本研究建立了荧光原位杂交(FISH) 方法,并测定了十名正常健康男子精子X 染色体非整倍体率。取少量精液经洗后制片,用二梳苏糖醇(DTT) 和二碘水杨酸锂(L IS) 处理,使精子头部紧密的染色质去凝集,然后与生物素标记的α- 卫星X 染色体特异DNA 探针(DXZ1) 作原位杂交;用Cy3 - 链亲和素检测杂交信号。结果在荧光显微镜下可清楚见到带有红色杂交点信号的X 精子。杂交率平均为48.62 % ( 47.54 % -49.36 %) 。此值与X 精子占50 %的理论值差别无显著性。总共计数55453 个X 精子,X 染色体双体率为0.06 %;此结果与国外一些学者先前报导的结果一致,本研究提供的正常人X 精子双体率的资料,为今后研究职业或环境潜在非整倍体诱导剂对人精子的影响提供有价值的材料。

为了探讨bcl - 2、P53 在喉鳞癌组织中的表达情况、预后的意义,我们应用免疫组化LSAB 法对53 例喉鳞状上皮细胞癌组织进行bcl - 2、P53 基因蛋白表达的测定。结果显示: (1) 47. 17 %的喉癌中检出突变型p53 蛋白,在部分喉癌癌旁不典型增生上皮中可见P53 蛋白表达,癌旁组织细胞已发生P53 基因突变可能是术后复发的根源,突变型P53 蛋白过度表达是喉癌发生的早期事件。P53 蛋白表达与较低的病理学分级、较高的核分裂数有关( P < 0. 05 , P < 0. 01) ,P53 蛋白表达阳性者肿瘤组织坏死例数高于P53 表达阴性者( P <0. 01) ,P53 蛋白表达阳性者生存期低于P53 表达阴性者,P53 表达与淋巴结转移及患病年龄无关,对判断肿瘤的恶性程度、预测肿瘤分化及预后有较高实用价值。(2) 喉鳞癌组织中bcl - 2 蛋白表达与较低的核分裂数及较小的患病年龄有关( P < 0. 05 , P < 0. 05) ,而与病理学分级、组织坏死、淋巴结转移及患者存活期无关,没有独立的预后价值。

为确定CHL 细胞为测试靶细胞时FADU 的较佳实验参数,采用变化解旋温度及解旋液碱浓度,并根据Birnboim 等的判断标准,结果表明解旋温度先0 ℃30min 后15 ℃60min ;解旋液NaOH 浓度014N 效果较佳。并以此为条件把该法应用于检测过氧化氢(H2O2) 诱导的DNA 过氧化损伤- 适应及抗过氧化作用,结果证明了所选用参数的可靠性。

采用长春新碱、秋水仙素(纺锤体毒剂) 、丝裂霉素C 和环磷酰胺(断裂剂) 对V79 细胞染毒,发现两类诱变剂在诱发多核与微核的敏感性和强度上存在显著差异。当剂量较高时,四种诱变剂都可诱发多核与微核,但纺锤体毒剂以诱发多核为主,多核细胞率与微核细胞率的比值为2. 0 - 3. 5 ;而断裂剂以诱发微核为主,此比值倒置(0. 08 - 0. 28) 。当剂量低至一定程度时,纺锤体毒剂只诱发多核(不诱发微核) ,而断裂剂则只诱发微核。还发现两类诱变剂间此比值的差异远大于微核面积或直径的差异。本研究结果提示在体外微核试验中同时计数微核细胞率和多核细胞率可能对鉴别纺锤体毒剂和断裂剂有意义。

本文从三个方面探索了爱普列特( Epristeride) 的生殖毒性。SD 大鼠口服9 周爱普列特后合笼,观察交配率、怀孕率和胎仔的发育情况;小鼠口服高剂量爱普列特后对精子形态的影响;体外电刺激对小鼠输精管收缩的影响。结果表明高剂量虽使大鼠怀孕率略有下降,小鼠精子的形态有所影响外,但统计无显著性差别,其他指标均属正常。提示爱普列特有一个较宽的不影响生育力的剂量范围。

给小鼠吸入70 号汽油30d、60d、90d ,动态观察了不同剂量的汽油(250mg/ m3 、500mg/ m3 、1000mg/m3) 对小鼠骨髓细胞染色体畸变(CA) 及微核(MN) 的影响。结果小鼠吸入汽油90d ,在剂量为1000mg/ m3 的浓度下,染色体畸变率与阴性对照有非常显著差异( P < 01005) ;而小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验在小鼠吸入汽油60d 时高剂量下(1000mg/ m3 ) ,90d 时中剂量(500mg/ m3 ) 、高剂量(1000mg/ m3 ) 下与阴性对照有显著性差异( P < 0101 、P < 0105、P < 01005) 。表明长期慢性吸入汽油对小鼠骨髓细胞染色体有损伤作用。

本文应用体外培养人淋巴细胞和小鼠骨髓细胞微核的检测,对低剂量γ2射线与香烟的复合诱变作用进行了研究。结果表明:香烟(018～1 支/ ml) 与低剂量γ-射线(0. 25110Gy) 均显著诱发培养人淋巴细胞微核的形成( P < 0101) ,并呈明显的剂量效应;低剂量γ2射线联合香烟处理培养人淋巴细胞,诱发微核率显著高于对照组。小鼠体内实验也表明了低剂γ2射线联合高浓度香烟对小鼠骨髓细胞微核有明显诱发作用。结果提示低剂量γ-射线联合香烟可加强遗传物质的损伤。

本实验目的探讨具有相同碳原子长度的亚麻酸、亚油酸及油酸处理BEL - 7402 人肝癌细胞后对DNA 合成和甲胎蛋白(AFP) 分泌抑制的影响。放射免疫法检测肝癌细胞分泌甲胎蛋白(AFP) 含量,3H - TdR掺入法测定DNA 合成放射活性(CPM) 。实验结果表明,三种脂肪酸能抑制肝癌细胞DNA 合成,其中亚麻酸、亚油酸抑制作用明显,有显著性差异( P < 0. 01) ,油酸作用较弱( P > 0. 05) ;40 - 50μg/ ml 亚麻酸能明显地抑制肝癌细胞AFP 分泌( P < 0. 05) ,亚油酸和油酸与对照相比无显著性差异( P > 0. 05) 。结果显示,三种脂肪酸分子中含有数量不同的双键,脂肪酸对肝癌细胞DNA 合成和甲胎蛋白分泌的抑制作用存在构效关系,与分子中双键数量有关。本研究扩充了脂肪酸的用途,为癌症病人的保健和治疗提供实验依据。

本文用小鼠骨髓嗜多染细胞微核试验,研究了黄芪水提物对诱变剂环磷酰按(CP) 的抗或去诱变作用。结果表明:对大剂量CP (40mg/ kg) 诱发的微核,未发现黄芪有明显的抑制作用,但是对低剂量CP (5 -10mg/ kg) 诱发的微核形成具有明显抑制作用;其作用机理主要是抗诱变作用而并非去诱变作用;黄芪对高剂量诱变原(CP) 的抗诱变作用,主要表现在促进DNA 修复或诱变原排出等方面。

本文研究了维生素B6 体外体内试验对SCE 频率的影响,体外试验不同剂量VitB6 诱发中国仓鼠肺细胞株细胞(CHL) 及人周血淋巴细胞的SCE 频率显著升高( P < 0101) ,但体内试验VitB6 诱导的小鼠骨髓细胞SCE 频率与对照组比较无显著性差别( P > 0. 05) ,看来VitB6 在体内不是致突变剂。

本文对玉米花粉山楂口服液进行了四项致突变试验,结果表明该受试物Ames 试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验为阴性、人体外周血淋巴细胞体外培养染色体畸变试验和小鼠精子畸形试验均未引起畸变率升高。试验结构表明,OCPHL 无致突变性。

本实验以绿茶为材料,以明矾为诱变剂,以微核率作为DNA 损伤指标。结果含10 %绿茶饲料使明矾诱发的微核率从7167 ±1197 ‰降至3150 ±1105 ‰( P < 0101) 。表明绿茶对明矾诱发的DNA 损伤具有明显抑制作用。

利用蚕豆根尖细胞微核方法,检测汞的诱变效应。结果表明,用25PPM 至150PPM 的不同浓度的HgCl2 溶液处理蚕豆根尖,微核总数及微核率明显高于阴性对照组( P < 0105) ,从实验数据方差分析得知,各组实验数据与对照组数据之间均存在着差异( t > 314) 。用0 - 110 PPM 低浓度溶液处理,蚕豆根尖伤害不明显,说明Hg2 + 不是强诱变剂。

错配修复基因的突变导致错配修复功能缺陷,引起DNA 复制保真度下降,为研究其在肿瘤发生中的作用,近年来对错配修复缺陷细胞系的自发突变性进行了大量研究。本文将介绍一些研究成果。

烷化剂可通过对DNA 的直接攻击及使细胞处于应激状态引起一系列反应,它可诱导许多基因表达的改变,除修复相关基因(已对其进行过专门综述) 外,其诱导表达的参与细胞周期调控及转录调控等应激相关基因可参与细胞应激反应,引起细胞对外界损伤剂的耐受,提供细胞对烷化剂的抗性,也参与癌变·突变的发生。本文综述了这些烷化剂诱导基因的表达及作用。

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