目的：探讨MPDZ基因在肝癌组织中的拷贝数和表达变化情况，并评价其与临床病理指标之间的关系以及对肝癌诊断和预后判断的价值。方法：利用TCGA数据库分析MPDZ基因在299例肝癌组织中的拷贝数改变情况及其与表达的关系；同时分析TCGA数据中MPDZ基因在282例肝癌组织和50例癌旁组织中的表达及其与临床病理指标和生存预后的关系。结果：MPDZ基因在肝癌组织中存在明显的拷贝数变异，且拷贝数变异的主要类型为拷贝数缺失（31.44%）；同时MPDZ基因拷贝数缺失后MPDZ mRNA表达下调。MPDZ基因在肝癌组织中的表达显著低于癌旁组织，差异具有统计学意义（P < 0.05）。Kaplan-Meier分析显示，MPDZ基因低表达患者的生存时间短于高表达患者，差异具有统计学意义（Log-rank=12.48，P < 0.05）。受试者工作特征曲线（ROC）分析结果表明，MPDZ基因表达是一个灵敏度和特异度较好的肝癌诊断指标（AUC=0.86）。结论：MPDZ基因拷贝数缺失可能与肝癌的发生有关，MPDZ基因的表达对肝癌的诊断及生存预后判断具有参考价值。

目的：检测食管鳞癌组织及细胞系中KIAA1522基因不同转录本的表达及丰度，确定其蛋白的表观分子量，为进一步研究KIAA1522在食管癌中的表达改变及功能提供实验依据。方法：使用反转录PCR（RT-PCR）及实时荧光定量PCR（qPCR）检测食管癌组织及细胞系中KIAA1522基因4个不同转录本的表达及丰度；以特异性siRNA敲降食管癌细胞中KIAA1522的表达，并在模式细胞中过表达KIAA1522，通过Western blot检测确定KIAA1522的表观分子量，并通过质谱分析验证KIAA1522条带的序列组成。结果：KIAA1522的转录本T1和T4在食管鳞癌组织及多个细胞系中均有表达，其中T1的表达丰度相对最高。Western blot检测中观察到的分子量为170 kDa的条带为KIAA1522基因特异性的蛋白表达产物，同时质谱分析结果也证实该条带为KIAA1522多肽。结论：T1为食管鳞癌组织及细胞系中KIAA1522基因的优势转录本，KIAA1522蛋白的表观分子量为170 kDa。

目的：探讨2，2'，4，4'-四溴联苯醚（BDE-47）对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖及对RXRα、TRs、PPARs核受体表达水平的影响，为阐明多溴联苯醚化合物神经毒性作用提供科学依据。方法：采用CCK-8法检测不同浓度BDE-47处理不同时间后的SK-N-SH细胞增殖情况；再以5、10和20 μmol/L BDE-47染毒细胞24 h后，分别采用DCFH-DA荧光法、WST-1法、比色法、qPCR法测定胞内ROS水平、SOD活力、GSH-Px活力及hOGG1 mRNA表达量；采用qPCR及Western blot检测BDE-47对RXRa、TRs、PPARs受体mRNA及蛋白表达水平的影响。结果：BDE-47抑制SK-N-SH细胞增殖，其抑制作用呈明显的时间和剂量效应关系（P < 0.05），24 h半数抑制浓度（IC₅₀）为75.94 μmol/L；与溶剂对照组相比，10和20 μmol/L BDE-47导致细胞内ROS水平上升、SOD活力下降、GSH-Px活力下降、hOGG1 mRNA水平上升，并可致SK-N-SH细胞氧化损伤（P < 0.05或P < 0.01）；BDE-47可诱导RXRα、TRs及PPARs受体各亚型mRNA及蛋白表达显著上升（P < 0.05或P < 0.01），并且对各亚型的诱导程度不一。结论：BDE-47抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖，导致氧化损伤，上调RXRα、TRs、PPARs核受体的表达从而介导神经毒性作用。

目的：探讨铁超载对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）模型大鼠脂代谢的影响。方法：48只雄性SD大鼠随机分成空白对照组（基础饲料）、高铁组（含1% FeSO₄的基础饲料）、高脂组（高脂饲料）、高脂低铁组（含0.5% FeSO₄的高脂饲料）、高脂高铁组（含1% FeSO₄的高脂饲料）。干预20周后，称取大鼠体质量；肝脏油红O染色观察肝脏脂质堆积情况；测定肝脏内甘油三酯（TG）含量；实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot分别检测大鼠肝脏中脂肪酸合成酶（FAS）、肉碱酰基转位酶Ⅰ（CPT1）的mRNA和蛋白表达水平。结果：与对照组比较，高脂膳食20周使大鼠体质量、肝脏TG含量均明显增加（P均 < 0.05），并促进TG在肝脏的沉积；且FAS的mRNA和蛋白水平均增加，CPT1的mRNA和蛋白水平均降低（P均 < 0.05）。与高脂组比较，高脂高铁组大鼠肝脏TG含量明显增加（P < 0.05）；FAS的mRNA和蛋白水平均显著增加，CPT1的mRNA和蛋白水平均降低（P均 < 0.05）。结论：铁超载能够促进NAFLD大鼠肝脏脂质堆积，加重脂代谢紊乱，促进NAFLD病程进展。

目的：探讨铁超载对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）HepG2细胞模型中铁代谢指标Hepcidin和Fpn-1的影响。方法：采用四甲基噻唑蓝（MTT）法分别检测浓度均为0.062 5、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L的油酸（OA）和硫酸亚铁铵[Fe（NH₄）₂·（SO₄）₂·6H₂O，下称Fe]对HepG2细胞活力的影响，确定OA和Fe联合给药浓度。采用0.5 mmol/L OA联合不同浓度（0、0.125、0.25、0.5 mmol/L）的Fe诱导HepG2细胞建立NAFLD 细胞模型，并设阴性对照组（未经药物处理的细胞）和0.5 mmol/L Fe单独处理组为对照，测定细胞内甘油三酯（TG）和铁蛋白（Fn）含量。采用实时荧光定量PCR（qPCR）法和Western blot法测定细胞中铁调素（Hepcidin）、膜铁转运蛋白（Fpn-1） mRNA和蛋白的表达。结果：与阴性对照组相比，0.5 mmol/L的OA，0.125、0.25、0.5 mmol/L的Fe对细胞存活率无明显影响（P > 0.05）。与对照组和0.5 mmol/L OA组相比，0.5 mmol/L OA与各浓度Fe联合作用时，随着铁浓度增大，细胞内的TG和铁蛋白（Fn）含量逐渐增加，差异具有统计学意义（P < 0.05）。与对照组和0.5 mmol/L OA组相比，0.5 mmol/L OA联合不同浓度Fe处理后Hepcidin的mRNA和蛋白表达均明显下降（P < 0.05）；0.5 mmol/L OA联合不同浓度Fe处理后Fpn-1 mRNA的表达均明显上调（P < 0.05）；与对照组相比，0.5 mmol/L Fe组、0.5 mmol/L OA联合0.25、0.5 mmol/L Fe组Fpn-1蛋白水平明显降低（P < 0.05）。结论：0.5 mmol/L OA联合不同浓度Fe处理时可引起细胞发生脂质沉积，使体内正常铁代谢发生紊乱，Hepcidin的mRNA和蛋白表达均明显下降，Fpn-1 mRNA表达上调而蛋白表达下降，进一步加重NAFLD的进展。

目的：探讨叶酸（FA）对1，3-丁二烯（BD）诱发的小鼠遗传损伤和DNA甲基化改变的保护作用。方法：雄性昆明小鼠喂养相应饲料3周建立叶酸正常组（FA-C）、叶酸缺乏组（FA-D）以及叶酸补充组（FA-S）动物模型，每组小鼠18只，再随机分为对照组、BD低剂量和高剂量染毒组（0、13.82、1 382.14 mg/m³），染毒组小鼠每天吸入染毒6 h，每周5 d，连续染毒2周。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中FA浓度和肝组织基因组DNA总体甲基化水平，荧光定量PCR检测DNA甲基转移酶DNMT1和DNMT3a mRNA的表达，胞质分裂阻滞微核试验分析外周血淋巴细胞的染色体损伤。结果：动物喂养3周后，与FA-C组相比，FA-D组血清FA浓度显著降低，FA-S组显著升高。在相同FA处理条件下，随BD染毒剂量升高，小鼠肝组织基因组DNA甲基化水平及甲基转移酶表达出现降低趋势，微核、核质桥及核芽突比率显著升高。在相同BD染毒条件下，与FA-C组比较，FA-D组的DNA甲基化水平和DNMT1、DNMT3a的mRNA表达出现下降趋势，而微核率等染色体损伤出现升高趋势；相反，FA-S组的DNA甲基化水平及DNMT1、DNMT3a的mRNA表达出现升高趋势，染色体损伤出现降低趋势，尤其在高剂量BD染毒条件下，叶酸补充对上述指标的影响均存在显著性差异（P < 0.05或0.01）。结论：BD可诱导小鼠的DNA低甲基化改变及染色体损伤，叶酸缺乏可加重BD所致DNA低甲基化和遗传损伤，而补充叶酸则对BD诱导的甲基化改变和遗传损伤具有保护效应。

目的：建立CCM3基因敲降的斑马鱼模型，探讨其作为水体中低浓度心血管毒性污染物的生物监测模型的可能性。方法：选取绿色荧光标记的血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）转基因斑马鱼作为研究对象，采用吗啡啉修饰的反义寡聚核苷酸（MO） 对斑马鱼单细胞期受精卵进行显微注射，采用激光共聚焦显微镜观察受精后72 h的幼鱼脑部血管发育形态，建立CCM3基因敲降的斑马鱼模型。通过改进寇氏法测定铅对斑马鱼的半数致死剂量（LD₅₀）。在低浓度10 mg/L铅暴露下分别对正常基因型和CCM3基因敲降型的斑马鱼卵进行染毒，同时设立对照组（无铅暴露），观察各组斑马鱼发育情况。结果：野生型斑马鱼铅染毒的LD₅₀为31.24 mg/L。在相同低浓度10 mg/L铅暴露的情况下，受精后72 h时正常基因型的斑马鱼幼鱼和对照组的斑马鱼幼鱼各项发育指标无明显异常，而注射亚表型剂量的CCM3 MO 0.25 ng组斑马幼鱼出现形态发育异常表型，如发育迟缓、脊柱弯曲、心包水肿、卵黄囊水肿等。结论：CCM3基因敲降的斑马鱼模型可作为水体中具有心血管毒性污染物的敏感生物监测模型。

目的：研究抑制乳腺癌耐药蛋白（ABCG2）表达对乳腺癌细胞耐药性的逆转作用，为乳腺癌基因靶向治疗提供新思路。方法：通过透射电镜和纳米粒度电位分析仪对磁性纳米颗粒（polyMAG）的粒径、电位进行表征，利用凝胶电泳阻滞实验检测polyMAG 与siRNA的结合情况，并用polyMAG携载不同浓度（5、10、20、50、100 nmol/L）ABCG2-siRNA，将其转染入乳腺癌细胞耐药株（MCF-7/ADR）后，采用CCK-8检测siRNA转染后细胞的存活率，荧光定量PCR和Western blotting分别检测ABCG2 mRNA和蛋白表达水平，Calcein-AM/PI染色观察细胞凋亡。结果：polyMAG粒径约100 nm，呈正电荷，表面电位29.6 mV。当polyMAG与ABCG2-siRNA的比为1：1和1：2时ABCG2-siRNA可完全结合。当20~100 nmol/L polyMAG-siRNA干扰ABCG2表达后，细胞存活率较未转染组明显降低（P < 0.05）。20 nmol/L polyMAG-siRNA转染组ABCG2 mRNA表达显著下调，约为未转染组的1/8（P < 0.05），且凋亡细胞较其他组明显增多；50 nmol/L polyMAG-siRNA转染后可明显干扰ABCG2蛋白表达（P < 0.05）。结论：polyMAG-siRNA能高效干扰ABCG2表达，增加MCF-7/ADR细胞对阿霉素敏感性，逆转细胞耐药。

目的：探讨乳腺癌T47D细胞通过激活mTOR通路调控SNCG表达水平，从而抑制乳腺癌细胞辐射敏感性的分子机制。方法：检测不同剂量γ射线照射后的T47D乳腺癌细胞中mTOR蛋白表达水平。在细胞培养液中加入不用浓度磷脂酸（PA，mTOR通路激活剂）进行培养，以常规培养细胞为对照组，采用Western blot法检测对照组和激活剂组细胞SNCG蛋白的表达。对照组和激活组细胞采用4 Gy γ射线照射24 h，检测照射后SNCG mRNA和蛋白的表达情况，并采用平板细胞克隆形成实验检测克隆形成率。同时，将转染SNCG siRNA的乳腺癌T47D细胞株分成激活组和对照组，验证SNCG在乳腺癌细胞辐射敏感性抵抗中的生物学功能。结果：不同剂量射线照射后，mTOR蛋白表达水平显著升高。mTOR激活剂PA处理后的细胞对乳腺癌细胞放射敏感性具有明显的抑制作用，同时Western blot显示γ射线照射处理后的乳腺癌细胞中SNCG蛋白的表达水平异常。Western blot和qPCR方法检测发现，T47D对照组和干扰SNCG基因的T47D细胞实验组中，激活mTOR或γ射线照射均能引起SNCG蛋白和mRNA表达增加。克隆形成实验进一步证明，降低SNCG的表达可显著抑制T47D细胞克隆形成能力。结论：在乳腺癌细胞中，mTOR介导的SNCG表达调控对乳腺癌细胞抗辐射起着重要作用，降低SNCG的表达可提高辐射敏感性，提示在临床治疗中有可能通过使用SNCG抑制剂或mTOR抑制剂提高乳腺癌细胞在放化疗中的敏感性。

目的：研究邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）长期暴露后，雌性大鼠体内的代谢情况及对肝脏的影响。方法：将Wistar雌性大鼠64只按体质量随机分为4组，分别为对照（玉米油）组和150、300、600 mg/mL DEHP染毒组，每组16只。采用灌胃方式进行染毒，每天灌胃1次，每次按2.5 μL/g给予，连续灌胃6个月。期间观察大鼠一般生长状况，分别在染毒后3个月和6个月两个时间点采集大鼠尿液。6个月后处死各组大鼠，摘取大鼠的肝、脾和肾称取质量，计算脏体比值；并制备肝组织切片，采用HE染色法观察肝组织形态变化。对采集的2个时间点大鼠尿液，采用高效液相色谱的方法检测尿中DEHP及其代谢物邻苯二甲酸单（乙基己基）酯（MEHP）的含量。结果：与对照组相比，各剂量染毒组大鼠一般生长情况无明显差异，但肝脏的脏体比值增加，HE染色显示300和600 mg/mL DEHP染毒组大鼠肝脏组织轻微病理改变。与对照组相比，3个月时，300和600 mg/mL DEHP组随着染毒剂量的增加，大鼠尿液中DEHP和MEHP含量均明显增加，差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。6个月时，600 mg/mL DEHP染毒组大鼠尿液中DEHP和MEHP含量高于其他3组，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：雌性大鼠长期暴露DEHP，体内DEHP和MEHP的残留和蓄积会增加，超过正常的代谢能力，可能会对肝脏造成一定程度的损伤。

目的：探讨RNA解旋酶DDX46基因对食管鳞癌细胞株Eca-109增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法：以人永生化食管鳞状上皮细胞Het-1A为对照，实时荧光定量PCR（qPCR）检测DDX46 mRNA在Eca-109细胞中的相对表达水平。应用shRNA干扰技术沉默Eca-109细胞DDX46基因后，分别采用MTT实验、克隆形成实验及流式细胞术检测细胞增殖情况、克隆形成能力以及细胞周期和细胞凋亡情况。并用Western blot检测DDX46基因沉默后Eca-109细胞DDX46蛋白和凋亡信号转导通路关键分子Caspase-3和PARP-1蛋白表达的变化。结果：与Het-1A细胞相比，Eca-109细胞DDX46 mRNA的表达水平显著升高（P < 0.01）。与对照组相比，靶向沉默DDX46基因后MTT实验显示Eca-109细胞活力明显减弱，增殖能力被显著抑制（P < 0.01）；克隆形成实验显示Eca-109细胞克隆形成能力被显著抑制（P < 0.01）；流式细胞术检测显示处于G1期的细胞增加，而处于S期的细胞减少（P < 0.05），细胞周期停滞于G0/G1期；凋亡实验显示细胞凋亡率显著增加（P < 0.01）。Western blot检测显示，与对照组比较，DDX46-shRNA干扰使Eca-109细胞DDX46蛋白表达水平显著下降（P < 0.01），而cleaved Caspase-3和cleaved PARP-1蛋白表达水平显著上升（P < 0.01）。结论：DDX46 mRNA在食管鳞癌Eca-109细胞中高表达，DDX46基因沉默可能通过激活细胞凋亡信号转导通路而发挥抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

目的：探讨外周血白细胞端粒相对长度与噪声性听力损失（NIHL）的相关性。方法：用SV104IS无线个体噪声剂量计对某电脑机箱外壳制造企业所有作业岗位进行噪声强度检测，选择噪声强度超标[L_{EX，8 h} ≥ 85 dB（A）]生产岗位的全体生产工人作为研究对象。采用问卷调查法获得研究对象的一般情况和职业史，实时荧光定量PCR检测研究对象外周血白细胞端粒相对长度，有序多分类Logistic回归法分析外周血白细胞端粒相对长度与噪声性听力损失（NIHL）的相关性。结果：该企业噪声超标作业岗位噪声强度（L_{EX，8 h}）均值为（91.30±3.22） dB（A）。本次研究共调查127名噪声作业者：双耳听力正常43人（33.86%），双耳高频听阈提高75人（59.06%），单耳或双耳语频听阈提高伴双耳高频提高9人（7.09%）。不同NIHL程度工人的端粒相对长度差异有统计学意义（P < 0.05）。有序多分类Logistic回归分析显示，噪声强度、年龄、端粒相对长度、性别是NIHL的影响因素（P < 0.05）。结论：外周血白细胞端粒长度可能是发生NIHL的易感性生物标志物。

目的：检测粤东地区妇女人乳头瘤病毒（HPV）感染情况及亚型分布，探讨其与宫颈癌的关系。方法：选取2015年10月-2016年9月粤东地区7家三级医院30 000例行宫颈筛查的妇女作为研究对象。收集所有对象宫颈脱落细胞，采用HybriMax方法对HPV感染情况进行检测。对8 739例宫颈病变患者进行宫颈组织活检与HPV分型。比较分析不同病变类型以及年龄段HPV感染率与亚型分布。结果：脱落细胞检查个体中，HPV阳性者9 000例，感染率为30.00%。在8 739例行宫颈活检的宫颈病变患者中，HPV感染率为58.29%（5 094/8 739），慢性宫颈炎中HPV感染率为40.00%（1 088/2 720），CINⅠ中为53.59%（1 396/2 605），CINⅡ/Ⅲ中为71.61%（1 647/2 300），宫颈癌中为86.45%（963/1 114）。在各种宫颈病变中，HPV 16、18、33、58、52是最常见的高危亚型，感染率依次是14.02%、6.28%、5.23%、4.46%、3.71%。在宫颈癌患者中，最常见的亚型是HPV 16； ≥ 60岁的人群中HPV感染率最高，达到49.92%。结论：粤东地区HPV感染最常见的亚型为16、18、33、58、52型，宫颈病变程度越重，HPV的感染率越高。在宫颈癌患者中，HPV 16是最为常见的亚型，中老年患者的HPV感染率高于年轻人，单一感染可能更易导致宫颈癌的发生。

目的：通过病例对照研究分析胃癌患者与健康人群血浆某些化学元素的差异及其与胃癌的关系。方法：采用成组病例对照研究方法，收集在仙游县本地居住10年以上，并经病理确诊的新发胃癌病例共299例，胃癌死亡率相近居住地的健康对照295例。通过问卷调查及血样采集等方式获取病例及对照组的一般情况、生活习惯等信息，运用微波消解法处理血样，电感耦合等离子体质谱法检测血浆化学元素。运用非参数检验比较两组人群血浆中化学元素含量的差异。结果：血浆化学元素在病例组和对照组中存在差异，病例组中铜（Cu）、镁（Mg）和Cu/锌（Zn）高于对照组（P < 0.01），病例组中钼（Mo）和钙（Ca）低于对照组（P < 0.01）；通过多因素分析发现血浆Cu（OR=2.71）、Mg（OR=2.26）、Cu/Zn（OR=3.88）增加胃癌发病的风险，Mo（OR=0.48）、Ca（OR=0.7）减少胃癌发病的风险（P均 < 0.05）。结论：胃癌患者血浆某些化学元素水平较正常人群有显著变化。

目的：比较致畸试验中3种常用阳性对照物的致畸效应，为食品、保健品、化妆品致畸试验中阳性对照物的选择提供参考。方法：将交配成功的SD大鼠按照妊娠时间随机分为4组，分别为阴性对照组，阿司匹林组（280 mg/kg），敌枯双组（1 mg/kg）和环磷酰胺组（12 mg/kg）。阿司匹林组和敌枯双组于受孕后第6~15天按10 mL/kg分别灌胃相应的溶液，环磷酰胺组于受孕后第12天腹腔一次注射给药。记录受孕后第0、6、9、12、15、20天孕鼠体质量。于受孕后第20天麻醉处死孕鼠，迅速取出子宫，称子宫连胎质量及子宫质量，记录黄体数、着床数及胚胎发育情况。对胎仔进行外观检查，逐一记录性别、体质量、体长。将每窝1/2活胎鼠染色做骨骼检查，另外1/2活胎鼠固定做内脏检查。结果：与阴性对照组比较，阿司匹林组孕鼠第15、20天体质量及体质量增量降低，子宫、子宫连胎质量降低，活胎率减少，活胎鼠体质量、体长、尾长均降低（P < 0.05或P < 0.01）；敌枯双组活胎率降低，活胎鼠体质量、体长、尾长均降低（P < 0.01）；环磷酰胺组孕鼠体质量增量降低，子宫、子宫连胎质量降低，活胎率减少（P < 0.05或P < 0.01）；3种阳性对照物处理组大鼠胎仔外观畸形率、骨骼畸形率及内脏畸形率明显升高（P < 0.01），以敌枯双组和环磷酰胺组畸形率较高，畸胎类型多。结论：在本试验条件下，可见敌枯双（1 mg/kg）和环磷酰胺（12 mg/kg）处理组大鼠的畸形率高，畸胎类型多，是较为敏感的、致畸类型较全面的阳性对照物。

为了解遗传毒性测试方法在烟草制品体外毒理学评价中的应用，本文对目前在烟草制品体外毒理学评价中常用的检测方法和国内外在烟草制品体外遗传毒性检测领域所取得的成果及研究进展，以及开展烟草制品遗传毒性检测可能存在的问题进行了综述，拟为遗传毒性检测技术更好地应用于评估烟草制品提供思路。