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克隆适于构建可调控基因打靶载体的小鼠糖皮质激素受体( GR) 基因片段,为建立糖皮质激素受体基因缺陷型小鼠模型奠定基础。用PCR 扩增小鼠GR 基因第二外显子上562bp 的核酸片段作为探针,筛选小鼠基因组文库,共获得6 个阳性克隆。对C10 克隆进行详细的测序和酶切图谱和Southern 杂交分析后获得一6. 5kb 的基因片段。该片段含完整的GR 基因第二外显子,左右分别有319kb 和114kb 的DNA 片段可作为下一步构建基因打靶载体的同源臂。

本文分别对毒蕈碱型、烟碱型乙酰胆碱受体拮抗剂阿托品和筒箭毒碱在小鼠骨髓细胞中的C - 有丝分裂效应做了初步探讨,从而为该类化合物诱发非整倍体的可性和途径机制研究提供初步实验资料。实验用阿托品和筒箭毒碱,最高剂量为70 %LD50。结果发现,阿托品在最高剂量组(5. 2mg/ kg) 分别导致小鼠骨髓细胞有丝分裂指数和C - 有丝分裂频率显著升高( P < 0.001 , P < 0.05) 、有丝分裂后期细胞频率显著下降( P <0 .001) 。在受试剂量范围内,未发现筒箭毒碱具有类似效应(0.063 - 0. 125mg/ kg) 。毒蕈碱型乙酰胆碱受体拮抗剂阿托品在小鼠骨髓细胞中的C - 有丝分裂效应提示乙酰胆碱受体的正常功能与细胞有丝分裂的真实、准确性有一定关系,胆碱受体功能的异常可能为非整倍体产生的机制之一。

本研究用荧光原位杂交技术(FISH) 对9 名丙烯腈接触男工和9 名健康者精子性染色体数目畸变率进行了检测,结果显示,精子性染色体杂交点荧光信号强,背景清楚,在镜下容易观察;接触组和对照组杂交效率均大于99 %。9 名对照者X 和Y精子分别为4911 %和4916 % ,X、Y精子比例接近于1∶1 。对照人群精子性染色体数目畸变率与其它试验室检出结果基本一致。接触组和对照组分别共计数了91015 和74679 个精子细胞核,两组精子性染色体数目畸变率分别为0. 70 %和0. 35 % ,有显著性差异;其中接触组XX、YY、XY分别为0. 10 %、0. 23 %、0. 37 % ,明显高于对照组的0. 05 %、0110 %和0120 % ,表明使用荧光原位杂交技术(FISH) 能检出接触丙烯腈引起的精子性染色体数目畸变。

本文通过MNNG作用于xylE-ICR 转基因小鼠,按1/ 10LD50给药,每天1 次,连续5d ,最后一次给药后21d ,测小鼠肝组织突变率为21. 46 ×10 - 5 ,与对照组( < 4. 38 ×10 - 5) 比相差极其显著( P < 0. 01) ,表明该检测方法可作为规范化程序,对诱变物进行致突变研究的系统分析。

采用肝癌发生的动物模型,观察了碳酸锂(Li2CO3) 对抗黄曲霉素B1 (AFB1) 诱发的大鼠肝癌前病变的组织形态学变化及其P21 、Bcl - 2 蛋白的表达状况。Wistar 大鼠144 只随机分为A、B、C、D 4 组,分别为阴性、阳性对照及Li2CO 同时给药和Li2CO3 先期给药组。于实验第6 、9 、10wk 分批断头处死动物,取动物的肝脏进行组织形态学检查及免疫组织化学染色。结果发现:C、D 两组动物健康状况明显改善,肝癌前病变程度明显减轻;P21 、Bcl - 2 蛋白在诱癌早期(实验第6wk) 即有表达,第9 、0wk 显著提高,呈B 组> C 组> D 组> A 组的趋势,与各组肝脏组织形态学变化一致。提示:Li2CO3 具有明显地对抗和预防化学诱导肝癌的作用 P21 、 蛋白的动态检测有助于肝癌的早期发现及判断预后。

采用体外细胞培养法观察“天宝肿宁散”复方对人膀胱癌细胞( EJ ) 、人喉癌细胞(Hep22) 、人低分化粘液腺胃癌细胞(MGC2803) 、人肝癌细胞(Q3) 和人肺癌细胞(Spc2A21) 等肿癌细胞及小鼠成纤维细胞(3T3) 的生物学作用,并观察该方剂对正常小鼠和经环磷酰胺(CP) 处理小鼠的免疫机能、外周血象、造血功能及生存质量的影响。其结果显示该方剂具有一定杀伤肿瘤细胞的作用,并对环磷酰胺(CP) 的毒副作用具有减毒效应。

本文研究NNK诱发人支气管上皮细胞(BEP2D) 恶性转化及其氧化损伤机理。结果表明,500μg/ ml 的NNK作用后的第5 代细胞具有抗血清生长能力,第15 代细胞具有锚着独立生长特性,第25 代细胞具有裸鼠体内成瘤性,提示NNK诱发BEP2D 细胞发生了恶性转化。NNK作用后,BEP2D 细胞产生的过氧化氢(H2O2 ) 、超氧阴离子(O÷2 ) 和羟自由基(·OH) ,以及8 - 羟基脱氧鸟嘌呤(OH8dG) 含量均显著增高,提示NNK致BEP2D 细胞恶性转化过程中涉及到氧化损伤的机理。

本文用细菌学短期测试系统Ames 试验和SOS 显色法研究了珠江某自来水原水有机提取物的遗传毒性。8 个水样中1 个可诱导测试菌株TA98 的基因突变和PQ37SOS 反应,另一个水样则只诱发PQ37 的SOS 反应。细菌的遗传毒性与化学污染各单项数据没有直接的相关性( P > 0105) 。用模糊综合评判法处理水样的化学指标后发现,水样的遣传毒性和化学污染的综合强度间具有某些一致性。结果说明生物学测试和化学测试在揭示水源水有机物污染程度和潜在危害方面具有互补性模糊综合评判法的应用可作为比较生物学试验和化学测试结果的一种途径。

本文用Ames 试验,体外染色体畸变试验和微核试验对rh2bFGF 进行了致突变性研究。结果显示,rh2bFGF 的各剂量组对TA97 、TA98 、TA100 、TA102菌株在±S9mix条件下无致突变性;在±S9mix条件下的染色体畸变试验中,rh2bFGF 的4 个剂量浓度对CHL 细胞染色体无畸变作用;以0. 53mg/ KG·bw、2. 13mg/ KG·bw、8. 50mg/ KG·bw、34. 0mg/ KG·bw 的rh2bFGF 对小鼠骨髓多染红细胞无诱发微核增加作用。实验结果表明,rh2bFGF 无致突变作用。

用S 江冬夏两季的江水有机提取物分别做NIH3T3 细胞转化试验。结果表明:江水有机提取物各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶,其细胞转化率呈现剂量—反应关系。转化细胞的恶性表现是生长失去接触性抑制并能在软琼脂内生长。进一步提示了S 江有机污染有潜在的致癌危险性。

本文采用Ames 系统对21 种中草药60 %乙醇提取试样抗3-amino-1 ,4-dimethyl-5H-pyrido 4 ,3-bindole ( Trp-P-1) 致突 变活性进行检测。实验结果表明,其中七种中草药:猫人参、黄药子、关木通、山偏柏、半支莲、五加皮、花椒具有较强的抗Trp-P-1 致突变活性。川牛膝、莪术的乙醇提取物没有抗Trp-P-1 致突变活性,但是川牛膝、莪术的水提取物有抗Trp-P-1 的致突变活性。

本研究用中国原子能科学院物理研究所的HI－13 串列加速器产生的Li (Z = 3 ,L ET = 100keV/μm) 离子束以0. 5 - 6.0Gy 剂量照射人支气管上皮细胞系(BEAS - 2B) ,来观察重离子辐射诱发的细胞染色体畸变。分析经Li 离子照射细胞的染色体,除了如同对照组那样的发现5 号、15 号、22 号的X 染色体丢失、出现4 条标记染色体及染色体数目仍以46 条为主以外,在早期细胞中有非稳定性畸变,对照组细胞丢失的21 号染色体重新出现以及X 染色体丢失。

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON) 、雪腐镰刀菌烯醇(NIV) 均属于单端孢霉烯族毒素,是赤霉病麦中最常检出的毒素,常常单独或联合污染粮谷类。它们主要由某些镰刀菌产生,可对人类和不同种属的动物产生广泛的毒性效应。本文综述了DON、NIV 近年毒理学方面的研究进展。

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