目的:克隆Trail 基因cDNA 全长,构建Trail 的原核表达载体,从而建立其原核表达体系。方法:通过抽提外周血淋巴细胞总RNA 进行RT - PCR 克隆Trail cDNA ,构建Trail 的原核表达载体,用限制性酶切和DNA 测序进行鉴定,以温度进行诱导表达,通过SDS - page 分析表达产物。结果: (1) 克隆了Trail 基因cDNA 全长,DNA 测序结果与报道的完全一致; (2) 构建了Trail 基因原核表达载体; (3) 将构建好的载体转化相应的宿主菌,诱导后得到了Trail 蛋白表达产物。结论: Trail 基因cDNA 的克隆将对于其抗肿瘤作用研究有重要意义,同时此基因原核表达系统的建立为其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。

目的:为了研究HDAC1 保守氨基酸的定点突变对其功能的影响,需要建立HDAC1 保守氨基酸定点突变的突变子。方法:在克隆HDAC1 cDNA 的基础上,利用Altered Site Ⅱ体外突变系统对HDAC1 保守氨基酸中的三个氨基酸位点进行突变,经DNA 测序鉴定。结果与结论:结果分别获得了HDAC1 的C151A ,Y188F ,S197A 的定点突变子,为进一步研究HDAC1 保守氨基酸的定点突变对其功能的影响打下了基础。

目的:为研究外源性镉金属硫蛋白(CdMT) 对淋巴细胞DNA 的损伤和修复作用。方法:采用单细胞电泳法(SCGE) 检测DNA 单链断裂(SSBs) ,观察在脱金属硫蛋白(Apo - MT) 和不同终浓度CdMT(0. 1μmol Cd2 + / L 、1. 0μmol Cd2 + / L 、10. 0μmolCd2 + / L 、20. 0μmol Cd2 + / L) 染毒作用30 分钟和60 分钟时DNA 链损伤,和去除受试物后30 分钟、60 分钟、120 分钟时DNA链损伤的修复。结果:DNA - SSBs 尾长在Apo - MT 作用未见增加;在中、高剂量CdMT 染毒30 和60 分钟时都明显增长。损伤后链修复DNA 迁移尾长,在中、高剂量CdMT 组都显著低于细胞染毒时,但明显高于对照和Apo - MT 组。结论:提示CdMT 直接作用可致脾淋巴细胞DNA 链的损伤,同时细胞存在对单链断裂的修复机制。

目的与方法:采用液体闪烁计数法及125 I 后标记法检测燃煤型砷中毒人群血细胞DNA 自发合成、DNA - 蛋白质交联物(DPC) 水平及非程序外DNA 合成(UDS) 反应,以探讨燃煤砷污染对人体DNA 合成、DNA 损伤及修复的影响。结果:病区非病人及中毒病人的DNA 合成明显降低,DPC 水平随病情加重而升高;而UDS 反应则只在中毒病人体内增强,差异均有显著性。结论:燃煤砷可在早期致人体内DPC 形成,引起严重的DNA 损伤;亦能诱导中毒人群UDS 反应增强,明显抑制DNA 合成和修复,此可能为砷致皮肤癌敏感性增加的原因之一。

目的与方法:本实验采用体外细胞培养的方法,研究了维生素E 琥珀酸酯(VES) 对人胃癌SGC27901 细胞生长和DNA合成的影响,并进行了细胞凋亡形态学观察。结果:VES(5μg/ ml、10μg/ ml 和20μg/ ml) 对SGC27901 细胞生长和DNA 合成有明显抑制作用,并呈现剂量—效应关系。同时,VES 也诱导SGC27901 细胞凋亡。结论:上述结果提示在离体条件下,VES 通过抑制细胞DNA 合成及诱导细胞凋亡抑制SGC27901 细胞生长。

目的与方法:应用免疫组化法检测碳酸锂(Li2CO3) 对抗黄曲霉素B1 (AFB1) 诱导大鼠肝癌过程中癌基因蛋白cyclin D1的表达及意义。结果:cyclin D1 在诱癌早期(实验第6 周) 即有表达,第10 周显著增高,差异均有显著性( P < 0. 01) 。阳性对照组(B) 组cyclin D1 蛋白阳性率最高,碳酸锂同时给药组(C 组) 及先期给药组(D 组) 阳性率显著降低,C 组阳性率略高于D组。结论:Li2CO3 可明显对抗AFB1 诱导肝癌过程中cyclin D1 的表达,通过抑制细胞的持续性增殖从而起到抗癌作用。cyclinD1 的免疫组化检查有助于肿瘤的早期发现和追踪观察。

目的:应用流式细胞术AV/ PI 法研究胃癌组织的早期凋亡情况。方法:手术标本分离单细胞悬液,经AV - FITC 与PI 标记后流式细胞仪测定凋亡率。结果:分离的单细胞经标记检测后可明确区分凋亡细胞、坏死细胞与活细胞的比例;其比例关系在肿瘤组织与对照组之间有显著性差异。结论:AV/ PI 双参数法流式细胞仪检测可用于胃癌组织的早期凋亡的检测为胃癌的临床研究提供可行方法。

目的与方法:为筛选有抗突变作用的物质,采用抗突变和致突变同步快速试验对蜂蜜、蜂王浆、蜂采花粉、百合、海带、柳芽、薏米仁、槐豆、蘑芋、桂圆、胖大海、车前叶、白菊花、山药、芫荽、榆叶、南瓜籽、南瓜肉、冬瓜肉、冬瓜皮、佛手瓜、菱角22 种可食性中药材进行了试验。结果与结论:经加和不加大鼠肝脏微粒体酶(S9) 两种试验,结果全部受试物均未发现致突变毒性;蜂蜜、蜂王浆、蜂采花粉、柳芽、槐豆、桂圆、白菊花、山药及菱角9 种显示对丝裂霉素C 引起的致突变作用有拮抗效应。

目的与方法:用人精子染色体畸变试验分析昆明山海棠对人精子染色体畸变率和断裂均数的影响。结果:结果显示昆明山海棠( THH) 50μg/ ml、100μg/ ml、200μg/ ml 3 个剂量组的染色体畸变率分别为11154 %、15171 %、16179 % ,断裂均数为0.1346 、0. 2143、0. 2214 ,与空白对照组畸变率(7. 25 %) 和断裂均数(0. 1014) 比较,除50μg/ ml 剂量组外,其余2 组均有显著性差异, P < 0105。结论:结果表明THH 对人精子染色体具有致断作用,其是否可作为男性避孕药尚待进一步研究。

目的与方法:为了阐明P53 蛋白在人肝癌细胞中表达及临床意义,应用了免疫组织化学染色方法检测肝细胞癌P53 蛋白表达情况。结果:49 %(36/ 74) 的病例显示有P53 蛋白的表达,低分化癌的P53 蛋白表达率显著高于高、中分化癌(χ2 检验P < 0105) 。结论:这些资料显示:导致P53 蛋白异常表达的P53 基因突变是肝细胞癌的一种常见的分子结构改变,是评价肝细胞癌预后有价值的一个生物学指标。

目的与方法:应用小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变试验、Ames 试验以及传统致畸试验,对保健食品益力淇的遗传毒性与致畸作用进行了试验研究。结果与结论:结果表明,三项遗传毒性试验均为阴性,说明对小鼠体细胞、生殖细胞及所试菌株无诱变性;在所试剂量下,对孕鼠无母体毒性、无胚胎毒性及致畸作用。

目的:为进一步探讨刺五加对实验性肝癌发病的干预作用及其可能机理。方法:43 只雄性大鼠被随机分成3 组①正常对照组:喂普通饲料　②3′- MeDAB 组:喂含0106 %3′- MeDAB 饲料10 周　③刺五加组:除致癌剂外另加入刺五加(4. 5g/kg 饲料) ,历时20 周。实验过程中所有动物均自由进食及饮水。结果:刺五加组较3′- MeDAB 组: ①外周血液及肝组织中PAI - 1 含量明显减少( P < 0105) 。②肝细胞周期时相G0/ G1 比率增加( P < 0101) ,S 期和G2M 期比率减少( P < 0101) ,PI 和DI 减低(均P < 0101) , ③肝细胞rasp21荧光指数减低( P < 0105) , ④免疫组化PCNA 阳性表达率降低。⑤光镜及电镜检测均显示有一定程度减轻。结论:上述结果提示刺五加适于被开发为常规抗癌辅助药物。

目的与方法:本文对54 例口腔白斑患者(均为吸烟者) 进行了口腔脱落粘膜细胞微核和外周血淋巴细胞微核及染色体畸变率检测。结果:吸烟的口腔白斑患者口腔脱落粘膜细胞微核细胞率和外周血淋巴细胞微核细胞率及染色体畸变率均显著高于正常人,且口腔白斑病损区的脱落粘膜细胞微核细胞率的变化与口腔白斑病变程度相关,正常区粘膜脱落细胞微核细胞率的高低与外周血淋巴细胞微核细胞率呈正相关。结论:结果表明,口腔白斑病损区脱落粘膜细胞微核细胞率可反映组织病变程度,用口腔脱落粘膜细胞微核细胞率替代外周血淋巴细胞微核反映机体接触致癌物水平更简便易行。

目的与方法:本文采用Ames 试验及活体小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验方法,对香菇多糖胶囊进行抗突变试验,结果:香菇多糖胶囊各剂量组在加与不加S9 的条件下,均能抑制由2 - 氨基芴等阳性物引起的TA98 、TA100 回变菌落数的增加;抑制由环磷酰胺引起的小鼠微核率的增加,抑制率在45. 32 % - 64. 72 %。结论:香菇多糖胶囊具有一定的抗突变作用。

目的:应用八峰氨基酸口服液对大鼠进行了传统致畸试验。观察本品是否引起母体毒性和胚胎毒性反应。方法:设8g/ kg、4g/ kg、2g/ kg(相当临床的30 ,15 ,6 倍) 3 个剂量组。浓鱼肝油为阳性对照物,自来水为阴性对照组。结果:高、中剂量组孕鼠体重增长明显高于阴性对照组,高、中、低剂量组的胎鼠体重也都高于阴性对照组。结论:八峰氨基酸口服液各剂量组对胎鼠有促进生长发育的作用,对孕鼠无母体毒性,无胚胎毒性和致畸作用。

目的与方法:本文应用DNA 合成抑制(DSI) 实验对居民家庭烹调油烟进行了致突变性研究。结果:实验结果表明,不同浓度的烹调油烟凝聚物均可见到DNA 合成抑制,具有明显的剂量—效应关系。结论:实验证实,烹调油烟中存在着引发人体细胞DNA 损伤的遗传毒性物质。

目的:本文主要研究人食管癌109 细胞株经8-Br-cAMP 诱导后细胞凋亡的发生。方法:用TUNEL 法观察诱导后细胞凋亡情况。结果:人食管癌109 例细胞株自发凋亡率为1013 %;经8-Br-cAMP 诱导后凋亡倾向细胞增加。结论:8-Br-cAMP具有促进人食管癌细胞凋亡倾向的效应。

目的与方法:利用体内微核试验方法,进行维生素C(Vc) 抗金属六价铬(Cr + 6 ) 诱变作用的效果观察。结果:浓度在2.5 %和5. 0 %的Vc 有明显的抗诱变能力,并呈剂量—反应关系。结论:上述结果提示Vc 对Cr + 6有拮抗作用。

目的:了解长期小剂量职业受照者的细胞遗传学变化。方法:以外周血淋巴细胞浓集法对安徽省阜阳市100 名医院放射科从业人员于1990 年、1992 年、1994 年和1996 年连续4 次作微核检测。结果:未见微核率有逐年升高的趋势,微核率分别为0. 230 ‰、0. 230 ‰、0. 235 ‰和0. 236 ‰,然而却有随放射工龄的增加而上升的趋势,但均无统计学意义。结论:微核率与累积剂量、放射工龄的关系还有待进一步探讨。

细胞凋亡是细胞生长、发育过程中一个重要的生命现象,而目前发现的一组caspase 的蛋白酶参与了凋亡的各个时期。其中,死亡受体和线粒体是对外来有害刺激或死亡信号进行加工处理,并决定是否启动凋亡通路的关键部位。本文就死亡受体和线位体在细胞凋亡中的作用及作用机理等方面的新进展作一综述和介绍。

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