本文介绍一种端粒酶检测方法,该方法是将TRAP 法在PCR 过程中引入3 H2dCTP ,结合液闪计数cpm 半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的CNE2 细胞和部分组织标本及RNase A 或加热预处理后的对照标本,并与TRAP 法相比较,结果显示CNE2 细胞端粒酶阳性,10 个CNE2 细胞中仍可检到端粒酶,组织样品的端粒酶与文献值基本一致;放射性活性计数(cpm) 与CNE2 细胞抽提液中端粒酶活性具有良好的线性关系;用RNase A 或加热处理后标本为阴性,cpm 值接近阴性对照;批内和批间变异度分别为11. 68 %和20199 %。该方法不需使用聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE) 和放射自显影,简便快速,当天可观察结果,并具有灵敏度高、特异性和批内重复性好之特点。

为了探讨DNA - 蛋白质交联物(DPC) 与肺癌的联系,以人肺癌组织为研究对象,用敏感的125 Ⅰ- 后标记新技术检测了不同细胞类型肺癌的DPC 形成情况。结果显示,肺癌组织DPC 的平均水平较癌旁对照肺组织高,提示较高的DPC 水平可能与肺癌的发生或促进有关。研究结果未见肺鳞癌与肺腺癌之间的DPC 水平有明显差别,亦未发现吸烟对肺癌组织DPC 形成有明显的影响。

大鼠肝细胞色素P450 含量与年龄相关的变化是由特异的细胞色素P450 酶引起的。探讨衰老与细胞色素P450 3A(CYP3A) 的活性是否有关,本文用红霉素N - 脱甲基酶活性测定法分别检测了SAM - R1 、SAM - P1 和SAM - P8 三组衰老加速鼠(SAM) 中肝微粒体细胞色素P450 3A 的活性,每组动物分为7wk、13wk、36wk 组。结果发现SAM - P1 和SAM - P8 组中随年龄增长,CYP3A 的活性均降低。13wk 时, SAM - P1 组CYP3A 活性下降3915 %( t = 2. 525 , P < 0. 05) ; SAM - P8 组CPY3A 活性下降约4317 %( t = 2. 24 , P < 0. 05) ,36wk 与13wk 组相比,SAM - P1 组CYP3A 活性下降约7113 %( t = 2. 84 , P< 0. 02) ,SAM - P8 组中降低约62. 9 %( t = 3. 21 , P < 0. 01) ,SAM - R1 组中7 至13wk 时降低约1316 % ,13wk 至36wk 降低约3812 % , t = 2. 37 , P < 0. 05。提示细胞色素P450 3A 对衰老有重要影响作用。

本文探讨WT1 基因在各种白血病中的表达及其临床意义。应用逆转录酶链反应(RT2PCR) 法测定K562 细胞株,23例白血病患者,其中AML12 例,ALL3 例,CML7 例,CLL1 例;2 例恶性淋巴瘤( Ⅲ期) 患者骨髓或外周血及10 例正常人外周血WT1 基因表达。K562 细胞株高度表达WT1 ,急性髓性白血病(AML) 12 例中10 例,急性淋巴细胞白血病(ALL) 3 例中2 例,急性粒细胞白血病(CML) 急性变6 例表达阳性;CML 加速期、慢性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤( Ⅲ期) 和10 例正常人外周血T1 基因表达阴性。WT1 基因在早期造血细胞中表达,与急性白血病密切相关,有可能作为残余白血病细胞检测的特异性指标。

本文通过鼠伤寒沙门氏菌致突变试验(Ames Test) ,分析常用氯化消毒方法对饮用水遗传毒性的影响。水样采自某单位自备水源。试验结果表明,未氯化自来水有机提取物致突变反应阴性,加氯自来水样诱发沙门氏菌致突变率升高;在一定范围内,随氯浓度增加,不会显著增加水样的致突变性。同时检测加氯后中和水样的致突变性,加中和剂处理后水样致突变性降低。提示加氯消毒水样致突变性可以通过水处理工艺加以改进,为饮水氯化消毒的致突变研究及其防治提供毒理学依据。

作者研究观察了亚硝酸钠和N - 甲基苄胺的遗传毒性作用。结果表明,亚硝酸钠和N - 甲基苄胺不产生急性遗传毒性( P > 0. 5) ,但具有中长期遗传毒性。长期接触可诱发大鼠胃窦及食道上皮的增生性病变,使胸腺指数降低,骨髓细胞MN ‰升高。

本文应用实验动物模型,分别研究了被动吸烟对小鼠的遗传毒性、生殖毒性和胚胎毒性的效应。昆明种小鼠随机分成不同的实验组,分别以4. 7g/ m3 、9. 4g/ m3 和18. 8g/ m3 的香烟烟雾浓度染毒,并分期进行上述各项研究。实验结果表明,雄性小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率、骨髓细胞的SCE、早期精细胞微核率、精原细胞染色体畸变率和精子畸形率都随被动吸烟的浓度而上升( P < 0. 05 , P < 0. 01) ;而且两者呈正相关。同时,雌性小鼠的高、中剂量组胎鼠存活率下降,死胎增加,平均身长、尾长和体重减少,骨骼发育不良的个体增加。这些结果表明了被动吸烟有较明显的致畸、致突变效应。

利用环磷酰胺(CP) 和香烟烟雾凝集物(CSC) 对已知药物芦荟和大蒜的植物体进行了微核诱变检测,同时研究了它们的提取物的抗微核诱变效应。结果表明,芦荟和大蒜植物体及其提取物具有良好的抗诱变能力( P < 0. 01) 。

本文采用不同浓度的螺旋藻酒精提取液处理蚕豆根尖,随后以吐温20染毒,以观察螺旋藻制剂对吐温20引发的蚕豆根尖细胞微核发生率的抑制作用。从蚕豆根尖细胞微核发生率角度,经统计分析:以吐温20染毒的阳性对照组与阴性对照组比较P < 0. 01 ;经最佳浓度螺旋藻酒精提取液处理后以吐温20染毒组与阳性对照组比较P < 0. 01。结果表明:吐温20是引发显著微核效应的强诱变剂,而螺旋藻制剂对其引发的蚕豆根尖细胞微核发生率有明显抑制作用,进而从细胞水平探讨了螺旋藻在肿瘤发生发展的启动阶段的防癌作用机理。同时,本实验初步获得较为简易的螺旋藻有效成份提取方法。

本文利用蚕豆根尖细胞微核技术检测两种卫生杀虫气雾剂的致突变性,其结果蚕豆根尖细胞微核率分别为26. 75 ‰;27. 67 ‰,与做为阴性对照的自来水相比较,经统计处理均有显著性差异( P < 0101) ,并呈现剂量反应关系。小鼠骨髓微核试验阴性。实验结果提示,卫生杀虫气雾剂能诱发蚕豆根尖细胞微核率增加,具有致突变性。

采用SOS 抗突变和致突变同步快速试验对人们常食的菜花、韭菜、洋白菜、瓠子、芹菜、丝瓜、苦瓜、西葫芦8 种蔬菜进行了加与不加大鼠肝脏微粒体酶(S9) 系统的抗/ 致突变两种属性的研究。结果表明:菜花、韭菜、洋白菜及瓠子有抗突变性;芹菜在无S9 试验中显示抗突变性,丝瓜在有S9 试验中显示抗突变性,其余未显抗突变性。均未发现致突变作用。

云南松毛虫成虫提取物(ADK) 口服给药(3438mg/ kg ,6876mg/ kg 和17190mg/ kg) 小鼠的微核率分别为2. 16 + 0. 76( ‰) ,1. 83 ±0. 41 ( ‰) 和1. 67 ±0. 81 ( ‰) ,各剂量组与阴性对照组比较无显著性差异( p > 0. 05) ,与环磷酰胺阳性组比较有极显著的差异( p < 0. 01) ,说明在本实验条件下,ADK无诱发小鼠骨髓PCE 微核率增加的作用。

本文以Budr-Giemsa 技术检测研究了接受黄芪注射液治疗的33 例病人的外周血淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE) 频率,结果表明,治疗后比治疗前病人的SCE 率有显著的增加,有统计学差异( P < 0. 01) ,说明黄芪注射液能诱发DNA 损伤。

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目的:研究铅对胎脑神经细胞增殖和分化的影响,为进一步揭示其脑发育毒性作用机理提供依据。方法:应用大鼠胚胎中脑细胞微团培养法,观察不同浓度的醋酸铅对胚胎脑细胞增殖和分化的影响。结果:醋酸铅对体外培养的中脑细胞的增殖和分化均有抑制作用,并均有明显的浓度- 效应关系。醋酸铅的神经细胞半数增殖抑制浓度( ICp50) 为3. 69μmol/ L ,半数分化抑制浓度( ICd50) 为1. 03μmol/ L 。结论:按Flint 评价标准,醋酸铅是脑细胞分化的特异抑制剂,它的脑细胞发育毒性与抑制细胞的增殖和分化有关。

为研究硫丹是否具有雌激素活性,以摘除卵巢的NIH 雌性小鼠为对象,用多终点体内试验法,观察子宫体重比、子宫积液、动情周期转换、子宫上皮细胞高度及子宫基质细胞层厚度五项指标。结果显示:硫丹组(0. 5mg/ kg/ d ,1. 5mg/ kg/ d 和3.0mg/ kg/ d) 的五项指标值与阴性对照组相比无显著性差异,且三个组之间无明显的剂量—反应关系。以上结果提示在本实验条件下,硫丹不具有雌激素活性。

从明亮发光杆菌T3 小种( Photobacterium Phosphoreum T3 Sp) 分离到的自发暗变种( k 变种) T9171 菌株检测十种化合物,其中六种化合物呈致突变阳性反应,二种化合物呈可凝阳性,二种化合物呈阴性反应,该方法比较传统的Ames 试验检测化合物致突变效应灵敏度高,可望成为一种简易灵敏的测试环境致突变物的短期生物学试验方法。

为探索MTS1 基因变异在乳腺癌的发生及恶性进程中的作用,作者应用多重PCR 技术对47 例原发性乳腺癌组织进行了检测。结果显示17 例纯合性缺失,变异率为3612 % ,其中淋巴结转移组的变异率60 %(9/ 15) 显著高于未转移组25 %(8/32 , P < 0105) ,浸润性导管癌变异率显著高于其它类型癌。本研究结果提示,MTS1 基因在乳腺癌组织中有变异存在,其变异的频率与肿瘤的恶性程度及组织分型密切相关。

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为了筛选天然的抗突变物,我们运用致突/ 抗突变同步快速试验方法对安徽省常见的9 种蔬菜的致突变性与抗突变性进行了研究。结果表明:九种蔬菜汁、片或渣均无致突变性,而韭菜、胡萝卜、茄子、大蒜(茎和叶) ,山芋、菠菜、卷心菜、绿花菜、花菜均具有抗突变性,大白菜(梗) 无抗突变性。研究还发现不同种类的蔬菜其汁(水溶性提取物) 和渣的抗突变性有差异。

为了探讨葡多酚( GPC) 对肿瘤放射治疗的协同作用,将荷S180肉瘤小鼠分别给予60Coγ射线局部照射、口服GPC 和局部照射加口服GPC 等不同方法处理,接种瘤细胞后第12 天,检测动物的瘤重,血白细胞计数,脾淋巴细胞转化率等指标。结果表明,阳性对照组的平均瘤重高于其他各组;照射加高剂量GPC 组的肿瘤抑制率高于单纯照射组和GPC 组;单纯照射组的白细胞计数低于其他各组。经统计学t 或χ2 检验,以上差别均有显著性意义( P < 0105) 。提示GPC 具有一定抑瘤作用,与辐照联合应用可产生协同增效作用。

野八角( Illicium Simonsii Maxim) 系八角科( Illicium) 同属植物。主要分布于贵州西北部地区,分布广,藏量大。当地群众用果作腌卤,烹调食品的调料。为鉴定这种野生植物的安全性和合理开发的前景,我们用野八角果实的全粉对大、小白鼠进行了第一阶段的急性毒性试验和蓄积毒性试验,其LD50 > 5500mg/ kgbw 属实际无毒范围和K > 513 为弱蓄积。在致突变试验中,我们将野入角水提液和提出的挥发油部分行了Ames test ,其中挥发油部分采用了改良的予培养法。同时,用野八角全粉进行了小鼠PCE 微核试验和小鼠精子畸形试验。表明在该试验中既兼顾了体细胞和生殖细胞,体外原核和体内真核试验,结果均为阴性。故认为野八角在目前所测试的条件下,无致突变作用。为进一步试验和安全性评价提供了科学的依据。

对26 例小剂量受照人员受照26 - 31 年后,血清IgG、IgA 和IgM 的变化,淋巴细胞转化率,CD4 、CD8 和NK细胞阳性率进行了分析。结果表明,受照组体液免疫功能变化与对照组没有明显差异;CD4 、CD8 和NK细胞阳性率明显低于对照组,而CD4/ CD8 细胞比值明显高于对照组;淋巴细胞转化率亦低于对照组,差异接近显著。提示小剂量照射对机体细胞免疫功能具有一定的抑制作用。

本次研究采用了两组模拟装饰实验室,应用化学方法检测室内挥发性化学物的浓度及消除情况,同时在国内首次应用环境生物检测技术- 蚕豆叶尖细胞微核试验,发现了装饰材料中挥发性化学物的潜在致突变性,并与哺乳动物的遗传毒性有很好相关性。根据研究结果,获得居住者的最安全的接触时间,并首次提出了新装修居室的空气卫生标准建议值,为卫生部门制订有关标准提供科学依据。

本文应用Ames 试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,对三家单位提供的3 个批号rhEPO 注射液进行了致突变作用研究。Ames 试验结果:各受试物的5 个剂量组(18. 75～300. 00IU/ 皿) ,在活化及非活化条件下诱发TA97 、TA98 、TA100、TA102 菌株的回变菌落数未见明显增加;微核试验结果:各受试物在15000～60000IU/ kg 剂量范围内,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显增加。表明在本试验条件下,3 个批号rhEPO 注射液均无明显致突变作用。