异常在子宫内膜癌的发生发展中起重要作用。
顺铂、卡铂和双环铂对pBR322质粒DNA的断裂作用
马华智, 刘正兴, 王全军, 阎长会, 廖明阳
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  220-222.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.010
摘要 ( 2800 )   PDF (531KB) ( 2838 )  
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目的:研究铂类抗癌药顺铂、卡铂和双环铂对pBR322质粒DNA的致断性。 方法:用琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像分析方法 结果:顺铂、卡铂、双环铂均可诱发pBR322质粒DNA断裂,对质粒DNA的半数致断剂量分别为33.71 μmol/L、3.31 mmol/L和1.61 mmol/L。 结论:对pBR322质粒DNA的致断性强弱依次为:顺铂>双环铂>卡铂。
肿瘤防治
肺癌患者痰液端粒酶活性检测的临床研究
胡 坚, 李任远, 孙 鹂, 倪一鸣
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  223-224.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.011
摘要 ( 2847 )   PDF (460KB) ( 2381 )  
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目的:分析研究肺癌患者痰液端粒酶活性表达的临床意义。 方法:运用端粒酶PCR-TRAP酶联免疫吸附试验(ELISA)测定法对30例肺癌患者及25例肺部良性疾病患者(对照组)的痰液进行端粒酶活性检测。 结果:肺癌患者痰液标本中端粒酶活性阳性率为56.7 %(17/30),肺部良性疾病患者(对照组)的痰液标本端粒酶活性阳性率为24 %(6/25),二者经统计学处理,有显著性差异(P < 0.05)。 结论:检测肺癌患者痰液端粒酶活性有助于肺癌与其它良性肺部疾病的诊断及鉴别诊断,且具有方法相对简便、无创、标本易得等优点。
卵巢癌和乳腺癌P53、P21、P16和Rb基因表达水平的研究
沈宗丽, 朱月清, 吴晓柳, 周振英, 王亚平
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  225-227.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.012
摘要 ( 2093 )   PDF (436KB) ( 2645 )  
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目的: 研究肿瘤组织癌相关基因P53、 Rb、 P16、和P21表达水平的临床意义。 方法: 用流式细胞仪(FCM)检测30例卵巢癌和乳腺癌瘤体中心灶P53、 Rb、 P16、和P21异常表达的阳性细胞百分率。 结果: 卵巢癌和乳腺癌的P53、 Rb、 P16、和P21基因蛋白表达水平及异常表达率均无明显差异(P>0.05)。30例肿瘤的4种基因异常表达率分别为:P53 40 %;Rb 53.3 %;P 21 66.7 %和P16 53.3 %。 96.7 %(29/30)的肿瘤存在至少一种以上癌相关基因的异常表达。异常表达两个以上癌相关基因的患者较易出现临床转移。 结论: 联合检测实体肿瘤P53、Rb、P16、和P21基因蛋白表达水平并综合分析这些指标,有助于识别肿瘤不同的生物学特性和准确判断患者预后。
研究简报
环磷酰胺诱发的染色体损伤与P53基因表达的关系
王明艳, 许冬青, 徐 力, 张 旭, 赵凤鸣, 姜海英
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  228-230.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.013
摘要 ( 2161 )   PDF (483KB) ( 2499 )  
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目的:探讨环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对染色体损伤与P53基因表达间的关系。 方法:以正常人外周血淋巴细胞为材料,用流式细胞仪检测环磷酰胺对突变型P53基因表达的影响,同时以微核(MN)及姐妹染色单体互换(SCE)为指标,进行致突变研究。 结果:环磷酰胺用药组突变型P53基因表达率为30.81 %,微核率为8 ‰,姐妹染色单体互换率为9.21±1.08,与对照组比较均有显著差异。 结论:环磷酰胺的致突变作用可能与影响P53的基因的表达有关。
检测研究
益母草对小鼠遗传物质损伤的影响
朱玉琢, 庞慧民, 李秀东, 邢沈阳, 高久春
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  231-233.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.014
摘要 ( 2139 )   PDF (447KB) ( 2554 )  
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目的:观察中草药益母草对醋酸铅引起的小鼠遗传物质损伤的影响。方法:采用小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验。结果:益母草本身不能诱发小鼠骨髓微核和小鼠精子畸形,但在与醋酸铅一同给药时,可使醋酸铅所诱发的小鼠骨髓微核和小鼠精子畸形频率明显降低。结论:益母草对小鼠遗传物质具有保护作用,即抗诱变作用。
盐酸吡格列酮对大鼠致畸性研究
廖 雪, 王 捷, 宋宏宇, 鲍 清, 乔 良, 张沈平
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  234-236.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.015
摘要 ( 2052 )   PDF (429KB) ( 2466 )  
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目的:检测盐酸吡格列酮的致畸毒性。方法:应用Wistar大鼠进行致畸毒性试验。以6、24 , 96 mg/kg 3个剂量组给药。 给药时间为大鼠妊娠后第6~15 d。结果:以96 mg/kg剂量经口投与Wistar妊娠大鼠,吸收胎和死胎数增加,各剂量组对胎鼠均有生长发育迟缓的影响。结论:盐酸吡格列酮可产生明显的胚胎毒作用,但对胎鼠无致畸作用。
白眉蝮蛇蛇毒精氨酸酯酶的致突变研究
韦传宝, 余茂耘
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  237-239.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.016
摘要 ( 1910 )   PDF (458KB) ( 2719 )  
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目的与方法:采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验研究白眉蝮蛇(Agkistrodon halys ussuriensis )蛇毒中精氨酸酯酶有无致突变毒性,为临床应用提供安全性依据。结果与结论:3项试验均为阴性,精氨酸酯酶对所试菌株、小鼠体细胞及雄性生殖细胞均无诱变性。从致突变角度考虑,精氨酸酯酶在高于临床治疗剂量约100倍的条件下仍然安全。
川贝枇杷糖急性毒性和致突变性实验研究
高菊美, 刘 敏, 秦光和, 杨 萍, 耿菊敏
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  240-241.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.017
摘要 ( 2835 )   PDF (435KB) ( 2526 )  
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目的: 对川贝枇杷糖进行毒理学安全性评价。 方法: 采用小鼠、大鼠经口急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸变试验。 结果: 川贝枇杷糖对两种性别小鼠、大鼠经口急性毒性试验,LD50均大于10 g/kg,属实际无毒物;三项遗传毒性试验:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05)。在Ames试验,加S 9与不加S 9混合液各剂量组的回复突变菌落数与自发回变组菌落数相比,MR值均小于2,并且各剂量组之间菌落数增加无剂量反应关系(P>0.05)。 结论: 在本实验条件下,受试物川贝枇杷糖未见有急性毒性和致突变作用。
阿维菌素原药对小鼠致畸性的研究
王 静, 张 静, 姜文玲
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  242-243.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.018
摘要 ( 1760 )   PDF (340KB) ( 2538 )  
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研究阿维菌素原药在5.0、2.5、1.25 mg/kg 3个剂量下对小鼠的致畸性,方法:按小鼠致畸常规试验方法进行。结果:高、中剂量孕鼠在给药后期食欲不振、活动减少、毛不洁、会阴部污秽。对孕鼠各期体重增长值进行t检验,显示各给药组孕鼠16 d体重增长值低于对照组(P< 0.01),停药后体重增长恢复。各剂量组与对照组胎鼠外观未见畸形;胎鼠的身长、尾长经t检验,无显著性差异。胎鼠骨骼内脏发育未见异常。孕鼠生育能力的观察发现: 吸收胎及死胎率随给药剂量增加而升高,大剂量组与对照组比较经χ2检验,差异有极显著性(P< 0.01)。 结论:试验结果表明:不同剂量阿维菌素对胎鼠骨骼内脏发育及外观均无明显影响;但高剂量孕鼠生殖机能有明显改变,引起吸收胎和死胎率升高(P<0.01),其原因和机制有待进一步研究。
综述
同位素亲和标签(ICAT)系列技术及其在蛋白质组研究中的应用
荣 举, 许丽艳, 李恩民,
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  244-248.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.019
摘要 ( 2834 )   PDF (673KB) ( 2988 )  
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近年来,大量的研究结果表明双向电泳技术由于不能对分子量极高或极低、等电点极酸或极碱和含量低的蛋白质以及膜蛋白质等进行有效分离,因此已不能适应目前蛋白质组研究深入发展的需要。同位素亲和标签(isotope-coded affinity tag,ICAT)技术是最近发展起来的一种用于蛋白质分离分析的新技术,由于采用了一种全新的化学试剂-ICAT试剂,同时结合了液相色谱和串联质谱,因此不但明显弥补了双向电泳技术的上述不足,同时还使高通量、自动化蛋白质组分析更趋简单、准确和快速,代表着目前蛋白质组分析技术的主要发展方向。最近针对磷酸化蛋白分析以及与固相技术相结合ICAT技术本身又取得了许多有意义的进展,已形成ICAT系列技术。对此本文进行了全面综述。
肿瘤患者血清DNA甲基化的研究进展
南克俊, 魏永长 综述, 李 旭 审校
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  249-252.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.020
摘要 ( 1614 )   PDF (689KB) ( 2406 )  
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血清DNA是循环核酸的一种,DNA甲基化与肿瘤的发生发展有密切关系;甲基化特异性PCR(MSP)是血清DNA甲基化检测的灵敏方法,血清DNA甲基化在肿瘤的早期诊断、分期、治疗及预后监测等方面有重要意义,是目前肿瘤分子生物学研究热点之一,具有极大的应用价值。
JNK/MAPK途径调控机制研究进展
张文伶, 金勇丰, 朱成钢, 张耀洲
癌变·畸变·突变. 2003, 15(4):  253-256.  doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2003.04.021
摘要 ( 1540 )   PDF (525KB) ( 2493 )  
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JNK信号途径与多种疾病的发病机制有关,如癌症、中风、鳞皮病、心脏病、发炎和神经萎缩等疾病。抑制JNK途径的药物具有一定的临床应用价值,因此JNK是一个分子治疗靶。JNK信号途径中的各成员相互作用的机制是目前研究热点之一,本文就此研究的进展作一综述。