目的: 观察HPV-16 E6 和食管癌细胞核基质的关系,以探讨HPV 感染在食管癌变中的作用。方法:2 株食管癌细胞系,EC/ CUHK1 和EC/ CUHK2 ,用于本实验。PCR 扩增核基质相关的HPV-16 E6 亚基因片段,RT-PCR 和免疫细胞化学染色观察了E6 亚基因在癌细胞内的表达。结果: EC/ CUHK2 细胞的HPV-16 E6 亚基因片段存在于核基质相关DNA 中,E6 癌蛋白位于核基质组分内;而EC/ CUHK1 细胞的结果均为阴性。结论:HPV-16 E6 和核基质的相互作用有助于病毒导致的食管癌发生。

目的: 建立一种从抑制消减杂交阳性克隆中筛选差异表达基因的方法。方法:以阵列方式将抑制消减杂交阳性克隆的PCR 产物点加于尼龙膜上,以标记polyA+ RNA 为探针进行反向杂交,化学发光法检测,在图象分析仪上进行光密度扫描,计 量平均单位面积光密度,扣除背景,计算两个阵列各对应点之间光密度值的比值R(ratio) 。差异表达基因的阳性判定标准为R 值大于或等于2. 00 。结果:通过反向mRNA 斑点印迹技术可以从抑制消减杂交阳性克隆中把差异表达基因有效地筛选出来。结论:反向mRNA 斑点印迹技术是一种筛选抑制消减杂交差异表达基因的有效方法。

目的:对受到长期、低剂量率照射的我国早期从事医用X 线工作者辐射损伤的远期效应进行细胞遗传学观察和评价。方法:用4 号和7 号全染色体探针和荧光原位杂交技术,分析25 名早期X 线工作者和10 名对照者外周血淋巴细胞染色体畸 变,并用Giemsa 染色验证。结果:直观地表现出正常靶染色体和多种畸变。X 线工作者的易位占其染色体总畸变的84 %;其他各种畸变率分别为插入( Ins) 1. 9 %、双着丝粒(Dic) 4. 5 %、无着丝粒断片(Ace) 9. 7 %;X线工作者的染色体易位率和总畸变率均明显高于对照组( P < 0. 005) 。结论:早期医用X 线工作者外周血淋巴细胞的染色体畸变以易位为主。

目的:测定健康人精子9 、18 号染色体非整倍体率。方法:用9 、18 号染色体着丝粒探针与精子核进行双色荧光原位杂交,计数非整倍体率。结果:检查16 位健康捐精者156 955 个精子,每人约计数10 000 个精子。平均杂交率> 99 % ,平均9 双体率0. 050 %±0. 030 % ,18 双体率0. 033 %±0. 025 % ,二倍体精子率0. 040 %±0. 036 % ,9 缺体率0. 067 %±0. 037 % ,18缺体率0. 048 %±0. 034 % ,无荧光点精子率0. 427 %±0. 357 % ,总数目畸变率0. 218 %±0. 071 %。结论:测定了16 例健康人精子9 、18 号染色体非整倍体率,与传统的人精子染色体分析法测定的结果相近。

目的与方法:应用免疫组化法检测碳酸锂(Li2CO3) 对抗黄曲霉毒素B1 (AFB1) 诱导Wistar 大鼠肝癌过程中增殖细胞核抗原(PCNA) 的表达及意义。结果:PCNA 在诱癌早期(实验第6 周) 即有表达,第9 、10 周显著升高,差异有显著性( P < 0. 01) 。阳性对照组(B 组) PCNA 阳性率最高,碳酸锂同时给药组(C 组) 及先期给药组(D 组) 阳性率显著降低,C 组阳性率略高于D组。结论:碳酸锂明显对抗AFB1 诱导肝癌过程中PCNA 的表达,通过抑制细胞增殖从而起到抗癌作用; PCNA 的免疫组化检查有助于肿瘤的早期发现和追踪观察。

目的:研究食管上皮增生、不典型增生及原位癌中p53 蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA) 的异常表达,探讨其在食管癌发生发展中的作用。方法:用免疫组化LSAB 方法检测189 例食管鳞癌癌旁上皮及原位癌中p53 及PCNA 的表达。结果:癌旁上 皮中存在p53 蛋白积聚,从上皮增生→不典型增生→原位癌,其阳性率依次为55 %、79 %和98 %( P < 0. 01) 。PCNA 的阳性强度也是依次递增。结论:p53 蛋白的积聚在食管鳞癌癌前病变中既已存在,说明它是一个早期事件,在食管癌的发生中起一定的作用。p53 及PCNA 的异常表达可能成为判断食管上皮发生癌变或癌前病变的客观指标之一。

目的:研究乙醛脱氢酶2 (ALDH2) 基因多态性在江苏汉族人中的分布频率及其与饮酒习惯的关系。方法:在江苏泰兴市选择273 例正常人进行流行病学调查研究,并应用聚合酶链反应2限制性片段长度的多态性( PCR2RFL P) 方法检测研究对象的ALDH2 基因型。结果:ALDH2 变异型等位基因在中国人中的分布频率为47. 25 %。ALDH2 变异型等位基因携带者与ALDH2 正常等位基因携带者之间饮酒频度和每次饮酒量间差异均无显著性。结论:中国人ALDH2 酶的活性普遍缺乏。人们的饮酒习惯与ALDH2 基因型分布无明显的相关关系。

目的: 探讨仙鹤草、山楂、香菇、杏仁、大枣、板蓝根等6 种中草药的抗突变抗肿瘤作用及其机制。方法:采用抗突变和致突变同步快速试验研究了6 种中草药的抗突变和致突变性;采用体外抑瘤试验研究了6 种中草药的4 个浓度组对4 种肿瘤细胞的抑制作用。结果:经加和不加大鼠肝脏微粒体酶(S9) 2 种试验,6 种中草药均未显示有致突变毒性,香菇、山楂、杏仁、大枣显示对MMC 引起的致突变作用有拮抗效应;仙鹤草、山楂、香菇水溶性提取液的各浓度组对4 种肿瘤细胞的3H2TdR 掺入均有抑制作用,且随浓度的增加,抑制作用有增强趋势。结论:香菇、山楂、杏仁、大枣具有抗突变活性,仙鹤草、山楂、香菇对MT2 Ⅱ、L929 、SK、K562 4 种细胞的DNA 合成有明显抑制作用。

目的:探讨碳酸锂(Li2CO3) 对放化疗肿瘤患者有无抗遗传及抗氧化损伤作用。方法:给予临床放化疗肿瘤患者Li2CO3联合用药治疗,采用单细胞凝胶电泳试验、外周血淋巴细胞微核试验及生化试验方法测定DNA 损伤、微核率(MNF) 、超氧化物歧化酶(SOD) 和谷胱苷肽过氧化物酶( GSH-Px) 活力、疏基(2SH) 和丙二醛(MDA) 含量。结果:随Li2CO3 疗程及剂量的增加,联合用药组与单纯放化疗组相比DNA 断裂分级、慧星尾长、MNF 显著降低( P < 0. 05) ; SOD、GSH-Px 活力、2SH 含量、WBC 总数显著增高( P < 0. 01) 。结论:Li2CO3 可降低肿瘤患者遗传损伤程度,提高其抗氧化酶活性,降低抗癌药物的骨髓抑制作用。

目的:探讨中国南方汉族人群O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶(MGMT) 基因5 个外显子的多态性与肿瘤易感性的关系。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)-DNA 直接测序法对100 例正常人和88 例肿瘤患者外周血白细胞进行MGM T 基因多态性研究。结果:正常人群和肿瘤患者第3 外显子第84 位密码子的第1 个碱基C 被T 所取代,导致错义突变(CTT →TTT) ,氨基酸由亮氨酸(Leu) 变成了苯丙氨酸( Phe) ;第4 外显子第94 位密码子的第3 个碱基C 被T 所取代,导致同义突变( TTC →TTT ,均编码Phe) 。这2 个位点的多态性在2 组人群中的检出率差异不存在统计学意义( P >0. 05) 。同时在肿瘤患者中还检测到MGM T 基因第5 外显子第200 位密码子的第2 个碱基G被C 取代,即GGC →GCC ,所编码的氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸,这一多态不存在于正常对照中。结论: MGM T 基因第3 、4 、5 外显子上存在着多态性,其中第3 、4 外显子的多态改变与肿瘤形成的关系较弱,而第5 外显子的多态仅见于肿瘤患者,可能与肿瘤的形成有关。

目的: 探讨新疆阿魏蘑菇提取物对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:不同剂量阿魏蘑菇的水提物和醇提物(10 - 1 g/ ml、10 - 2 g/ ml、10 - 3 g/ ml、10 - 4 g/ ml、10 - 5 g/ ml、10 - 6 g/ ml) 与肿瘤细胞共培养24 h 后,采用结晶紫染色及Bradford 法测定人肝癌细胞株(Q3) 、人胃癌细胞株(MGC2803) 、人宫颈癌细胞株(Hela) 、小鼠肺腺瘤细胞株(SPC2A21) 的细胞存活量及蛋白质合成。以大鼠正常肝细胞(BRL) 为正常对照细胞株。结果:阿魏蘑菇水提物、醇提物10 - 1 g/ ml 剂量组对各类型肿瘤细胞的生长及蛋白合成均有明显抑制作用;醇提物不同剂量组对肿瘤细胞生长及蛋白合成可产生不同程度的影响,对正常肝细胞的存活量无影响,但可促进肝细胞的蛋白合成。结论:阿魏蘑菇提取物的抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞生长及蛋白合成有关。

目的:筛选有抗突变作用的水果。方法:采用抗突变和致突变同步快速试验对樱桃、桑葚、葡萄及杏做了加和不加大鼠肝脏微粒体酶(S9) 的2 种试验。结果与结论:4 种检品均未发现致突变性,樱桃、桑葚、葡萄和杏对丝裂霉素C 引起的致突变作用有拮抗效应。

目的:探讨某市自来水有机提取物对小鼠的诱变性。方法:采集淮河水源水、自来水厂滤池出水、氯化消毒自来水及大型贮水箱水各200 L 。经吸附,提取有机物后予小鼠灌胃染毒,检测胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率,并作U 检验。结果:淮河水源水及氯化消毒的自来水均有一定的致突变性。毒性大小依次为氯化消毒的自来水> 贮水箱水> 水源水> 滤池出水。结论:淮河水源水已受到有机诱变物的污染,混凝沉淀具有去除有机物、降低源水诱变性作用,而氯化消毒使水质的诱变性增高。

目的:研究美洛昔康是否有潜在的遗传危害。方法:利用Ames 试验、染色体畸变试验和微核试验对美洛昔康的突变性进行研究。结果:在±S9mix 条件下,各剂量组对TA97 、TA98 、TA100 和TA102 菌株无诱发回复突变菌落数增加作用;对中国仓鼠成纤维细胞(CHL) 染色体无畸变作用;以240 mg/ kg·bw、120 mg/ kg·bw、48 mg/ kg·bw 和16 mg/ kg·bw 的美洛昔康对小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核细胞率无增加作用。结论:在本实验条件下,美洛昔康对Ames 试验、染色体畸变试验和微核试验无致突变效应。

目的与方法:采用Ames 试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验检测甘泰康的遗传毒性,为其食用安全性提供依据。结果与结论:3 项遗传毒性试验均为阴性,甘泰康对所试菌株、小鼠体细胞及雄性生殖细胞无诱变性。

目的: 本文报道了邻苯二甲酸(2-乙基己基) 酯(DEHP) 小鼠致畸试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和Ames 试验的研究结果。结果与结论:DEHP 大剂量(1 000 mg/ kg、2 000 mg/ kg) 时对小鼠有明显的胚胎毒性和致畸性。DEHP 对Ames 试验的4 个标准菌株无明显诱变作用,但可致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成,并具染色体畸变效应。

目的与方法: 采用精子畸形试验、微核试验、Ames 试验和大鼠传统致畸试验,对天麻花粉片的致突变性和致畸性进行了研究。结果:3 个剂量组的微核率和精子畸形率与阴性对照组比较差异无显著性,各剂量组的回变菌落数均未超过溶剂对照组的2 倍,未见母体毒性和致畸性。结论:在本实验条件下,天麻花粉片未见致突变性和致畸性。

目的:探索紫松果菊对荷瘤小鼠的抑瘤及产生肿瘤坏死因子( TNF) 的作用。方法:测量小鼠荷S180瘤株前后体重及瘤重,微量NAG释放法测血清TNF。结果:紫松果菊对小鼠S180没有抑瘤效应,但能明显降低荷瘤小鼠产生TNF 的水平。结论:紫松果菊有抑制小鼠产生TNF 的作用,因此可能具有抗炎和抗过敏的作用。

目的:研究肺癌患者血清结合珠蛋白HP1 基因型及正常对照组HP1 型与肺癌遗传易感性的关系。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,测定了166 例肺癌患者及155 例正常人的血清结合珠蛋白表型频率和基因频率。结果:肺癌患者HP1 - 1表型频率为0. 138 ,HP2 - 1为0. 398 ,HP2 - 2为0. 464 ;正常人对照组HP1 - 1表型频率为0. 072 ,HP2 - 1为0. 368 ,HP2 - 2为0. 554 。两组间HP1 - 1表型频率差异明显,但尚无显著性( P > 0. 05) ;肺癌组HP1基因频率为0. 337 ,正常对照组为0. 261 ,两者间有显著性差异( P < 0. 05) 。结论: HP1基因型可能与某种肺癌遗传易感性有关。

细胞凋亡受线粒体的调控,线粒体通透性改变(MPT) 在凋亡中起着关键作用。Bcl-2 家族蛋白等许多因子作用于线粒体,使线粒体膜上的通透性改变孔(PTP) 开放,线粒体跨膜电位(ΔΨm) 降低甚至崩解,线粒体释放出细胞色素c、凋亡诱导因子(AIF) 等凋亡相关因子,激活caspase 级联反应,导致细胞凋亡。

PTEN/ MMAC1/ TEP1 基因是1997 年克隆到的一个新的肿瘤抑制基因,具有酪氨酸磷酸酶的活性,有促进细胞凋亡,参与细胞周期的调控以及抑制细胞的粘附及肿瘤转移的作用。本文阐述了PTEN 的结构功能,以及在肿瘤抑制中的作用机制。